Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa
A nivel clínico, la generación de resistencia a través de diferentes estrategias por parte de los microorganismos patógenos es de gran importancia en salud pública, ya que genera menores opciones de tratamiento, mayores tasas de morbimortalidad, y aumento de costos a nivel salud. Dentro de los mecan...
- Autores:
-
Acosta Urrego, Edith Yunary
Martínez Lugo, Wendy Gineth
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2018
- Institución:
- Colegio Mayor de Cundinamarca
- Repositorio:
- Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3702
- Acceso en línea:
- https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3702
- Palabra clave:
- Microorganismos
Salud pública
Morbimortalidad
Patógenos
Aureus
Epidermidis
coli
P. aeruginosa
Biopelícula
Péptidos antimicrobianos
Curvas de crecimiento
- Rights
- closedAccess
- License
- Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018
id |
UCOLMAYOR2_22ca165f2f7c54bc804fde3e3e82e1aa |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/3702 |
network_acronym_str |
UCOLMAYOR2 |
network_name_str |
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca |
repository_id_str |
|
dc.title.spa.fl_str_mv |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa |
title |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa |
spellingShingle |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa Microorganismos Salud pública Morbimortalidad Patógenos Aureus Epidermidis coli P. aeruginosa Biopelícula Péptidos antimicrobianos Curvas de crecimiento |
title_short |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa |
title_full |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa |
title_fullStr |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa |
title_full_unstemmed |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa |
title_sort |
Comparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas Aeruginosa |
dc.creator.fl_str_mv |
Acosta Urrego, Edith Yunary Martínez Lugo, Wendy Gineth |
dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv |
Muñoz Molina, Liliana Constanza |
dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
Acosta Urrego, Edith Yunary Martínez Lugo, Wendy Gineth |
dc.subject.lemb.none.fl_str_mv |
Microorganismos Salud pública Morbimortalidad Patógenos |
topic |
Microorganismos Salud pública Morbimortalidad Patógenos Aureus Epidermidis coli P. aeruginosa Biopelícula Péptidos antimicrobianos Curvas de crecimiento |
dc.subject.proposal.spa.fl_str_mv |
Aureus Epidermidis coli P. aeruginosa Biopelícula Péptidos antimicrobianos Curvas de crecimiento |
description |
A nivel clínico, la generación de resistencia a través de diferentes estrategias por parte de los microorganismos patógenos es de gran importancia en salud pública, ya que genera menores opciones de tratamiento, mayores tasas de morbimortalidad, y aumento de costos a nivel salud. Dentro de los mecanismos de resistencia que generan patógenos como S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa y E. coli esta la generación de biopelícula, que lleva a que todos sus factores de virulencia actúen con mayor capacidad, posean mejor adhesión y colonización a superficies y generen de resistencia al tratamiento convencional con antibióticos. En efecto, hoy en día se busca implementar el uso de péptidos antimicrobianos (PAMs) ya que estos son parte de un mecanismo modulador de la inmunidad innata, y uno de estos péptidos es el péptido humano LL-37 del tipo Catelicidina y sus derivados isoméricos, que poseen gran capacidad para inhibir el crecimiento de microrganismos productores de enfermedades de difícil tratamiento, ya que estos presentan gran resistencia a los antibióticos al generar diferentes mecanismos de defensa y resistencia a la acción de los antimicrobianos a través de la expresión de distintas proteínas. Los péptidos presentan diferentes alternativas de acción contra los patógenos, una de las más importantes es la citotoxicidad mediante la formación de poros en la membrana. Es por ello que se evaluó la capacidad de inhibición de biopelícula por parte del péptido LL-37 en sus formas acetilada y enantiómero D ya que hoy en día los péptidos antimicrobianos se han convertido en una medida eficaz ante la resistencia a los antibióticos. |
publishDate |
2018 |
dc.date.issued.none.fl_str_mv |
2018-05-31 |
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2021-11-22T21:33:33Z |
dc.date.available.none.fl_str_mv |
2021-11-22T21:33:33Z |
dc.type.spa.fl_str_mv |
Trabajo de grado - Pregrado |
dc.type.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
dc.type.coarversion.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 |
dc.type.content.spa.fl_str_mv |
Text |
dc.type.driver.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
dc.type.redcol.spa.fl_str_mv |
https://purl.org/redcol/resource_type/TP |
dc.type.version.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3702 |
dc.identifier.barcode.none.fl_str_mv |
58433 |
url |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3702 |
identifier_str_mv |
58433 |
dc.language.iso.spa.fl_str_mv |
spa |
language |
spa |
dc.relation.references.spa.fl_str_mv |
