Niveles de abertura como estrategia de enseñanza en la simulación de espectros de absorción de rayos-X (XAS). Aplicados a modelos biomoleculares.

Computational approaches to simulate spectra of multiple analytical techniques and evaluations of experimental data have gained importance in recent years in teaching at the undergraduate level. This manuscript presents a teaching strategy that trains students in the basic skills of obtaining simula...

Full description

Autores:
More Osorio, Laura Liliana
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2020
Institución:
Universidad Antonio Nariño
Repositorio:
Repositorio UAN
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.uan.edu.co:123456789/1604
Acceso en línea:
http://repositorio.uan.edu.co/handle/123456789/1604
Palabra clave:
Simulación de espectro
Absorción de rayos X
Metaloproteínas
Coordinación química
Geometría química
Spectrum simulation
X-ray absorption
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Chemical coordination
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Rights
closedAccess
License
Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International (CC BY-NC-ND 4.0)
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description Computational approaches to simulate spectra of multiple analytical techniques and evaluations of experimental data have gained importance in recent years in teaching at the undergraduate level. This manuscript presents a teaching strategy that trains students in the basic skills of obtaining simulated spectra within the framework of the ATOMS, ARTEMIS, ATHENA software. In addition, students can simulate X-ray absorption spectra (XAS) from various prosthetic groups with high biological relevance, a cornerstone of the enzyme, and a key topic in many undergraduate biochemistry courses. Additionally, students can simulate X-ray absorption spectra (XAS) from various prosthetic groups with high biological relevance, a cornerstone of the enzyme, and a key topic in many undergraduate biochemistry courses. Several examples of spectrum simulation are introduced here from available crystallographic information for various types of hemoglobin, vitamin b12, rubredoxin and carbonic anhydrase. In addition, an example of molecular refinement and an XAS application were applied to understand bacterial metabolic processes. This practice develops understanding in the areas of bioinorganic chemistry, spectroscopy, coding skills, and XAS spectrum analysis. An application-based guide for undergraduate students was obtained.
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Global proteomic profiling of native outer membrane vesicles derived from Escherichia coli. 2007;3143–53. 9. Avanzados M, María D, Montero E, Diana I, Burciaga C. QUE SE PRESENTA COMO REQUISITO PARA CIENCIA Y TECNOLOGIA AMBIENTAL " Uso de Radiación Sincrotrónica para la caracterización de especies de uranio de diversas fases ". 2010;0–39. 10. Newville M. Fundamentals of XAFS. Rev Mineral Geochemistry. 2014;78:33–74. 11. 4_EXAFS II.pdf. 12. Sayers DE, Stern EA, Lytle FW. New technique for investigating noncrystalline structures: Fourier analysis of the extended x-ray-absorption fine structure. Phys Rev Lett. 1971;27(18):1204–7. 13. Análisis de estructura fina por absorción de rayos x usando radiación de sincrotrón para LiNbO 3 : Zn. 2012;15:21–6. 14. Arcovito A, Benfatto M, Cianci M, Hasnain SS, Nienhaus K, Nienhaus GU, et al. Xray structure analysis of a metalloprotein with enhanced active-site resolution using in situ x-ray absorption near edge structure spectroscopy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104(15):6211–6. 15. Ellis TN, Kuehn MJ. Virulence and Immunomodulatory Roles of Bacterial Outer Membrane Vesicles. Microbiol Mol Biol Rev. 2010;74(1):81–94. 16. Wu Z, Benfield RE, Wang Y, Guo L, Tan M, Zhang H, et al. EXAFS study on the local atomic structures around iron in glycosylated haemoglobin. Phys Med Biol. 2001;46(3). 