Identificación del gen DNA ribosomal 16S con la técnica de reacción en cadena de polimerasa convencional como alternativa para la detección de contaminación bacteriana en un producto farmacéutico estéril
La contaminación microbiológica en productos farmacéuticos estériles es un riesgo de calidad y representa riesgos para la salud del usuario y pérdidas económicas para el laboratorio productor. Aunque existen métodos convencionales para identificar esta contaminación, como la prueba de esterilidad, p...
- Autores:
-
Gutiérrez Romero, Leonardo Freddy
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2024
- Institución:
- Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A
- Repositorio:
- Repositorio Institucional UDCA
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.udca.edu.co:11158/5645
- Palabra clave:
- Estándares de Referencia
Detección bacteriana
Gen 16S rRNA
Productos farmaceúticos esteriles
Contaminación microbiana
- Rights
- closedAccess
- License
- https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/legalcode.es
| Summary: | La contaminación microbiológica en productos farmacéuticos estériles es un riesgo de calidad y representa riesgos para la salud del usuario y pérdidas económicas para el laboratorio productor. Aunque existen métodos convencionales para identificar esta contaminación, como la prueba de esterilidad, presentan limitaciones en cuanto a especificidad, sensibilidad y tiempo de análisis. Las técnicas moleculares ofrecen una alternativa prometedora, especialmente para productos estériles, siendo la PCR una opción eficaz y precisa. La PCR se destaca como una técnica eficaz y rentable para este propósito, permitiendo optimizar las pruebas de esterilidad, reducir tiempos de liberación y monitorear los puntos críticos de control de proceso de manera oportuna. A pesar de sus ventajas, la aplicación de la PCR en el análisis de medicamentos estériles ha sido poco explorada, a pesar de su potencial impacto en la industria farmacéutica. Este proyecto de investigación busca estandarizar una técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) identificando la presencia del gen DNA ribosomal16S como alternativa para la detección rápida de contaminación bacteriana en un producto farmacéutico estéril. En consecuencia, mediante análisis bioinformático se seleccionaron los iniciadores universales adecuados para el desarrollo de la investigación, y experimentalmente se estandarizó las concentraciones de los iniciadores y reactivos, así como también las condiciones del termociclador, obteniendo así mediante electroforesis evidencia que sustenta la sensibilidad para Escherichia coli a una concentración de 1pg, en Pseudomona aeruginosa se observó bandas hasta una concentración de 25fg y finalmente Staphylococcus aureus se presentó bandas hasta la concentración de 100fg de ADN. En conclusión, la metodología estandarizada representa una aproximación de la aplicabilidad de la técnica PCR como una herramienta eficaz y eficiente aún a concentraciones muy bajas de ADN, para el control de calidad microbiológico en la industria farmacéutica |
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