E. Török ND. Staphylococcal and Streptococcal infections. Medicine (Baltimore) [Internet]. 2005;33(5):97-100. Disponible en: http://www.medicinejournal.co.uk/article/S1357-3039(06)00189- 7/abstract Cervantes García E, García González R, Salazar Schettino PM. Características generales del Staphylococcus aureus. Rev Latinoam Patol Clin Med Lab [Internet]. 2014;61(1):28-40. Disponible en: www.medigraphic.com/patologiaclinica%5Cnwww.medigraphic.org.mx WHO. La OMS publica la lista de las bacterias para las que se necesitan urgentemente nuevos antibióticos [Internet]. 2017. Disponible en: http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2017/bacteriaantibiotics-needed/es/WHO. La OMS publica la lista de las bacterias para las que se necesitan urgentemente nuevos antibióticos [Internet]. 2017. Disponible en: http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2017/bacteriaantibiotics-needed/es/ Uzcudun IL. Biofilms Bacterianos. Actual SEM. 2011;37:14:44-9. Zambrano M, Suarez L. Biofilms bacterianos : sus implicaciones en salud y enfermedad Biofilms : implications in health and disease. Univ Odontol [Internet]. 2006;19-25. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/2312/231220955004.pdf Pletzer D, Coleman SR, Hancock REW. Anti-biofilm peptides as a new weapon in antimicrobial warfare. Curr Opin Microbiol [Internet]. 2016;33:35-40. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.mib.2016.05.016 Téllez GA CJ. Péptidos antimicrobianos. Infectio [Internet]. 2010;14(1):55-67. Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v14n1/v14n1a07.pdf Castañeda Casimiro J, Ortega roque JA, Marcela A, Aquino-andrade A, Serafín lópez J, Estrada-parra S, et al. Péptidos antimicrobianos: péptidos con múltiples funciones. Alergia, asma e Inmunol [Internet]. 2009;18:16-29. Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/alergia/al-2009/al091d.pdf Fabisiak A, Murawska N, Fichna J. LL-37: Cathelicidin-related antimicrobial peptide with pleiotropic activity. Pharmacol Reports [Internet]. 2016;68(4):802-8. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.pharep.2016.03.015 Duplantier AJ, van Hoek ML. The human cathelicidin antimicrobial peptide LL-37 as a potential treatment for polymicrobial infected wounds. Front Immunol. 2013;4(JUL):1-14. Farinas I, Cowan WM, Jessell TM, Cinty DD, Dudek H, Creenberg ME, et al. Use of the Cell Wall Precursor Lipid II by a Pore-Forming Peptide Antibiotic. 1999;286(December):2361-5. Disponible en: http://www.molgenrug.nl/php/doc/publications/mg0302.pdf Montanaro L, Speziale, Pietro, Davide Campoccia1Ravaioli S, Cangini I, Pietrocola G. Scenery of Staphylococcus implant infections in orthopedics. Future Microbiol [Internet]. 2011;6(11):1329-49. Disponible en: http://www.futuremedicine.com/doi/full/10.2217/fmb.11.117 Samuelsen Ø, Haukland HH, Jenssen H, Krämer M, Sandvik K, Ulvatne H, et al. Induced resistance to the antimicrobial peptide lactoferricin B in Staphylococcus aureus. FEBS Lett. 2005;579(16):3421-6 Kagan BL, Selsted ME, Ganz T, Lehrer RI. Antimicrobial defensin peptides form voltage-dependent ion-permeable channels in planar lipid bilayer membranes. Proc Natl Acad Sci U S A. 1990;87(January):210– 214. Wade D, Boman A, Wåhlin B, Drain CM, Andreu D, Boman HG, et al. All- D amino acid-containing channel-forming antibiotic peptides. Proc Natl Acad Sci U S A. 1990;87(12):4761-5 Van Regenmortel MH, Muller S. D-peptides as immunogens and diagnostic reagents. Curr Opin Biotechnol [Internet]. agosto de 1998 [citado 1 de mayo de 2017];9(4):377-82. Disponible en: http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0958166998800116 Gómez EC, Tesis. Evaluación de péptidos sintéticos sobre bacterias, levaduras y mohos [internet]. Universidad nacional de Colombia; 2012. Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/9147/1/32295622.2012.pdf%0A Dürr UHN, Sudheendra US, Ramamoorthy A. LL-37, the only human member of the cathelicidin family of antimicrobial peptides. Biochim Biophys Acta - Biomembr. 2006;1758(9):1408-25. Dean SN, Bishop BM, Van Hoek ML. Susceptibility of Pseudomonas aeruginosa biofilm to alpha-helical peptides: D-enantiomer of LL-37. Front Microbiol. 2011;2(JULY):1-11. De la Fuente Nuñez C, Reffuveille F, Haney EF, Straus SK, Hancock REW. Broad-Spectrum Anti-biofilm Peptide That Targets a Cellular Stress Response. PLoS Pathog. 2014;10(5). Li G, Xie F, Zhang Y, Bossé JT, Langford PR, Wang C. Role of (p)ppGpp in viability and biofilm formation of Actinobacillus pleuropneumoniae S8. PLoS One. 2015;10(10):1-17. Jishage M, Kvint K, Shingler V, Nyström T. Regulation of σ factor competition by the alarmone ppGpp. Genes Dev. 2002;16(10):1260-70. Zhao L, Lu W. Mirror image proteins. Curr Opin Chem Biol [Internet]. 2014;22:56-61. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.09.019 Zhao G, Zhong H, Zhang M, Hong Y. Effects of antimicrobial peptides on Staphylococcus aureus growth and biofilm formation in vitro following isolation from implant-associated infections. Int J Clin Exp Med. 2015;8(1):1546-51. Hilal Yazici, Mary B. O’Neill, Turgay Kacar, Brandon R. Wilson EEO, Mehmet Sarikaya and CT. Engineered Chimeric Peptides as Antimicrobial Surface Coating Agents toward Infection-Free Implants. ACS Appl Mater Interfaces. 2016;8(8):5070-81. Zendejas G, Avalos H, Soto M. Microbiologia general de Staphylococcus aeurus: Generalidades de patogenecidad, metodos de identificacion. Rev Biomed. 2014;25(3):129-43. Orjuela L, Vélez R G V. Bacteriolgía aplicada. Manual de procedimientos. En: Cundinamarca UCM de, editor. Bacteriolgía aplicada Manual de procedimientos. Bogotá; 2014 Corrales R, Avila de N ES. Bacteriología: Teoría Y Práctica. Univ Col mayor Cundinamarca. 2013; V S. Temas de Bacteriología y Virología médica. Etiopatogenia microbiológica, Género Staphylococcus. Segunda. Montevideo, Uruguay; 2006. 257-271 p. Li M, Cha DJ, Lai Y, Villaruz AE, Sturdevant DE, Otto M. The antimicrobial peptide-sensing system aps of Staphylococcus aureus. Mol Microbiol. 2007;66(5):1136-47 orlak E, Korkut E, Uncu AT, Şener Y. Biofilm formation by Staphylococcus aureus isolates from a dental clinic in Konya, Turkey. J Infect Public Health. 2017;10(6):809-13. Kaiser TDL, Pereira EM, dos Santos KRN, Maciel ELN, Schuenck RP, Nunes APF. Modification of the Congo red agar method to detect biofilm production by Staphylococcus epidermidis. Diagn Microbiol Infect Dis. 2013;75(3):235-9. Von Eiff C, Peters G, Heilmann C. Pathogenesis of infections due to coagulase-negative staphylococci. Lancet Infect Dis. 2002;2(11):677-85. Naves PLF. Formación de biopelículas por Escherichia coli y su correlación con factores de virulencia : prevención y actividad de antimicrobianos frente a organismos planctónicos y asociados a biopelículas [Internet]. Universidad Complutense de Madrid; 2010. Disponible en: http://eprints.ucm.es/9780/1/T31422.pdf Hufnagel DA, Depas WH, Chapman MR. The Biology of the Escherichia coli Extracellular Matrix. Microbiol Spectr [Internet]. 