17. Pettersen EF, Goddard TD, Huang CC, Couch GS, Greenblatt DM, Meng EC, et al. UCSF Chimera - A visualization system for exploratory research and analysis. J Comput Chem. 2004;25(13):1605–12. 18. Steefel CI. Reactive Transport at the Crossroads. Rev Mineral Geochemistry. 2019; 19. Granja DO. El constructivismo como teoría y método de enseñanza. Sophia. 2015;(19):93–110. 20. Valverde GJ, Jiménez RL, Viza AL. La atención a la diversidad en las prácticas de laboratorio de química: los niveles de abertura. Enseñanza las ciencias Rev Investig y Exp didácticas. 2006;24(1):59–70. 21. Casas JA, Pinzón DC, Molina MF. 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VADEMÉCUM ACADÉMICO DE MEDICAMENTOS 6a EDICIÓN. 6 a EDICIÓN McGRAW HILL. 2015. 30. Wirt MD, Sagi I, Chance MR. Formation of a square-planar Co ( l ) B12 intermediate Implications for enzyme catalysis Sample preparation. Biophys J. 1992;63(2):412–7. 31. Rosenthal JA, Chen L, Baker JL, Putnam D, DeLisa MP. Pathogen-like particles: Biomimetic vaccine carriers engineered at the nanoscale. Curr Opin Biotechnol. 2014;28:51–8. 32. Merino M, Ahedo E. Simulation of plasma flows in divergent magnetic nozzles. IEEE Trans Plasma Sci. 2011;39(11 PART 1):2938–9. 33. Top S, Vessières A, Leclercq G, Quivy J, Tang J, Vaissermann J, et al. Synthesis, Biochemical Properties and Molecular Modelling Studies of Organometallic Specific Estrogen Receptor Modulators (SERMs), the Ferrocifens and Hydroxyferrocifens: Evidence for an Antiproliferative Effect of Hydroxyferrocifens on both HormoneDepen. Chem - A Eur J. 2003;9(21):5223–36. 34. Koch W, Holthausen MC. A Chemist’s Guide to Density Functional Theory. A Chemist’s Guide to Density Functional Theory. 2001. 35. Seiler P, Dunitz JD. The structure of triclinic ferrocene at 101, 123 and 148 K. Acta Crystallogr Sect B Struct Crystallogr Cryst Chem. 1979;35(9):2020–32. 36. Lengke MF, Ravel B, Fleet ME, Wanger G, Gordon RA, Southam G. Mechanisms of gold bioaccumulation by filamentous cyanobacteria from gold(III)-chloride complex. Environ Sci Technol. 2006;40(20):6304–9.
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Avanzados M, María D, Montero E, Diana I, Burciaga C. QUE SE PRESENTA COMO REQUISITO PARA CIENCIA Y TECNOLOGIA AMBIENTAL " Uso de Radiación Sincrotrónica para la caracterización de especies de uranio de diversas fases ". 2010;0–39. 10. Newville M. Fundamentals of XAFS. Rev Mineral Geochemistry. 2014;78:33–74. 11. 4_EXAFS II.pdf. 12. Sayers DE, Stern EA, Lytle FW. New technique for investigating noncrystalline structures: Fourier analysis of the extended x-ray-absorption fine structure. Phys Rev Lett. 1971;27(18):1204–7. 13. Análisis de estructura fina por absorción de rayos x usando radiación de sincrotrón para LiNbO 3 : Zn. 2012;15:21–6. 14. Arcovito A, Benfatto M, Cianci M, Hasnain SS, Nienhaus K, Nienhaus GU, et al. Xray structure analysis of a metalloprotein with enhanced active-site resolution using in situ x-ray absorption near edge structure spectroscopy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104(15):6211–6. 15. Ellis TN, Kuehn MJ. Virulence and Immunomodulatory Roles of Bacterial Outer Membrane Vesicles. Microbiol Mol Biol Rev. 2010;74(1):81–94. 16. Wu Z, Benfield RE, Wang Y, Guo L, Tan M, Zhang H, et al. EXAFS study on the local atomic structures around iron in glycosylated haemoglobin. Phys Med Biol. 2001;46(3). 17. Pettersen EF, Goddard TD, Huang CC, Couch GS, Greenblatt DM, Meng EC, et al. UCSF Chimera - A visualization system for exploratory research and analysis. J Comput Chem. 2004;25(13):1605–12. 18. Steefel CI. Reactive Transport at the Crossroads. Rev Mineral Geochemistry. 2019; 19. Granja DO. El constructivismo como teoría y método de enseñanza. Sophia. 2015;(19):93–110. 20. Valverde GJ, Jiménez RL, Viza AL. La atención a la diversidad en las prácticas de laboratorio de química: los niveles de abertura. Enseñanza las ciencias Rev Investig y Exp didácticas. 2006;24(1):59–70. 