Producción in vitro de embriones bovinos mediante sistema de cultivo simplificado
RESUMEN El alto costo de la producción in vitro de embriones (PIVE) dificulta su aplicabilidad en pequeñas producciones. Este estudio evaluó la eficiencia de un sistema de bajo costo para la PIVE bovinos mediante gasificación química. En el primer experimento, se evaluó la eficiencia de la fecundaci...
- Autores:
-
Castillo Romero, Emily Lorein
Bautista Santamaría, Ana María
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2024
- Institución:
- Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A
- Repositorio:
- Repositorio Institucional UDCA
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- OAI Identifier:
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- 630 - Agricultura y tecnologías relacionadas::636 - Producción animal
Clivaje
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RESUMEN El alto costo de la producción in vitro de embriones (PIVE) dificulta su aplicabilidad en pequeñas producciones. Este estudio evaluó la eficiencia de un sistema de bajo costo para la PIVE bovinos mediante gasificación química. En el primer experimento, se evaluó la eficiencia de la fecundación in vitro (FIV) en tubos de cultivo sobre los resultados de la PIVE, para esto, grupos de 15 complejos cúmulus-ovocitos (CCOs; n = 437) fueron madurados en gotas de 100 µL de medio para maduración in vitro(MIV) (TCM 199 con 10% de suero fetal bovino(SFB)), en incubadora a 38,5 °C y humedad alta, durante 24 h; para la FIV, las estructuras se dividieron aleatoriamente en dos grupos: Grupo CNT (n=209), realizado en placas petri con gotas de 70 µL de medio (FIV-SOF) y Grupo TUB (n=228), en tubos con 70 µL de medio FIV. Para el cultivo in vitro (CIV), las estructuras fecundadas permanecieron en medio SOF con 5% SFB, en incubadora durante 7 días. Para el segundo experimento, grupos de 15 CCOs (n= 426) fueron distribuidos aleatoriamente en tres grupos experimentales: (1) Cultivo Convencional (CC): la MIV, FIV y CIV se realizaron en incubadora; (2) Cultivo Alternativo (CA): la MIV y CIV fueron realizados en sistema cerrado compuesto por tubos conectados por una manguera de silicona, uno conteniendo medio de cultivo con estructuras y el otro 0,37 g de tableta efervescente (Alka-Seltzer®, Bayer™. México) y 3 ml de agua destilada para liberar CO2, por su parte, la FIV se realizó en un frasco humidificador sellado conteniendo una placa petri con gotas de FIV-SOF, 0.7 g de tableta efervescente (Alka-Seltzer®, Bayer™, México) y 30 ml de agua destilada; (3) cultivo mixto (CM): MIV y CIV se realizaron en sistema cerrado y la FIV se realizó en gotas en incubadora. Se evaluaron las tasas de clivaje (experimento 1) y de producción de blastocistos (experimentos 1 y 2). Los datos fueron analizados en SAS 9.4, mediante Chi-cuadrado, a nivel de significancia del 5%. Las tasas de clivaje (57,1%) y blastocistos (18,2%) fueron menores (P<0,05) en el grupo TUB comparado con el CNT (75,7% y 30,2%, respectivamente). La tasa de producción de embriones fue menor (P<0,05) en el grupo CA (4,2%), seguido de CM (18,6%) y mayores para el grupo CC (39,3%). El sistema alternativo requiere ajustes, específicamente en la FIV, para lograr una producción blastocitaria similar al sistema convencional en incubadora |
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En el primer experimento, se evaluó la eficiencia de la fecundación in vitro (FIV) en tubos de cultivo sobre los resultados de la PIVE, para esto, grupos de 15 complejos cúmulus-ovocitos (CCOs; n = 437) fueron madurados en gotas de 100 µL de medio para maduración in vitro(MIV) (TCM 199 con 10% de suero fetal bovino(SFB)), en incubadora a 38,5 °C y humedad alta, durante 24 h; para la FIV, las estructuras se dividieron aleatoriamente en dos grupos: Grupo CNT (n=209), realizado en placas petri con gotas de 70 µL de medio (FIV-SOF) y Grupo TUB (n=228), en tubos con 70 µL de medio FIV. Para el cultivo in vitro (CIV), las estructuras fecundadas permanecieron en medio SOF con 5% SFB, en incubadora durante 7 días. Para el segundo experimento, grupos de 15 CCOs (n= 426) fueron distribuidos aleatoriamente en tres grupos experimentales: (1) Cultivo Convencional (CC): la MIV, FIV y CIV se