2015;3(3):1-14. Disponible en: http://www.asmscience.org/content/journal/microbiolspec/10.1128/micro biolspec.MB-0014- 2014%5Cnhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26185090 Beloin C, Roux A, Ghigo J. Escherichia coli biofilms. Curr Top Microbiol Immunol [Internet]. 2010;322:249-89. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2864707/?report=classic Ochoa SA, López-Montiel F, Escalona G, Cruz-Córdova A, Dávila LB, López-Martínez B, et al. Caracter??sticas patog??nicas de cepas de Pseudomonas aeruginosa resistentes a carbapen??micos, asociadas con la formaci??n de biopel??culas. Bol Med Hosp Infant Mex. 2013;70(2):138-50. Luján Roca DÁ. Pseudomonas aeruginosa: un adversario peligroso. Acta bioquÃ-mica clÃ-nica Latinoam. 2014;48(4):465-74. Overhage J, Campisano A, Bains M, Torfs ECW, Rehm BHA, Hancock REW. Human host defense peptide LL-37 prevents bacterial biofilm formation. Infect Immun. 2008;76(9):4176-82. Otto M. Staphylococcal biofilms. Curr Top Microbiol Immunol. 2008;322:207-28. Red Nacional de la Vigilancia de la resistencia Bacteriana y de las Infecciones Asociadas al Cuidado de la salud, (Colombia). Estado Del Arte De La Resistencia Bacteriana Y La Vigilancia Epidemiológica De Las Infecciones Asociadas Al Cuidado De La Salud En Colombia. 2010;1-31. Teresa Herrera Mendoza Bac Esp M, Revisión A DE. El papel del biofilm en el proceso infeccioso y la resistencia. Nova. 2004;2(2):71-80. Leal AL, Álvarez CA. Boletín. 2017;(2027). Hochbaum AI, Kolodkin-Gal I, Foulston L, Kolter R, Aizenberg J, Losick R. Inhibitory effects of D-amino acids on staphylococcus aureus biofilm development. J Bacteriol. 2011;193(20):5616-22. Nazar J. Biofilms bacterianos. Rev Otorrinolaringol Cir Cabeza Cuello. 2009;67:61-72. Archer NK, Mazaitis MJ, Costerton JW, Leid JG, Powers ME, Shirtliff ME. Properties , regulation and roles in human disease Staphylococcus aureus biofilms. 2011;(October):445-59. Contreras JJ, Sepúlveda M. Bases moleculares de la infección asociada a implantes ortopédicos. Rev Chil infectología órgano Of la Soc Chil Infectología [Internet]. 2014;31(3):309-22. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716- 10182014000300010&lng=es&nrm=iso&tlng=es Vila J, Soriano A, Mensa J. Bases moleculares de la adherencia microbiana sobre los materiales protésicos. Papel de las biocapas en las infecciones asociadas a los materiales protésicos. Enferm Infecc Microbiol Clin [Internet]. 2008;26(1):48-55. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1157/13114395 Pratt LA, Kolter R. Genetic analysis of Escherichia coli biofilm formation: Roles of flagella, motility, chemotaxis and type I pili. Mol Microbiol. 1998;30(2):285-93. Rasamiravaka T, Labtani Q, Duez P, El Jaziri M. The formation of biofilms by pseudomonas aeruginosa: A review of the natural and synthetic compounds interfering with control mechanisms. Biomed Res Int. 2015;2015. Joo H-S, Otto M. Mechanisms of resistance to antimicrobial peptides in staphylococci. Biochim Biophys Acta [Internet]. 2015;[Epub ahea(11):3055-61. Disponible en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25701233 Batoni G, Maisetta G, Esin S. Antimicrobial peptides and their interaction with biofilms of medically relevant bacteria. Biochim Biophys Acta - Biomembr [Internet]. 2016;1858(5):1044-60. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.bbamem.2015.10.013 Ortega-peña S, Franco-cendejas R. Importancia médica del biofilm de Staphylococcus epidermidis en las infecciones de prótesis articular. 2014; Cucarella C, Solano C, Valle J. Bap, a Staphylococcus aureus surface protein involved in biofilm formation. J … [Internet]. 2001;183(9):2888- 96. Disponible en: http://jb.asm.org/content/183/9/2888.short Namvar AE, Bastarahang S, Abbasi N, Ghehi GS, Farhadbakhtiarian S, Arezi P, et al. Clinical characteristics of Staphylococcus epidermidis: a systematic review. GMS Hyg Infect Control [Internet]. 2014;9(3):Doc23. Disponible en: http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?artid=4184040&too l=pmcentrez&rendertype=abstract Schommer NN, Christner M, Hentschke M, Ruckdeschel K, Aepfelbacher M, Rohde H. Staphylococcus epidermidis uses distinct mechanisms of biofilm formation to interfere with phagocytosis and activation of mouse macrophage-like cells 774A.1. Infect Immun. 2011;79(6):2267-76. Kocianova S, Vuong C, Yao Y. Key role of polygamma- DL-glutamic acid in immune evasion and virulence of Staphylococcus epidermidis. J Clin Invest. 2005;115(3):688−694. Ghafoor A, Hay ID, Rehm BHA. Role of exopolysaccharides in Pseudomonas aeruginosa biofilm formation and architecture. Appl Environ Microbiol. 2011;77(15):5238-46. Paharik AE, Horswill AR, Roy J, City I. The Staphylococcal Biofilm: Adhesins, regulation, and host response. Microbiol Spectr [Internet]. 2016;4(2):1-48. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4887152/ Díaz Caballero a. J, Vivas Reyes R, Puerta L, Ahumedo Monterrosa M, Arévalo Tovar L, Cabrales Salgado R, et al. Biopelículas como expresión del mecanismo de quorum sensing: Una revisión. Av en Periodoncia e Implantol Oral. 2011;23:195-201 Loera A, Ramírez F, Avelar F, Guerrero A. Multi-species biofilms : association to survive. Investig Cienc [Internet]. 2012;20(54):49-56. Disponible en: http://www.uaa.mx/investigacion/revista/archivo/revista54/Articulo 7.pdf Mulcahy H, Charron-Mazenod L, Lewenza S. Pseudomonas aeruginosa produces an extracellular deoxyribonuclease that is required for utilization of DNA as a nutrient source. Environ Microbiol. 2010;12(6):1621-9. Ramos AP, Desgarennes CP. Artículo de revisión Péptidos antimicrobianos: antibióticos naturales de la piel. 2007;57-67. Villarruel R, Huizar R, Corrales M, Sánchez T, Islas A. Péptidos naturales antimicrobianos: escudo esencial de la respuesta ininmune. Investig en Salud [Internet]. 