Evaluación de la técnica ELISA indirecta para el diagnóstico de animales infectados con Neospora caninum empleando el péptido rNcGRA1- modalidad Investigación

La neosporosis es una de las principales causas de aborto en bovinos con pérdidas económicas importantes en producciones ganaderas. Así, la implementación de estrategias de control en los rebaños se fundamenta en el serodiagnóstico, ya a que no se disponen de tratamientos ni vacunas eficaces. Las pr...

Full description

Autores:
Fonseca Fajardo, Jennifer Xiomara
Sanclemente Berrio, Claudia Marcela
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2022
Institución:
Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A
Repositorio:
Repositorio Institucional UDCA
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
https://repository.udca.edu.co/handle/11158/4714
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Palabra clave:
Neospora
Aborto Veterinario
Enfermedades Parasitarias
Ensayo de Inmunoadsorción Enzimática
Bovidae
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description La neosporosis es una de las principales causas de aborto en bovinos con pérdidas económicas importantes en producciones ganaderas. Así, la implementación de estrategias de control en los rebaños se fundamenta en el serodiagnóstico, ya a que no se disponen de tratamientos ni vacunas eficaces. Las pruebas serológicas fundamentadas en antígenos provenientes de cultivo celular pueden generar resultados variables entre laboratorios y resultados falso-negativos. Por consiguiente, para reducir estos resultados adversos, las pruebas serológicas con antígenos de subunidades pueden ser una alternativa para mejorar la precisión diagnostica. En el presente trabajo se estandarizó la ELISA indirecta para el diagnóstico serológico de N. caninum empleando el péptido recombinante rNcGRA1. Brevemente, se determinó el efecto ELISA incubando el péptido a 2 µg/pozo, con sueros sospechosos en una dilución 1:200 durante una hora. Posteriormente se confirmaron los sueros controles positivos y negativos. Los cuales sirvieron para evaluar sueros previamente diagnosticados como negativos o positivos, según la prueba IDEXX Neospora X2 Ab. En la confirmación de los controles se identificó una TFP 39% y una TVN de 84%. Con los sueros previamente positivos y negativos por IDEXX se identificó TFP de 48,64% y TFN de 72,97%. Finalmente, con las muestras VN y VP del barrido anterior, se realizó una ELISA confirmatoria, siendo que se identificó una AUC (area under curve) de 0,8667 con un intervalo de confianza (IC 95%), así mismo se determinó una sensibilidad de 83,33%, especificidad 80%, TFP de 20%, TFN de 16,6%, NPV de 78,95%, VPN de 84,21%, Rver positiva de 4,17%, Rver negativa (0,21%) y eficiencia de 81,58%. La diferencia entre los VP y VN través de la prueba exacta de Fisher identifico un p < 0,0002 con un alto nivel de significancia. Los resultados obtenidos en este estudio demuestran que la ELISA fundamentada en el péptido recombinante rNcGRA1 puede ser una alternativa prometedora para el serodiagnóstico de Neosporosis en los planteles bovinos.
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En el presente trabajo se estandarizó la ELISA indirecta para el diagnóstico serológico de N. caninum empleando el péptido recombinante rNcGRA1. Brevemente, se determinó el efecto ELISA incubando el péptido a 2 µg/pozo, con sueros sospechosos en una dilución 1:200 durante una hora. Posteriormente se confirmaron los sueros controles positivos y negativos. Los cuales sirvieron para evaluar sueros previamente diagnosticados como negativos o positivos, según la prueba IDEXX Neospora X2 Ab. En la confirmación de los controles se identificó una TFP 39% y una TVN de 84%. Con los sueros previamente positivos y negativos por IDEXX se identificó TFP de 48,64% y TFN de 72,97%. Finalmente, con las muestras VN y VP del barrido anterior, se realizó una ELISA confirmatoria, siendo que se identificó una AUC (area under curve) de 0,8667 con un intervalo de confianza (IC 95%), así mismo se determinó una sensibilidad de 83,33%, especificidad 80%, TFP de 20%, TFN de 16,6%, NPV de 78,95%, VPN de 84,21%, Rver positiva de 4,17%, Rver negativa (0,21%) y eficiencia de 81,58%. La diferencia entre los VP y VN través de la prueba exacta de Fisher identifico un p < 0,0002 con un alto nivel de significancia. Los resultados obtenidos en este estudio demuestran que la ELISA fundamentada en el péptido recombinante rNcGRA1 puede ser una alternativa prometedora para el serodiagnóstico de Neosporosis en los planteles bovinos.Neosporosis is one of the main causes of abortion in cattle, with important economic losses in livestock production. Thus, control strategies in herds are based on serodiagnosis since there are no effective treatments or vaccines available. Serological tests based on antigens from cell culture can generate variable results between laboratories and false-negative results. Therefore, to reduce these results, serological tests with subunit antigens can be an alternative to improve diagnostic accuracy. In the present work, indirect ELISA was standardized for the serological diagnosis of N. caninum using the recombinant peptide rNcGRA1. Briefly, the prozone effect was determined by incubating the peptide at 2 µg/well with suspect serums at a 1:200 dilution for one hour. Positive and negative control serums These were used to evaluate serums previously diagnosed as negative or positive, according to the IDEXX Neospora X2 Ab test. The confirmation of the controls identified a TFP of 39% and a TVN of 84%. With the previously positive and negative serum by IDEXX, TFP of 48.64% and TFN of 72.97% were identified. Finally, with the VN and VP samples from the previous sweep, a confirmatory ELISA was performed, identifying an AUC (area under curve) of 0.8667 with a confidence interval (CI 95%), as well as a sensitivity of 83.33%, specificity of 80%, TFP of 20%, TFN of 16.6%, PPV of 78.95%, NPV of 84.21%, positive Rver of 4.17%, negative Rver (0.21%) and efficiency of 81.58%. The difference between the PPV and NPV through Fisher's exact test identified a p < 0.0002 with a high level of significance. The results obtained in this study demonstrate that ELISA based on the recombinant peptide rNcGRA1 can be a promising alternative for the serodiagnosis of Neosporosis in cattle herdsIncluye bibliografíaPregradoMédico(a) VeterinarioMedicina VeterinariaSalud humana y animal.Salud Animal Grupo de Investigación: Ciencia Animal27 páginasapplication/pdfspaUniversidad de Ciencias Aplicadas y ambientalesFacultad de Ciencias AgropecuariasBogotáhttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Evaluación de la técnica ELISA indirecta para el diagnóstico de animales infectados con Neospora caninum empleando el péptido rNcGRA1- modalidad InvestigaciónTrabajo de grado - 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