realizaron en incubadora; (2) Cultivo Alternativo (CA): la MIV y CIV fueron realizados en sistema cerrado compuesto por tubos conectados por una manguera de silicona, uno conteniendo medio de cultivo con estructuras y el otro 0,37 g de tableta efervescente (Alka-Seltzer®, Bayer™. México) y 3 ml de agua destilada para liberar CO2, por su parte, la FIV se realizó en un frasco humidificador sellado conteniendo una placa petri con gotas de FIV-SOF, 0.7 g de tableta efervescente (Alka-Seltzer®, Bayer™, México) y 30 ml de agua destilada; (3) cultivo mixto (CM): MIV y CIV se realizaron en sistema cerrado y la FIV se realizó en gotas en incubadora. Se evaluaron las tasas de clivaje (experimento 1) y de producción de blastocistos (experimentos 1 y 2). Los datos fueron analizados en SAS 9.4, mediante Chi-cuadrado, a nivel de significancia del 5%. Las tasas de clivaje (57,1%) y blastocistos (18,2%) fueron menores (P<0,05) en el grupo TUB comparado con el CNT (75,7% y 30,2%, respectivamente). La tasa de producción de embriones fue menor (P<0,05) en el grupo CA (4,2%), seguido de CM (18,6%) y mayores para el grupo CC (39,3%). El sistema alternativo requiere ajustes, específicamente en la FIV, para lograr una producción blastocitaria similar al sistema convencional en incubadoraThe high cost of in vitro embryo production (IVP) impairs its applicability in small productions. This study evaluated the efficiency of a low-cost system for PIVE of bovine embryos using chemical gasification. In the first experiment, the efficiency of in vitro fertilization (IVF) in culture tubes was evaluated on the results of PIVE, for this, groups of 15 cumulus-oocyte complexes (CCOs; n = 437) were matured in drops of 100 µL of medium for in vitro maturation (MIV) (TCM 199 with 10% fetal bovine serum(SFB)), in an incubator at 38.5 °C and high humidity, for 24 h; for IVF, the structures were randomly divided into two groups: CNT Group (n=209), performed in Petri dishes with drops of 70 µL of medium (FIV-SOF) and TUB Group (n=228), in tubes with 70 µL of IVF medium. For in vitro culture (CIV), the fertilized structures remained in SOF medium with 5% FBS, in an incubator for 7 days. For the second experiment, groups of 15 CCO (n= 426) were randomly distributed into three experimental groups: (1) Conventional Culture (CC): MIV, IVF, and CIV were performed in an incubator; (2) Alternative Culture (AC): MIV and CIV were performed in a closed system composed of tubes connected by a silicone hose, one containing culture medium with structures and the other 0.37 g of the effervescent tablet (Alka-Seltzer®, Bayer ™. México) and 3 ml of distilled water to release CO2, for its part, IVF was carried out in a sealed humidifier bottle containing a petri dish with drops of IVF-SOF, 0.7 g of the effervescent tablet (Alka-Seltzer®, Bayer™ , Mexico) and 30 ml of distilled water; (3) mixed culture (CM): MIV and CIV were performed in closed system and IVF was performed in drops in incubator. The cleavage rates (experiment 1) and blastocyst production (experiments 1 and 2) were evaluated. The data were analyzed in SAS 9.4, using Chi-square, at a significance level of 5%. The rates of cleavage (57.1%) and blastocysts (18.2%) were lower (P<0.05) in the TUB group compared to the CNT (75.7% and 30.2%, respectively). The embryo production rate was lower (P<0.05) in the CA group (4.2%), followed by CM (18.6%), and higher for the CC group (39.3%). The alternative system requires adjustments, specifically during IVF, to achieve blastocyst production similar to the conventional incubator systemIncluye bibliografíaPregradoMédico(a) VeterinarioSalud Animal38 páginas : fotografías, ilustracionesapplication/pdfspaUniversidad de Ciencias Aplicadas y AmbientalesFacultad de Ciencias AgropecuariasBogotáMedicina Veterinariahttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/legalcode.eshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2630 - Agricultura y tecnologías relacionadas::636 - Producción animalClivajePastilla efervescenteBovinosFecundación in vitroReproducción animalEmbrión animalProducción in vitro de embriones bovinos mediante sistema de cultivo simplificadoTrabajo de grado - 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