2004;VI(3):170-9. Disponible en: http://www.redalyc.org/html/142/14260306/%0Ahttp://www.redalyc.org/r esumen.oa?id=14260306 McDermott A. Péptidos Catiónicos Antimicrobianos . ¿ Una Futura Opción Terapéutica ? Cationic Antimicrobial Peptides — a Future Therapeutic Option ? Arch Soc Esp Oftalmol. 2007;(82):469-70. Nell MJ, Tjabringa GS, Wafelman AR, Verrijk R, Hiemstra PS, Drijfhout JW, et al. Development of novel LL-37 derived antimicrobial peptides with LPS and LTA neutralizing and antimicrobial activities for therapeutic application. Peptides. 2006;27(4):649-60. Bandurska K, Berdowska A, Barczy??ska-Felusiak R, Krupa P. Unique features of human cathelicidin LL-37. BioFactors. 2015;41(5):289-300. Xu W, Zhu X, Tan T, Li W, Shan A. Design of embedded-hybrid antimicrobial peptides with enhanced cell selectivity and anti-biofilm activity. PLoS One. 2014;9(6):1-13. Madar D, Dekel E, Bren A, Zimmer A, Porat Z, Alon U. Promoter activity dynamics in the lag phase of Escherichia coli. BMC Syst Biol. 2013;7. Microbiano C. Reproducción y crecimiento Microbiano. 2009;1-23. Disponible en: http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicr o/08_Tema_6_crecimiento.pdf Greulich P, Dolezal J, Scott M, Evans MR, Allen RJ. Predicting the dynamics of bacterial growth inhibition by ribosome-targeting antibiotics. 2017; Disponible en: http://arxiv.org/abs/1701.03702 Aka ST. Killing efficacy and anti-biofilm activity of synthetic human cationic antimicrobial peptide cathelicidin hCAP-18/LL37 against urinary tract pathogens. J Microbiol Infect Dis [Internet]. 2015;5(1):15-20. Disponible en: http://dergipark.gov.tr/doi/10.5799/ahinjs.02.2015.01.0168 Noore J, Noore A, Li B. Cationic antimicrobial peptide ll-37 is effective against both extraand intracellular staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother. 2013;57(3):1283-90. Ramírez Santos J, Contreras Ferrat G, Gómez Eichelmann MC. La fase estacionaria en la bacteria Escherichia coli. Rev Latinoam Microbiol. 2005;47(3-4):92-101. Arredondo B; VD. Concentración recuento celular y tasa de crecimiento. Métodos y herramientas analíticas en la evaluación la biomasa microalgal. 2007;(January 2007):17-27 Mergaert P. Role of antimicrobial peptides in controlling symbiotic bacterial populations. Nat Prod Rep [Internet]. 2018;35:336-56. Disponible en: http://xlink.rsc.org/?DOI=C7NP00056A Heins A-L, Weuster-Botz D. Population heterogeneity in microbial bioprocesses: origin, analysis, mechanisms, and future perspectives. Bioprocess Biosyst Eng. 2018;0(0):0 Wang L, Keatch R, Zhao Q, Wright JA, Bryant CE, Redmann AL, et al. Influence of type-I fimbriae and fluid shear stress on bacterial behavior and multicellular architecture of early Escherichia coli biofilms at singlecell resolution. Appl Environ Microbiol [Internet]. 2018;(January):AEM.02343-17. Disponible en: http://aem.asm.org/lookup/doi/10.1128/AEM.02343-17 Cádiz jac. Modelo continuo de flujos metabólicos y regulación génica: aplicaciones [internet]. Vol. 1, universidad de chile facultad de ciencias físicas y matemáticas departamento de ingeniería química y biotecnología m. 2014. Disponible en: http://repositorio.uchile.cl/bitstream/handle/2250/129867/cfcanales_jc.pdf?sequence=1 Yu G, Baeder D, Regoes R, Rolff J. Predicting Drug Resistance Evolution: Antimicrobial Peptides Vs. Antibiotics. bioRxiv. 2017;138107. Dean SN, Bishop BM, Hoek ML Van. Natural and synthetic cathelicidin peptides with anti-microbial and anti-biofilm activity against Staphylococcus aureus Natural and synthetic cathelicidin peptides with anti-microbial and anti-biofilm activity against Staphylococcus aureus. BMC Microbiol [Internet]. 2011;11(1):114. Disponible en: http://www.biomedcentral.com/1471-2180/11/114 Sieprawska-Lupa M, Mydel P, Krawczyk K, Wójcik K, Puklo M, Lupa B, et al. Degradation of Human Antimicrobial Peptide LL-37 by Staphylococcus aureus -Derived Proteinases. Antimicrob Agents Chemother. 2004;48(12):4673-9. Vanegas M, Correa N, Morales A, Martínez A, Rúgeles L, Jiménez F. Resistencia a antibióticos de bacterias aisladas de biopelículas en una planata de alimentos. Rev MVZ Córdoba [Internet]. 2009;14(. Disponi2):1677-83ble en: http://revistas.unicordoba.edu.co/revistamvz/mvz142/v14n2a2.pdf Dickinson B. MacConkey Agar. Bd [Internet]. 2014;(July):3. Disponible en: http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8770 |
dc.rights.spa.fl_str_mv |
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018 |
dc.rights.uri.spa.fl_str_mv |
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ |
dc.rights.accessrights.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/closedAccess |
dc.rights.creativecommons.spa.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) |
dc.rights.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_14cb |
rights_invalid_str_mv |
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018 https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) http://purl.org/coar/access_right/c_14cb |
eu_rights_str_mv |
closedAccess |
dc.format.extent.spa.fl_str_mv |
112p. |
dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.publisher.spa.fl_str_mv |
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca |
dc.publisher.faculty.spa.fl_str_mv |
Facultad de Ciencias de la Salud |
dc.publisher.place.spa.fl_str_mv |
Bogotá D.C |
dc.publisher.program.spa.fl_str_mv |
Bacteriología y Laboratorio Clínico |
institution |
Colegio Mayor de Cundinamarca |
bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/1/Diapositivas%20Informe%20final%20w.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/2/Informe%20final%20w.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/3/Informe%20final%20w%20Cartas.pdf https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/4/license.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/5/Diapositivas%20Informe%20final%20w.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/7/Informe%20final%20w.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/9/Informe%20final%20w%20Cartas.pdf.txt https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/6/Diapositivas%20Informe%20final%20w.pdf.jpg https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/8/Informe%20final%20w.pdf.jpg https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/10/Informe%20final%20w%20Cartas.pdf.jpg |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