21. Casas JA, Pinzón DC, Molina MF. Determinación de cobre y zinc en muestras falseadas de latón. 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ATHENA, ARTEMIS, HEPHAESTUS: Data analysis for X-ray absorption spectroscopy using IFEFFIT. J Synchrotron Radiat. 2005;12(4):537–41. 7. Figueroa A. Espectroscopía de Absorción de Rayos-X, XAFS: Una Técnica Para Análisis Local en Sólidos. 2009;01(1):3–6. 8. Lee E, Bang JY, Park GW, Choi D, Kang JS. Global proteomic profiling of native outer membrane vesicles derived from Escherichia coli. 2007;3143–53. 9. Avanzados M, María D, Montero E, Diana I, Burciaga C. QUE SE PRESENTA COMO REQUISITO PARA CIENCIA Y TECNOLOGIA AMBIENTAL " Uso de Radiación Sincrotrónica para la caracterización de especies de uranio de diversas fases ". 2010;0–39. 10. Newville M. Fundamentals of XAFS. Rev Mineral Geochemistry. 2014;78:33–74. 11. 4_EXAFS II.pdf. 12. Sayers DE, Stern EA, Lytle FW. New technique for investigating noncrystalline structures: Fourier analysis of the extended x-ray-absorption fine structure. Phys Rev Lett. 1971;27(18):1204–7. 13. Análisis de estructura fina por absorción de rayos x usando radiación de sincrotrón para LiNbO 3 : Zn. 2012;15:21–6. 14. Arcovito A, Benfatto M, Cianci M, Hasnain SS, Nienhaus K, Nienhaus GU, et al. Xray structure analysis of a metalloprotein with enhanced active-site resolution using in situ x-ray absorption near edge structure spectroscopy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104(15):6211–6. 15. Ellis TN, Kuehn MJ. Virulence and Immunomodulatory Roles of Bacterial Outer Membrane Vesicles. Microbiol Mol Biol Rev. 2010;74(1):81–94. 16. Wu Z, Benfield RE, Wang Y, Guo L, Tan M, Zhang H, et al. EXAFS study on the local atomic structures around iron in glycosylated haemoglobin. Phys Med Biol. 2001;46(3). 17. Pettersen EF, Goddard TD, Huang CC, Couch GS, Greenblatt DM, Meng EC, et al. UCSF Chimera - A visualization system for exploratory research and analysis. J Comput Chem. 2004;25(13):1605–12. 18. Steefel CI. Reactive Transport at the Crossroads. Rev Mineral Geochemistry. 2019; 19. Granja DO. El constructivismo como teoría y método de enseñanza. Sophia. 2015;(19):93–110. 20. Valverde GJ, Jiménez RL, Viza AL. La atención a la diversidad en las prácticas de laboratorio de química: los niveles de abertura. Enseñanza las ciencias Rev Investig y Exp didácticas. 2006;24(1):59–70. 21. Casas JA, Pinzón DC, Molina MF. Determinación de cobre y zinc en muestras falseadas de latón. Niveles de abertura como propuesta de enseñanza de la técnica de titulación complexométrica. Rev Eureka sobre Enseñanza y Divulg las Ciencias. 2013;10(3):445–57. 22. Tamir P. How are the laboratories used? J Res Sci Teach. 1977;14(4):311–6. 23. Novak JD, Gowin DB, Otero J. Aprendiendo a aprender. Martínez roca Barcelona; 1988. 24. Pickering M. Lab is a puzzle, not an illustration. J Chem Educ. 1985;62(10):874. 25. Basolo F, Busch RH, Johnson RC. Química de los compuestos de coordinación. 1980;176. 26. Monroy LE, Vargas MPS. Anhidrasa carbónica, nuevas perspectivas. 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Synthesis, Biochemical Properties and Molecular Modelling Studies of Organometallic Specific Estrogen Receptor Modulators (SERMs), the Ferrocifens and Hydroxyferrocifens: Evidence for an Antiproliferative Effect of Hydroxyferrocifens on both HormoneDepen. Chem - A Eur J. 2003;9(21):5223–36. 34. Koch W, Holthausen MC. A Chemist’s Guide to Density Functional Theory. A Chemist’s Guide to Density Functional Theory. 2001. 35. Seiler P, Dunitz JD. The structure of triclinic ferrocene at 101, 123 and 148 K. Acta Crystallogr Sect B Struct Crystallogr Cryst Chem. 1979;35(9):2020–32. 36. Lengke MF, Ravel B, Fleet ME, Wanger G, Gordon RA, Southam G. Mechanisms of gold bioaccumulation by filamentous cyanobacteria from gold(III)-chloride complex. Environ Sci Technol. 