Efecto del cuerpo lúteo sobre la expresión de genes marcadores de calidad celular en ovocitos y células del cúmulus equinos sometidos a maduración in vitro

Este estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la presencia y localización del cuerpo lúteo (CL) sobre la expresión relativa de genes asociados a calidad celular en ovocitos y células del cúmulus equinas sometidas a maduración in vitro. Se colectaron pares de ovarios de animales sacrificados y...

Full description

Autores:
Velásquez Castellanos, Jezbleidy Alejandra
Vargas Laverde, Valeria
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2023
Institución:
Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A
Repositorio:
Repositorio Institucional UDCA
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.udca.edu.co:11158/5517
Acceso en línea:
https://repository.udca.edu.co/handle/11158/5517
https://repository.udca.edu.co/
Palabra clave:
Células del Cúmulo
Ovocitos
Caballos
Reproducción animal
ARN
Rights
openAccess
License
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/legalcode.es
Description
Summary:Este estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la presencia y localización del cuerpo lúteo (CL) sobre la expresión relativa de genes asociados a calidad celular en ovocitos y células del cúmulus equinas sometidas a maduración in vitro. Se colectaron pares de ovarios de animales sacrificados y fueron clasificados en tres grupos: Ovarios con CL (CL+); ovarios sin CL, pero provenientes de un animal con CL en el ovario contralateral (CL-) y; ovarios de animales sin cuerpo lúteo (NCL). Seguidamente, los complejos cúmulus-ovocitos (CCOs) fueron recuperados mediante curetaje y lavado de pared folicular con solución PBS suplementada con 1% de PVA. Grupos de 10 CCOs recuperados de cada grupo experimental fueron puestos en 100 µL de medio DMEM F-12 (20% de SFB) y madurados en incubadora a 38,5°C y 5 % de CO2, durante 36 h. Posteriormente, las células del cúmulus fueron separadas de los ovocitos mediante pipeteo repetitivo. La extracción del ARN de las muestras fue realizada con el uso de TRIzol®️ (Invitrogen-ThermoFisher). El ADN complementario (ADNc) se obtuvo utilizando el kit comercial de transcripción de alta capacidad®️ (Applied Biosystems®️) y la amplificación de los genes BMP-15, BAX, ODC1, GDF9 y AURKA se realizó mediante q-PCR y el kit comercial Master Mix SYBR GREEN®️ PCR (Applied Biosystems®️). En los ovocitos, fue observada una mayor expresión para el gen BMP-15 en el grupo CL+ en comparación con el grupo NCL (P = 0,0447). Adicionalmente, en las células del cúmulus, se observó mayor expresión de GDF9 en el grupo CL+ en relación al grupo NCL (P = 0.0177). Para el restante de genes no fueron observadas diferencias entre grupos. En conclusión, los resultados sugieren que la presencia del CL favorece la expresión de genes relacionados con mayor calidad celular en ovocitos y células del cúmulus equinas sometidas a maduración in vitro.