5ca98060e9a509d17e3e4ed57a59af71 bd7ef0e9848b6b4d7e8661bc4435ee29 5e0016e253d792a3be08de10d03cfd7c 2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7a 8f77f6e57c987adfd5d97e9f4547ad0c 2fff9a51cb228c81f423f5be3184b6ee 5f6b7e10ba5dc87a0314f1f1bee5ee98 2fc3058868dab5824291d80eca7405ab 0cfab12f2ed3532af80638553377b970 c1330876e42908be72d8f7a053d82f12 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Biblioteca Digital Unicolmayor |
repository.mail.fl_str_mv |
repositorio@unicolmayor.edu.co |
_version_ |
1812210119824375808 |
spelling |
Muñoz Molina, Liliana Constanza3c245a61ea61f171a41545b5f8c6ae43600Acosta Urrego, Edith Yunary6a3e2c4c4657c731f890072dba5f6c43Martínez Lugo, Wendy Ginethe77d92689cfa33247d91460289e612612021-11-22T21:33:33Z2021-11-22T21:33:33Z2018-05-31https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/370258433A nivel clínico, la generación de resistencia a través de diferentes estrategias por parte de los microorganismos patógenos es de gran importancia en salud pública, ya que genera menores opciones de tratamiento, mayores tasas de morbimortalidad, y aumento de costos a nivel salud. Dentro de los mecanismos de resistencia que generan patógenos como S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa y E. coli esta la generación de biopelícula, que lleva a que todos sus factores de virulencia actúen con mayor capacidad, posean mejor adhesión y colonización a superficies y generen de resistencia al tratamiento convencional con antibióticos. En efecto, hoy en día se busca implementar el uso de péptidos antimicrobianos (PAMs) ya que estos son parte de un mecanismo modulador de la inmunidad innata, y uno de estos péptidos es el péptido humano LL-37 del tipo Catelicidina y sus derivados isoméricos, que poseen gran capacidad para inhibir el crecimiento de microrganismos productores de enfermedades de difícil tratamiento, ya que estos presentan gran resistencia a los antibióticos al generar diferentes mecanismos de defensa y resistencia a la acción de los antimicrobianos a través de la expresión de distintas proteínas. Los péptidos presentan diferentes alternativas de acción contra los patógenos, una de las más importantes es la citotoxicidad mediante la formación de poros en la membrana. Es por ello que se evaluó la capacidad de inhibición de biopelícula por parte del péptido LL-37 en sus formas acetilada y enantiómero D ya que hoy en día los péptidos antimicrobianos se han convertido en una medida eficaz ante la resistencia a los antibióticos.RESUMEN 13 INTRODUCCIÓN 15 1. ANTECEDENTES 18 2. MARCO REFERENCIAL 24 2.1 Generalidades 24 2.1.1 S. aureus 24 2.1.2 S. epidermidis 26 2.1.3 E. coli 26 2.1.4 P.aeruginosa 27 2.2 Resistencia e importancia clínica 27 2.3 Biopelícula 29 2.3.1 Etapas de la formación de la biopelicula: 30 2.4 Péptidos antimicrobianos (PAMs )35 2.4.1 Clasificación de los péptidos 36 2.5 Péptido LL-37 38 2.5.1 Síntesis 38 2.5.2 Mecanismo de interacción Péptido-Bacteria 39 2.5 Curvas de Crecimiento 40 3. DISEÑO METODOLOGICO 42 3.1 Escala McFarland 42 3.2 Péptidos antimicrobianos 42 3.3 Reconstitución de péptidos 43 3.4 Curvas de Crecimiento y comparación de los resultados 43 3.5 Porcentaje de tasa de inhibición 44 3.6 Cristal violeta. 44 4. RESULTADOS 46 4.1 Curvas de crecimiento 46 4.2 Cristal violeta, determinación de la formación de Biopelícula 53 5. DISCUSIÓN 55 6. CONCLUSIONES 64 7. RECOMENDACIONES 65 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 66 ANEXOS 78PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico112p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.CBacteriología y Laboratorio ClínicoUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_14cbComparación de la actividad Antibiopelicula de los péptidos Ac-ll37-1 y D-ll37-1 en cepas de Staphylococcus Spp., Escherichia coli y Pseudomonas AeruginosaTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionE. Török ND. Staphylococcal and Streptococcal infections. Medicine (Baltimore) [Internet]. 2005;33(5):97-100. Disponible en: http://www.medicinejournal.co.uk/article/S1357-3039(06)00189- 7/abstractCervantes García E, García González R, Salazar Schettino PM. Características generales del Staphylococcus aureus. Rev Latinoam Patol Clin Med Lab [Internet]. 2014;61(1):28-40. Disponible en: www.medigraphic.com/patologiaclinica%5Cnwww.medigraphic.org.mxWHO. La OMS publica la lista de las bacterias para las que se necesitan urgentemente nuevos antibióticos [Internet]. 2017. Disponible en: http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2017/bacteriaantibiotics-needed/es/WHO. La OMS publica la lista de las bacterias para las que se necesitan urgentemente nuevos antibióticos [Internet]. 2017. Disponible en: http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2017/bacteriaantibiotics-needed/es/Uzcudun IL. Biofilms Bacterianos. Actual SEM. 2011;37:14:44-9.Zambrano M, Suarez L. Biofilms bacterianos : sus implicaciones en salud y enfermedad Biofilms : implications in health and disease. Univ Odontol [Internet]. 2006;19-25. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/2312/231220955004.pdfPletzer D, Coleman SR, Hancock REW. Anti-biofilm peptides as a new weapon in antimicrobial warfare. Curr Opin Microbiol [Internet]. 2016;33:35-40. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.mib.2016.05.016Téllez GA CJ. Péptidos antimicrobianos. Infectio [Internet]. 2010;14(1):55-67. Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v14n1/v14n1a07.pdfCastañeda Casimiro J, Ortega roque JA, Marcela A, Aquino-andrade A, Serafín lópez J, Estrada-parra S, et al. Péptidos antimicrobianos: péptidos con múltiples funciones. Alergia, asma e Inmunol [Internet]. 2009;18:16-29. Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/alergia/al-2009/al091d.pdfFabisiak A, Murawska N, Fichna J. LL-37: Cathelicidin-related antimicrobial peptide with pleiotropic activity. Pharmacol Reports [Internet]. 2016;68(4):802-8. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.pharep.2016.03.015Duplantier AJ, van Hoek ML. The human cathelicidin antimicrobial peptide LL-37 as a potential treatment for polymicrobial infected wounds. Front Immunol. 2013;4(JUL):1-14.Farinas I, Cowan WM, Jessell TM, Cinty DD, Dudek H, Creenberg ME, et al. Use of the Cell Wall Precursor Lipid II by a Pore-Forming Peptide Antibiotic. 1999;286(December):2361-5. Disponible en: http://www.molgenrug.nl/php/doc/publications/mg0302.pdfMontanaro L, Speziale, Pietro, Davide Campoccia1Ravaioli S, Cangini I, Pietrocola G. Scenery of Staphylococcus implant infections in orthopedics. Future Microbiol [Internet]. 2011;6(11):1329-49. Disponible en: http://www.futuremedicine.com/doi/full/10.2217/fmb.11.117Samuelsen Ø, Haukland HH, Jenssen H, Krämer M, Sandvik K, Ulvatne H, et al. Induced resistance to the antimicrobial peptide lactoferricin B in Staphylococcus aureus. FEBS Lett. 2005;579(16):3421-6Kagan BL, Selsted ME, Ganz T, Lehrer RI. Antimicrobial defensin peptides form voltage-dependent ion-permeable channels in planar lipid bilayer membranes. Proc Natl Acad Sci U S A. 1990;87(January):210– 214.Wade D, Boman A, Wåhlin B, Drain CM, Andreu D, Boman HG, et al. All- D amino acid-containing channel-forming antibiotic peptides. Proc Natl Acad Sci U S A. 1990;87(12):4761-5Van Regenmortel MH, Muller S. D-peptides as immunogens and diagnostic reagents. Curr Opin Biotechnol [Internet]. agosto de 1998 [citado 1 de mayo de 2017];9(4):377-82. Disponible en: http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0958166998800116Gómez EC, Tesis. Evaluación de péptidos sintéticos sobre bacterias, levaduras y mohos [internet]. Universidad nacional de Colombia; 2012. Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/9147/1/32295622.2012.pdf%0ADürr UHN, Sudheendra US, Ramamoorthy A. LL-37, the only human member of the cathelicidin family of antimicrobial peptides. Biochim Biophys Acta - Biomembr. 2006;1758(9):1408-25.Dean SN, Bishop BM, Van Hoek ML. Susceptibility of Pseudomonas aeruginosa biofilm to alpha-helical peptides: D-enantiomer of LL-37. Front Microbiol. 2011;2(JULY):1-11.De la Fuente Nuñez C, Reffuveille F, Haney EF, Straus SK, Hancock REW. Broad-Spectrum Anti-biofilm Peptide That Targets a Cellular Stress Response. PLoS Pathog. 2014;10(5).Li G, Xie F, Zhang Y, Bossé JT, Langford PR, Wang C. Role of (p)ppGpp in viability and biofilm formation of Actinobacillus pleuropneumoniae S8. PLoS One. 2015;10(10):1-17.Jishage M, Kvint K, Shingler V, Nyström T. Regulation of σ factor competition by the alarmone ppGpp. Genes Dev. 2002;16(10):1260-70.Zhao L, Lu W. Mirror image proteins. Curr Opin Chem Biol [Internet]. 2014;22:56-61. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.09.019Zhao G, Zhong H, Zhang M, Hong Y. Effects of antimicrobial peptides on Staphylococcus aureus growth and biofilm formation in vitro following isolation from implant-associated infections. Int J Clin Exp Med. 2015;8(1):1546-51.Hilal Yazici, Mary B. O’Neill, Turgay Kacar, Brandon R. Wilson EEO, Mehmet Sarikaya and CT. Engineered Chimeric Peptides as Antimicrobial Surface Coating Agents toward Infection-Free Implants. ACS Appl Mater Interfaces. 2016;8(8):5070-81.Zendejas G, Avalos H, Soto M. Microbiologia general de Staphylococcus aeurus: Generalidades de patogenecidad, metodos de identificacion. Rev Biomed. 2014;25(3):129-43.Orjuela L, Vélez R G V. Bacteriolgía aplicada. Manual de procedimientos. En: Cundinamarca UCM de, editor. Bacteriolgía aplicada Manual de procedimientos. Bogotá; 2014Corrales R, Avila de N ES. Bacteriología: Teoría Y Práctica. Univ Col mayor Cundinamarca. 2013;V S. Temas de Bacteriología y Virología médica. Etiopatogenia microbiológica, Género Staphylococcus. Segunda. Montevideo, Uruguay; 2006. 257-271 p.Li M, Cha DJ, Lai Y, Villaruz AE, Sturdevant DE, Otto M. The antimicrobial peptide-sensing system aps of Staphylococcus aureus. Mol Microbiol. 2007;66(5):1136-47orlak E, Korkut E, Uncu AT, Şener Y. Biofilm formation by Staphylococcus aureus isolates from a dental clinic in Konya, Turkey. J Infect Public Health. 2017;10(6):809-13.Kaiser TDL, Pereira EM, dos Santos KRN, Maciel ELN, Schuenck RP, Nunes APF. Modification of the Congo red agar method to detect biofilm production by Staphylococcus epidermidis. Diagn Microbiol Infect Dis. 2013;75(3):235-9.Von Eiff C, Peters G, Heilmann C. Pathogenesis of infections due to coagulase-negative staphylococci. Lancet Infect Dis. 2002;2(11):677-85.Naves PLF. Formación de biopelículas por Escherichia coli y su correlación con factores de virulencia : prevención y actividad de antimicrobianos frente a organismos planctónicos y asociados a biopelículas [Internet]. Universidad Complutense de Madrid; 2010. Disponible en: http://eprints.ucm.es/9780/1/T31422.pdfHufnagel DA, Depas WH, Chapman MR. The Biology of the Escherichia coli Extracellular Matrix. Microbiol Spectr [Internet]. 2015;3(3):1-14. Disponible en: http://www.asmscience.org/content/journal/microbiolspec/10.1128/micro biolspec.MB-0014- 2014%5Cnhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26185090Beloin C, Roux A, Ghigo J. Escherichia coli biofilms. Curr Top Microbiol Immunol [Internet]. 2010;322:249-89. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2864707/?report=classicOchoa SA, López-Montiel F, Escalona G, Cruz-Córdova A, Dávila LB, López-Martínez B, et al. Caracter??sticas patog??nicas de cepas de Pseudomonas aeruginosa resistentes a carbapen??micos, asociadas con la formaci??n de biopel??culas. Bol Med Hosp Infant Mex. 2013;70(2):138-50.Luján Roca DÁ. Pseudomonas aeruginosa: un adversario peligroso. Acta bioquÃ-mica clÃ-nica Latinoam. 2014;48(4):465-74.Overhage J, Campisano A, Bains M, Torfs ECW, Rehm BHA, Hancock REW. Human host defense peptide LL-37 prevents bacterial biofilm formation. Infect Immun. 