2006;40(20):6304–9.Computational approaches to simulate spectra of multiple analytical techniques and evaluations of experimental data have gained importance in recent years in teaching at the undergraduate level. This manuscript presents a teaching strategy that trains students in the basic skills of obtaining simulated spectra within the framework of the ATOMS, ARTEMIS, ATHENA software. In addition, students can simulate X-ray absorption spectra (XAS) from various prosthetic groups with high biological relevance, a cornerstone of the enzyme, and a key topic in many undergraduate biochemistry courses. Additionally, students can simulate X-ray absorption spectra (XAS) from various prosthetic groups with high biological relevance, a cornerstone of the enzyme, and a key topic in many undergraduate biochemistry courses. Several examples of spectrum simulation are introduced here from available crystallographic information for various types of hemoglobin, vitamin b12, rubredoxin and carbonic anhydrase. In addition, an example of molecular refinement and an XAS application were applied to understand bacterial metabolic processes. This practice develops understanding in the areas of bioinorganic chemistry, spectroscopy, coding skills, and XAS spectrum analysis. An application-based guide for undergraduate students was obtained.Los enfoques computacionales para simular espectros de múltiples técnicas analíticas y evaluar datos experimentales han cobrado importancia en los últimos años en la enseñanza a nivel de pregrado. La dificultad de acceso al uso de los equipos y lo costoso del proceso hacen que su aplicación en programas de tipo pregrado sea restringido. Este manuscrito presenta una estrategia de enseñanza que entrena a los estudiantes en habilidades básicas de obtención de espectros simulados dentro del marco de trabajo se utilizaron los softwares ATOMS, ARTEMIS, ATHENA. Además, los estudiantes pueden simular espectros de absorción de rayos-X (XAS) de varios grupos prostéticos con gran relevancia biológica, piedra angular de la enzimática y un tema clave en muchos cursos de bioquímica en pregrado. Se introducen aquí varios ejemplos de simulación de espectros a partir de información cristalográfica disponible para varios tipos de hemoglobina, vitamina b12, rubredoxina y anhidrasa carbónica. Además se aplicó ejemplo de refinamiento molecular y un aplicativo de XAS para entender procesos metabólicos bacterianos. esta práctica desarrolla la comprensión en las áreas de química bioinorgánica, espectroscopia, habilidades de codificación y análisis de espectros XAS se obtuvo una guía base aplicativa a estudiantes de pregrado.Bioquímico(a)PregradoPresencialspaUniversidad Antonio NariñoBioquímicaFacultad de CienciasBogotá - CircunvalarSimulación de espectroAbsorción de rayos XMetaloproteínasCoordinación químicaGeometría químicaSpectrum simulationX-ray absorptionMetalloproteinsChemical coordinationChemical geometry.Niveles de abertura como estrategia de enseñanza en la simulación de espectros de absorción de rayos-X (XAS). Aplicados a modelos biomoleculares.Trabajo de grado (Pregrado y/o Especialización)http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85ORIGINAL2020LauraLilianaMoreOsorio.pdf2020LauraLilianaMoreOsorio.pdfapplication/pdf3759582https://repositorio.uan.edu.co/bitstreams/c7bedc13-61c1-40b8-ac41-ed757f47fcea/downloadb8f93ea5ea3d38114e7d7d92a8530df9MD512020AutorizaciondeAutores.pdf2020AutorizaciondeAutores.pdfapplication/pdf377684https://repositorio.uan.edu.co/bitstreams/bacff114-dd1b-4971-8e57-a611e64923a1/download75c039efdde6063f2a24b972d6605c24MD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82710https://repositorio.uan.edu.co/bitstreams/e938a700-1414-4b4c-952a-809ca36440a7/download2e388663398085f69421c9e4c5fcf235MD53123456789/1604oai:repositorio.uan.edu.co:123456789/16042024-10-09 23:37:06.862https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/Acceso a solo metadatosopen.accesshttps://repositorio.uan.edu.coRepositorio Institucional UANalertas.repositorio@uan.edu.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