Efecto de Nanopartículas de plata sobre biofilm de Candida spp

Las infecciones causadas por levaduras generalmente son de carácter oportunista, afectan principalmente a pacientes que requieren el uso de catéteres. Candida sp posee como factor de virulencia la formación de biofilm, lo cual le permite invadir tejidos vivos, zonas inertes como dispositivos médicos...

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Autores:
Betancourt Ramírez, Cristian Camilo
Ramírez Doronsoro, Cristel Alejandra
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2019
Institución:
Colegio Mayor de Cundinamarca
Repositorio:
Repositorio Colegio Mayor de Cundinamarca
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/269
Palabra clave:
Micosis
Micología médica
Microbiología
Candida
Biofilms
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openAccess
License
Derechos Reservados -Universidad Colegio Myor de Cundinamarca ,2019
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description Las infecciones causadas por levaduras generalmente son de carácter oportunista, afectan principalmente a pacientes que requieren el uso de catéteres. Candida sp posee como factor de virulencia la formación de biofilm, lo cual le permite invadir tejidos vivos, zonas inertes como dispositivos médicos y evadir tratamientos. (1-3) Las nanopartículas de plata (NPsAg) presentan actividad antimicrobiana, por lo cual se determinó su capacidad para inhibir la formación de biofilm de Candida sp ysu efecto sobre biofilm pre-formados. Para ello, se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) in vitro de las NPsAg pre y post formación de biofilm sobre cuadros de acrílico con cuatro levaduras, C. albicans, C. guillermondii, C. tropicalis y C. auris, seleccionadas previamente y evaluadas durante el experimento por medio de tinción de Cristal Violeta (CV1.0%), Coloración de Gram, Blanco Calcofluor (BC), reducción metabólica del Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT) como medidor de viabilidad celular y Microscopía Electrónica de Barrido (SEM). Se observó inhibición de la formación del biofilm (Pre-Formación) en diferentes concentraciones de NPsAg-47: C. albicans 0,5μg/ml, C. guillermondii 0,25μg/ml, C. tropicalis 0,25μg/ml y C. auris 1,0μg/ml; NPsAg-49: C. albicans 1,0μg/ml, C. guillermondii 0,5μg/ml, C. tropicalis 0,5 μg/ml y C. auris 0,5 μg/mlya una concentración de 0,5μg/ml de NPsA-47 en Post-biofilm para todas las especies de Candida, lo cual permite concluir que las NPsAg son capaces de inhibir la formación de biofilm y provocar la eliminación de biofilm pre-formados.
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Para ello, se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) in vitro de las NPsAg pre y post formación de biofilm sobre cuadros de acrílico con cuatro levaduras, C. albicans, C. guillermondii, C. tropicalis y C. auris, seleccionadas previamente y evaluadas durante el experimento por medio de tinción de Cristal Violeta (CV1.0%), Coloración de Gram, Blanco Calcofluor (BC), reducción metabólica del Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT) como medidor de viabilidad celular y Microscopía Electrónica de Barrido (SEM). Se observó inhibición de la formación del biofilm (Pre-Formación) en diferentes concentraciones de NPsAg-47: C. albicans 0,5μg/ml, C. guillermondii 0,25μg/ml, C. tropicalis 0,25μg/ml y C. auris 1,0μg/ml; NPsAg-49: C. albicans 1,0μg/ml, C. guillermondii 0,5μg/ml, C. tropicalis 0,5 μg/ml y C. auris 0,5 μg/mlya una concentración de 0,5μg/ml de NPsA-47 en Post-biofilm para todas las especies de Candida, lo cual permite concluir que las NPsAg son capaces de inhibir la formación de biofilm y provocar la eliminación de biofilm pre-formados.1. Resumen 13 Introducción 14 2. Objetivos 16 2.1 Objetivo general 16 2.2 Objetivos específicos 16 3. Antecedentes 17 4. Marco teórico 21 4.1 Generalidades de Candida spp 21 4.1.1 Características y morfología 21 4.1.2 Candidiasis sistémicas 23 4.1.3 Formación de biofilm 25 4.2 Nanopartículas de Plata 29 4.2.2 Síntesis verde de nanopartículas 30 4.2.3 Propiedades antifúngicas 32 5. Diseño metodológico 34 5.1 Tipo de investigación 34 5.2 Obtención de nanopartículas 34 5.3 Preparación de acrílicos 35 5.4 Selección de cepas 35 5.4.1 Selección de cepas productoras de biofilm 36 5.4.2 Protocolo de formación de biofilm de levaduras sobre acrílicos 37 5.5 Determinación de Concentración mínima inhibitoria (CMI) para NPsAg-47 y NPsAg-49 38 5.6 Evaluación del efecto de NPsAg en la síntesis de biofilm por Blanco de Calcoflúor (BC) 41 5.7 Evaluación del efecto de NPsAg en la síntesis de biofilm por Microscopia Electrónica de Barrido (SEM) 42 6. Resultados 44 6.1 Nanopartículas de plata 45 6.2 Formación de Biofilm 46 6.2.1 Cepas productoras 46 6.2.2 Protocolo de formación de biofilm de levaduras sobre acrílicos 47 6.3 Evaluación del efecto de NPsAg en la síntesis de biofilm por Blanco de Calcoflúor (BC) 53 7. Discusión 65 8. Conclusiones 70 Referencias Bibliográficas 71 Anexos 75PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista ClínicoTrabajo de grado79p.application/pdfspaUniversidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá, Distrito CapitalBacteriología y Laboratorio ClínicoNo objeto asociado1. Nett JE, Brooks EG, Cabezas-Olcoz J, Sanchez H, Zarnowski R, Marchillo K, et al. Rat indwelling urinary catheter model of Candida albicans biofilm infection. Infection and immunity. 2014;82(12):4931-40. Epub 2014/09/04.2. Selvaraj M, Pandurangan P, Ramasami N, Rajendran SB, Sangilimuthu SN, Perumal P. Highly potential antifungal activity of quantum-sized silver nanoparticles against Candida albicans. Appl Biochem Biotechnol. 2014;173(1):55-66. Epub 2014/03/22.3. Lazo V, Hernández G, Méndez R. Candidiasis sistémica en pacientes críticos, factores predictores de riesgo. Horizonte Médico. 2018;18:75-85.4. Maskarinec SA, Parlak Z, Tu Q, Levering V, Zauscher S, Lopez GP, et al. 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6.pdfapplication/pdf3376275https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/269/2/1%20PARA%20SUBIR%20Tesis%20Biofil%20Candida%20nov%206.pdfc0580bdc917fccd52b760415bcd96caaMD52open access2 PARA SUBIR Tesis Biofil Candida nov 6 (1).pdf2 PARA SUBIR Tesis Biofil Candida nov 6 (1).pdfapplication/pdf273081https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/269/3/2%20PARA%20SUBIR%20Tesis%20Biofil%20Candida%20nov%206%20%281%29.pdffbf8641c1d656c509c3771577cce9bc7MD53metadata only accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814828https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/269/4/license.txt2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7aMD54open accessTEXTprezi (1).pdf.txtprezi (1).pdf.txtExtracted texttext/plain37https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/unicolmayor/269/5/prezi%20%281%29.pdf.txt48175cc56e52e020bf178616c0977374MD55open access1 PARA SUBIR Tesis Biofil Candida nov 6.pdf.txt1 PARA SUBIR Tesis Biofil Candida nov 6.pdf.txtExtracted 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