2008;76(9):4176-82.Otto M. Staphylococcal biofilms. Curr Top Microbiol Immunol. 2008;322:207-28.Red Nacional de la Vigilancia de la resistencia Bacteriana y de las Infecciones Asociadas al Cuidado de la salud, (Colombia). Estado Del Arte De La Resistencia Bacteriana Y La Vigilancia Epidemiológica De Las Infecciones Asociadas Al Cuidado De La Salud En Colombia. 2010;1-31.Teresa Herrera Mendoza Bac Esp M, Revisión A DE. El papel del biofilm en el proceso infeccioso y la resistencia. Nova. 2004;2(2):71-80.Leal AL, Álvarez CA. Boletín. 2017;(2027).Hochbaum AI, Kolodkin-Gal I, Foulston L, Kolter R, Aizenberg J, Losick R. Inhibitory effects of D-amino acids on staphylococcus aureus biofilm development. J Bacteriol. 2011;193(20):5616-22.Nazar J. Biofilms bacterianos. Rev Otorrinolaringol Cir Cabeza Cuello. 2009;67:61-72.Archer NK, Mazaitis MJ, Costerton JW, Leid JG, Powers ME, Shirtliff ME. Properties , regulation and roles in human disease Staphylococcus aureus biofilms. 2011;(October):445-59.Contreras JJ, Sepúlveda M. Bases moleculares de la infección asociada a implantes ortopédicos. Rev Chil infectología órgano Of la Soc Chil Infectología [Internet]. 2014;31(3):309-22. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716- 10182014000300010&lng=es&nrm=iso&tlng=esVila J, Soriano A, Mensa J. Bases moleculares de la adherencia microbiana sobre los materiales protésicos. Papel de las biocapas en las infecciones asociadas a los materiales protésicos. Enferm Infecc Microbiol Clin [Internet]. 2008;26(1):48-55. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1157/13114395Pratt LA, Kolter R. Genetic analysis of Escherichia coli biofilm formation: Roles of flagella, motility, chemotaxis and type I pili. Mol Microbiol. 1998;30(2):285-93.Rasamiravaka T, Labtani Q, Duez P, El Jaziri M. The formation of biofilms by pseudomonas aeruginosa: A review of the natural and synthetic compounds interfering with control mechanisms. Biomed Res Int. 2015;2015.Joo H-S, Otto M. Mechanisms of resistance to antimicrobial peptides in staphylococci. Biochim Biophys Acta [Internet]. 2015;[Epub ahea(11):3055-61. Disponible en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25701233Batoni G, Maisetta G, Esin S. Antimicrobial peptides and their interaction with biofilms of medically relevant bacteria. Biochim Biophys Acta - Biomembr [Internet]. 2016;1858(5):1044-60. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.bbamem.2015.10.013Ortega-peña S, Franco-cendejas R. Importancia médica del biofilm de Staphylococcus epidermidis en las infecciones de prótesis articular. 2014;Cucarella C, Solano C, Valle J. Bap, a Staphylococcus aureus surface protein involved in biofilm formation. J … [Internet]. 2001;183(9):2888- 96. Disponible en: http://jb.asm.org/content/183/9/2888.shortNamvar AE, Bastarahang S, Abbasi N, Ghehi GS, Farhadbakhtiarian S, Arezi P, et al. Clinical characteristics of Staphylococcus epidermidis: a systematic review. GMS Hyg Infect Control [Internet]. 2014;9(3):Doc23. Disponible en: http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?artid=4184040&too l=pmcentrez&rendertype=abstractSchommer NN, Christner M, Hentschke M, Ruckdeschel K, Aepfelbacher M, Rohde H. Staphylococcus epidermidis uses distinct mechanisms of biofilm formation to interfere with phagocytosis and activation of mouse macrophage-like cells 774A.1. Infect Immun. 2011;79(6):2267-76.Kocianova S, Vuong C, Yao Y. Key role of polygamma- DL-glutamic acid in immune evasion and virulence of Staphylococcus epidermidis. J Clin Invest. 2005;115(3):688−694.Ghafoor A, Hay ID, Rehm BHA. Role of exopolysaccharides in Pseudomonas aeruginosa biofilm formation and architecture. Appl Environ Microbiol. 2011;77(15):5238-46.Paharik AE, Horswill AR, Roy J, City I. The Staphylococcal Biofilm: Adhesins, regulation, and host response. Microbiol Spectr [Internet]. 2016;4(2):1-48. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4887152/Díaz Caballero a. J, Vivas Reyes R, Puerta L, Ahumedo Monterrosa M, Arévalo Tovar L, Cabrales Salgado R, et al. Biopelículas como expresión del mecanismo de quorum sensing: Una revisión. Av en Periodoncia e Implantol Oral. 2011;23:195-201Loera A, Ramírez F, Avelar F, Guerrero A. Multi-species biofilms : association to survive. Investig Cienc [Internet]. 2012;20(54):49-56. Disponible en: http://www.uaa.mx/investigacion/revista/archivo/revista54/Articulo 7.pdfMulcahy H, Charron-Mazenod L, Lewenza S. Pseudomonas aeruginosa produces an extracellular deoxyribonuclease that is required for utilization of DNA as a nutrient source. Environ Microbiol. 2010;12(6):1621-9.Ramos AP, Desgarennes CP. Artículo de revisión Péptidos antimicrobianos: antibióticos naturales de la piel. 2007;57-67.Villarruel R, Huizar R, Corrales M, Sánchez T, Islas A. Péptidos naturales antimicrobianos: escudo esencial de la respuesta ininmune. Investig en Salud [Internet]. 2004;VI(3):170-9. Disponible en: http://www.redalyc.org/html/142/14260306/%0Ahttp://www.redalyc.org/r esumen.oa?id=14260306McDermott A. Péptidos Catiónicos Antimicrobianos . ¿ Una Futura Opción Terapéutica ? Cationic Antimicrobial Peptides — a Future Therapeutic Option ? Arch Soc Esp Oftalmol. 2007;(82):469-70.Nell MJ, Tjabringa GS, Wafelman AR, Verrijk R, Hiemstra PS, Drijfhout JW, et al. Development of novel LL-37 derived antimicrobial peptides with LPS and LTA neutralizing and antimicrobial activities for therapeutic application. Peptides. 2006;27(4):649-60.Bandurska K, Berdowska A, Barczy??ska-Felusiak R, Krupa P. Unique features of human cathelicidin LL-37. BioFactors. 2015;41(5):289-300.Xu W, Zhu X, Tan T, Li W, Shan A. Design of embedded-hybrid antimicrobial peptides with enhanced cell selectivity and anti-biofilm activity. PLoS One. 2014;9(6):1-13.Madar D, Dekel E, Bren A, Zimmer A, Porat Z, Alon U. Promoter activity dynamics in the lag phase of Escherichia coli. BMC Syst Biol. 2013;7.Microbiano C. Reproducción y crecimiento Microbiano. 