Evaluación de métodos de diagnóstico serológico y molecular en caninos naturalmente expuestos a Ehrlichia canis de áreas endémicas del centro de Colombia

La bacteria E. canis es considerada el agente causal de la Ehrlichiosis Monocítica Canina, que circula entre las áreas tropicales y subtropicales del mundo. Así mismo, el diagnostico en los animales infectados depende de la variación genética y antigénica que presentan estas bacterias. El cual, puede generar resultados variables dependiendo de los antígenos o regiones genéticas amplificadas. Por consiguiente, el presente estudio evaluó distintos métodos de diagnóstico para identificar caninos infectados con E. canis. Se realizó un muestreo no probabilístico por conveniencia siguiendo criterios de inclusión y exclusión donde se seleccionaron 248 caninos de 10 zonas del centro del país. De estos caninos, se tomaron muestras de sangre de la vena cefálica con la finalidad de obtener, plasma, suero y ADN. El diagnostico serológico se realizó mediante la ELISA indirecta empleando como antígenos péptidos sintéticos derivados de la proteína TRP-36. El DNA se extrajo de las muestras de sangre y plasma para realizar las PCR en tiempo real con sondas dirigidas las regiones codificantes para los genes 16S rRNA, DSB y TRP-36. Mediante la prueba de ELISA indirecta se identificó una seropositividad de 61.3% 152/248); con la PCR en tiempo real empleando el gen 16S rRNA se identificó una positivad de 46,0 % (114/248), amplificando el gen DSB fue de 19,80% (49/248) y con el gen TRP-36 fue de 11,30% 28/248 animales sintomáticos fueron 41.54% (103/248) y asintomáticos 58.46% (145/248; de los cuales 11.30% (28/248) eran polisintomáticos y 88.70% (220/248) eran oligosintomáticos. Los signos con mayor presentación clínica (p≤ 0,05) fueron, mucosas pálidas 53 (21.37%), ganglios aumentados de tamaño 42 (16.93%), queratoconjuntivitis 36 (14.51%), depresión 31 (12.5%), secreción ocular 23 (9.27%), pérdida de peso 20 (8.06%), debilidad 17 (6.85%), petequias 16 (6.45%), arritmia cardiaca 11 (4.43%), anorexia 10 (4.03%), fiebre 10 (4.03%), equimosis 3 (1.20%), hematuria 3 (1.20%), ataxia 2 (0.80%), edema miembros posteriores 2 (0.80%), epistaxis 2 (0.80%), hipema 2 (0.80%), cianosis 1 (0.40%), disnea 1 (0.40%), hemorragia retina (0,40%) y presencia de garrapatas 125 ( 50.4% ) de 248 pacientes. En el índice Kappa, hubo una alta concordancia entre el diagnostico de PCR por las diferentes sondas (genes 16Sr RNA, DSB y TRP 36) pero baja frente a ELISA. El análisis de asociación mostró que la prueba de ELISA no presentaba correlación con animales sintomáticos y asintomáticos. El diagnostico por RT-PCR con el gen 16S rRNA sólo presentó asociación con a la presencia de garrapatas (p<0,007) y arritmia cardiaca (p<0,005), siendo que la presencia de garrapatas se identificó como factor de riesgo para este diagnóstico (O. R=1,997). No obstante, el diagnóstico molecular con el gen DSB presentó asociación con la equimosis (p<0,04), depresión (p<0,01), sintomáticos (p<0,002) y asintomáticos (p<0,002), siendo que la equimosis (O. R= 8.426), depresión (O. R=2,591) y animales sintomáticos (O. R=2,725) fueron factores de riesgo para el diagnóstico positivo mediante esta sonda. Igualmente, los animales diagnosticados mediante la amplificación del gen TRP-36 estuvieron asociados con animales sintomáticos (p<0,02) y asintomáticos (p<0,02), siendo que la presencia de síntomas (O. R=2,408) se identificó como factor de riesgo para este diagnóstico. Lo anterior sugiere que la ELISA fundamentada en péptidos derivados de gp36 puede identificar animales en la fase activa como en la fase pasiva de la EMC, mientras que la PCR con 16S puede identificar animales infectados con Anaplasmataceae en la fase de transmisión activa. Por otro lado, las PCR por DSB y TRP36 mostraron mayor posibilidad de diagnóstico de animales en la fase activa considerando los factores de riesgo identificados. Lo anterior demuestra que la ELISA fundamentada en antígenos provenientes de las regiones conservadas de gp36 pueden ser una opción viable para el diagnóstico en cualquier fase de la EMC, mientras que el diagnostico por PCR con las sondas 16S rRNA, DSB y TRP-36 está relacionado con la fase activa debido a la mayor carga bacteriana y la infecciosidad que presentan los animales en esta fase.

• Autores: Vallejo Forero, José de los Angeles
• Tipo de recurso: Trabajo de grado de pregrado
• Fecha de publicación: 2023
• Institución: Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A
• Repositorio: Repositorio Institucional UDCA
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repository.udca.edu.co:11158/5070
• Acceso en línea: https://repository.udca.edu.co/handle/11158/5070; https://repository.udca.edu.co/
• Palabra clave: Enfermedades de los perros; Ehrlichia canis; Pruebas Serológicas
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