Mantenimiento de la línea celular HEp-2 infectada con cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis serovar L2.

Chlamydia trachomatis es una bacteria intracelular obligada, Gram negativa, capaz de causar la infección de transmisión sexual bacteriana más prevalente en el mundo. Esta infección generalmente suele cursar de manera asintomática, sin embargo cuando cursa de forma sintomática puede llegar a generar...

Full description

Autores:
Cortés Pineda, Angie Lorena
Gómez Torres, Maura
González Pacheco, Laura Julieth
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2022
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/5683
Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/5683
Palabra clave:
Células HEp-2,
Cuerpos elementales
Inclusiones
Giemsa
Propagación
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Infección
Cultivo celular
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License
Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2022
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description Chlamydia trachomatis es una bacteria intracelular obligada, Gram negativa, capaz de causar la infección de transmisión sexual bacteriana más prevalente en el mundo. Esta infección generalmente suele cursar de manera asintomática, sin embargo cuando cursa de forma sintomática puede llegar a generar afecciones, tales como linfogranuloma venéreo, generalmente en hombres y embarazo ectópico en mujeres. El presente proyecto tiene como objetivo realizar el cultivo y mantenimiento de la línea celular HEp-2 infectada con cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis serovar L2, para lo cual, se mantuvieron cultivos celulares seriados de la línea celular HEp-2 en óptimas condiciones, alcanzando así una confluencia del 90% al 100% para realizar la infección de las células HEp-2 con cuerpos elementales. Se realizaron coloraciones, como la coloración azul de tripano para evaluar la viabilidad celular, y la coloración de Giemsa para evaluar la morfología celular y bacteriana -intra y extracelular-. Tras llevar a cabo los diferentes ensayos, se comprobó que es posible infectar periódicamente las células HEp-2 partiendo de una línea celular previamente infectada con cuerpos elementales, al completar su ciclo de vida, sin embargo, aún deben dilucidarse con más estudios, otros aspectos referentes al mantenimiento de la línea celular infectada y se invita a los nuevos investigadores a continuar futuras investigaciones de infección acerca de líneas celulares con cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis serovar L2
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El presente proyecto tiene como objetivo realizar el cultivo y mantenimiento de la línea celular HEp-2 infectada con cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis serovar L2, para lo cual, se mantuvieron cultivos celulares seriados de la línea celular HEp-2 en óptimas condiciones, alcanzando así una confluencia del 90% al 100% para realizar la infección de las células HEp-2 con cuerpos elementales. Se realizaron coloraciones, como la coloración azul de tripano para evaluar la viabilidad celular, y la coloración de Giemsa para evaluar la morfología celular y bacteriana -intra y extracelular-. Tras llevar a cabo los diferentes ensayos, se comprobó que es posible infectar periódicamente las células HEp-2 partiendo de una línea celular previamente infectada con cuerpos elementales, al completar su ciclo de vida, sin embargo, aún deben dilucidarse con más estudios, otros aspectos referentes al mantenimiento de la línea celular infectada y se invita a los nuevos investigadores a continuar futuras investigaciones de infección acerca de líneas celulares con cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis serovar L2Tabla de contenido Resumen12 Introducción...14 1.Objetivos...16 2. Antecedentes..18 3. Marco referencial. .23 3.1 Cultivo celular..….23 3.2 Chlamydia..…24 3.2.1 Chlamydia trachomatis...25 3.2.2 Ciclo de vida de Chlamydia trachomatis. .26 3.2.3 Manifestaciones clínicas de Chlamydia trachomatis.….28 3.3 Linfogranuloma venéreo. ..30 4. Diseño metodológico. ..32 4.1 Tipo y alcance de investigación.32 4.2 Universo, población y muestra..33 4.3 Hipótesis, variables e indicadores.…34 4.4 Técnica y procedimientos.….35 4.4.1 Preparación y mantenimiento del cultivo de células HEp-2.…..35 4.4.2 Coloración con Giemsa de las células HEp-2.36 8 4.4.3 Viabilidad de las células HEp-2, por el método de exclusión Azul de Tripano..37 4.4.4 Infección de las células HEp-2 con cuerpos elementales Chlamydia trachomatis, serovar L2....….37 4.4.5 Propagación de EB’s de Chlamydia trachomatis, a partir de la línea celular HEp-2 previamente infectada......39 5. Resultados.40 5.1 Cultivo y mantenimiento de la línea celular HEp-2...40 5.2 Línea celular HEp-2 teñida con Giemsa ....…42 5.3 Viabilidad de las células HEp-2.....…43 5.4 Infección de células HEp-2 con Chlamydia trachomatis serovar L2......…..44 5.4.1 Coloración con Giemsa de la línea celular HEp-2 infectada con cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis serovar L2.…46 5.5 Propagación de EB’s de C. trachomatis a partir de la línea celular HEp-2 previamente infectada.…..49 5.6 Mantenimiento de la línea celular HEp-2 infectada con EB´s de Chlamydia trachomatis.50 6. Discusión. .…...52 7. Conclusiones. ..…55 8. Referencias bibliográficas...56PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico56p.application/pdfspaDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2022https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbMantenimiento de la línea celular HEp-2 infectada con cuerpos elementales de Chlamydia trachomatis serovar L2.Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionFacultad de Ciencias de la SaludBogotaBacteriología y Laboratorio ClínicoHoward L, Orenstein N, King N. Purification on Renografin Density Gradients of Chlamydia trachomatis Grown in the Yolk Sac of Eggs. American Society for Microbiology Journals. 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