2009;1-23. Disponible en: http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicr o/08_Tema_6_crecimiento.pdfGreulich P, Dolezal J, Scott M, Evans MR, Allen RJ. Predicting the dynamics of bacterial growth inhibition by ribosome-targeting antibiotics. 2017; Disponible en: http://arxiv.org/abs/1701.03702Aka ST. Killing efficacy and anti-biofilm activity of synthetic human cationic antimicrobial peptide cathelicidin hCAP-18/LL37 against urinary tract pathogens. J Microbiol Infect Dis [Internet]. 2015;5(1):15-20. Disponible en: http://dergipark.gov.tr/doi/10.5799/ahinjs.02.2015.01.0168Noore J, Noore A, Li B. Cationic antimicrobial peptide ll-37 is effective against both extraand intracellular staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother. 2013;57(3):1283-90.Ramírez Santos J, Contreras Ferrat G, Gómez Eichelmann MC. La fase estacionaria en la bacteria Escherichia coli. Rev Latinoam Microbiol. 2005;47(3-4):92-101.Arredondo B; VD. Concentración recuento celular y tasa de crecimiento. Métodos y herramientas analíticas en la evaluación la biomasa microalgal. 2007;(January 2007):17-27Mergaert P. Role of antimicrobial peptides in controlling symbiotic bacterial populations. Nat Prod Rep [Internet]. 2018;35:336-56. Disponible en: http://xlink.rsc.org/?DOI=C7NP00056AHeins A-L, Weuster-Botz D. Population heterogeneity in microbial bioprocesses: origin, analysis, mechanisms, and future perspectives. Bioprocess Biosyst Eng. 2018;0(0):0Wang L, Keatch R, Zhao Q, Wright JA, Bryant CE, Redmann AL, et al. Influence of type-I fimbriae and fluid shear stress on bacterial behavior and multicellular architecture of early Escherichia coli biofilms at singlecell resolution. Appl Environ Microbiol [Internet]. 2018;(January):AEM.02343-17. Disponible en: http://aem.asm.org/lookup/doi/10.1128/AEM.02343-17Cádiz jac. Modelo continuo de flujos metabólicos y regulación génica: aplicaciones [internet]. Vol. 1, universidad de chile facultad de ciencias físicas y matemáticas departamento de ingeniería química y biotecnología m. 2014. Disponible en: http://repositorio.uchile.cl/bitstream/handle/2250/129867/cfcanales_jc.pdf?sequence=1Yu G, Baeder D, Regoes R, Rolff J. Predicting Drug Resistance Evolution: Antimicrobial Peptides Vs. Antibiotics. bioRxiv. 2017;138107.Dean SN, Bishop BM, Hoek ML Van. Natural and synthetic cathelicidin peptides with anti-microbial and anti-biofilm activity against Staphylococcus aureus Natural and synthetic cathelicidin peptides with anti-microbial and anti-biofilm activity against Staphylococcus aureus. BMC Microbiol [Internet]. 2011;11(1):114. Disponible en: http://www.biomedcentral.com/1471-2180/11/114Sieprawska-Lupa M, Mydel P, Krawczyk K, Wójcik K, Puklo M, Lupa B, et al. Degradation of Human Antimicrobial Peptide LL-37 by Staphylococcus aureus -Derived Proteinases. Antimicrob Agents Chemother. 2004;48(12):4673-9.Vanegas M, Correa N, Morales A, Martínez A, Rúgeles L, Jiménez F. Resistencia a antibióticos de bacterias aisladas de biopelículas en una planata de alimentos. Rev MVZ Córdoba [Internet]. 2009;14(. Disponi2):1677-83ble en: http://revistas.unicordoba.edu.co/revistamvz/mvz142/v14n2a2.pdfDickinson B. MacConkey Agar. Bd [Internet]. 2014;(July):3. Disponible en: http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8770MicroorganismosSalud públicaMorbimortalidadPatógenosAureusEpidermidiscoliP. aeruginosaBiopelículaPéptidos antimicrobianosCurvas de crecimientoORIGINALDiapositivas Informe final w.pdfDiapositivas Informe final w.pdfapplication/pdf1520417https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/1/Diapositivas%20Informe%20final%20w.pdf5ca98060e9a509d17e3e4ed57a59af71MD51open accessInforme final w.pdfInforme final w.pdfapplication/pdf954844https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/2/Informe%20final%20w.pdfbd7ef0e9848b6b4d7e8661bc4435ee29MD52open accessInforme final w Cartas.pdfInforme final w Cartas.pdfapplication/pdf354923https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/3/Informe%20final%20w%20Cartas.pdf5e0016e253d792a3be08de10d03cfd7cMD53metadata only accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814828https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/4/license.txt2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7aMD54open accessTEXTDiapositivas Informe final w.pdf.txtDiapositivas Informe final w.pdf.txtExtracted texttext/plain18058https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/5/Diapositivas%20Informe%20final%20w.pdf.txt8f77f6e57c987adfd5d97e9f4547ad0cMD55open accessInforme final w.pdf.txtInforme final w.pdf.txtExtracted texttext/plain170492https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/7/Informe%20final%20w.pdf.txt2fff9a51cb228c81f423f5be3184b6eeMD57open accessInforme final w Cartas.pdf.txtInforme final w Cartas.pdf.txtExtracted texttext/plain16https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/9/Informe%20final%20w%20Cartas.pdf.txt5f6b7e10ba5dc87a0314f1f1bee5ee98MD59metadata only accessTHUMBNAILDiapositivas Informe final w.pdf.jpgDiapositivas Informe final w.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg9533https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/6/Diapositivas%20Informe%20final%20w.pdf.jpg2fc3058868dab5824291d80eca7405abMD56open accessInforme final w.pdf.jpgInforme final w.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg6316https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/8/Informe%20final%20w.pdf.jpg0cfab12f2ed3532af80638553377b970MD58open accessInforme final w Cartas.pdf.jpgInforme final w Cartas.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg6995https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/3702/10/Informe%20final%20w%20Cartas.pdf.jpgc1330876e42908be72d8f7a053d82f12MD510metadata only accessunicolmayor/3702oai:repositorio.unicolmayor.edu.co:unicolmayor/37022021-11-23 03:03:11.823An error occurred on the license name.|||https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/open accessBiblioteca Digital Unicolmayorrepositorio@unicolmayor.edu.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 |