Clonación del ADN complementario de iduronato 2-sulfato sulfatasa humana recombinante sin la secuencia que codifica para el péptido señal nativo, en el vector de expresión pPIC9
La Mucopolisacaridosis tipo II es una enfermedad recesiva ligada al cromosoma X causada por la deficiencia de la enzima lisosomal Iduronato-2-Sulfato Sulfatasa (IDS), llevando a la acumulación de glicosaminaoglicanos en tejidos y órganos. En el intento por desarrollar técnicas de expresión más econó...
- Autores:
-
Rivera Hoyos, Claudia Marcela
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2008
- Institución:
- Universidad del Quindío
- Repositorio:
- Repositorio Universidad del Quindío
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- Acceso en línea:
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- Síndrome de Hunter
Iduronato-2-Sulfato Sulfatasa
Subclonación
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La Mucopolisacaridosis tipo II es una enfermedad recesiva ligada al cromosoma X causada por la deficiencia de la enzima lisosomal Iduronato-2-Sulfato Sulfatasa (IDS), llevando a la acumulación de glicosaminaoglicanos en tejidos y órganos. En el intento por desarrollar técnicas de expresión más económicas para el tratamiento con Terapia de Reemplazo Enzimático (TRE) se ha expresado IDShr en modelos como la bacteria E. coli y la levadura P. pastoris. Sin embargo, en las construcciones de los vectores recombinantes aparecen dos secuencias de péptido señal al mismo tiempo (la nativa y la putativa de S. cerevisiae), y se ha pensado en la posibilidad de un conflicto en el reconocimiento erróneo de una u otra señal de secreción con consecuencias en la expresión así como en la actividad enzimática |
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Morales Álvarez, Edwin DavidLandázuri, PatriciaRivera Hoyos, Claudia Marcela2021-02-16T21:26:27Z2021-02-16T21:26:27Z2008-12-01https://bdigital.uniquindio.edu.co/handle/001/6026071884La Mucopolisacaridosis tipo II es una enfermedad recesiva ligada al cromosoma X causada por la deficiencia de la enzima lisosomal Iduronato-2-Sulfato Sulfatasa (IDS), llevando a la acumulación de glicosaminaoglicanos en tejidos y órganos. En el intento por desarrollar técnicas de expresión más económicas para el tratamiento con Terapia de Reemplazo Enzimático (TRE) se ha expresado IDShr en modelos como la bacteria E. coli y la levadura P. pastoris. Sin embargo, en las construcciones de los vectores recombinantes aparecen dos secuencias de péptido señal al mismo tiempo (la nativa y la putativa de S. cerevisiae), y se ha pensado en la posibilidad de un conflicto en el reconocimiento erróneo de una u otra señal de secreción con consecuencias en la expresión así como en la actividad enzimáticaIntroducción 1 2. Planteamiento del problema 3 3. Justificación 5 4. Objetivos 6 4.1 objetivo general 6 4.2 objetivos específicos 6 5. Marco teórico 7 5.1 errores innatos del metabolismo 7 5.2 enfermedades de depósito lisosomal 8 5.3 mucopolisacaridosis 9 5.4 iduronato 2-sulfato sulfatasa humana 12 5.5 tratamiento del síndrome de hunter 19 5.6 terapia de reemplazo enzimático para enfermedades Lisosomales 21 5.7 ppic9 como vector de expresión de proteínas Recombinantes 22 5.7.1 señal de secreción péptido -factor ( -mf) 23 6. Materiales y métodos 24 6.1 microorganismos 24 6.2 cultivo y mantenimiento de microorganismos 24 6.3 plásmidos 24 6.4 purificación de plásmidos 26 6.5 obtención del adnc de la ids sin péptido señal nativo 27 6.6 subclonación del adnc de hids 28 6.7 transformación de escherichia coli 29 6.8 construcción del plásmido de expresión ppic9-hids 30 6.9 evaluación del plásmido recombinante 31 6.10 secuenciación de hids 32PregradoBiólogoapplication/pdfspaDerechos reservados Universidad del Quindíohttps://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Clonación del ADN complementario de iduronato 2-sulfato sulfatasa humana recombinante sin la secuencia que codifica para el péptido señal nativo, en el vector de expresión pPIC9Trabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionTexthttps://purl.org/redcol/resource_type/TPhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Síndrome de HunterIduronato-2-Sulfato SulfatasaSubclonaciónNeufeld, EF. & Muenzer, J. Mucopolysaccharidoses in: The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Diseases. Scriver, C.R., Beaudet A.L., Sly W.S. & Valle D. (eds). McGraw-Hill. New York. 2001; 3421-52.Barrera, L., Sáenz, H. & Cuellar, M. (Eds). Manual de Enfermedades Metabólicas. Pontificia Universidad Javerana. 2004; pp. 235-37.Lanpher, B., Brunetti, N. &Lee, B. InbornErrors ofMetabolism: The flux fromMendelian to complex diseases. Nature Reviews/Genetics. 2006; 7:449-60.Muenzer, J., Wraith, J., Beck, M., Giugliani, R., Harmatz, P., Eng, C., Vellodi, A., Martin, R., Ramaswami, U., Gucsavas, M., Vijayaraghavan, S., Wendt, S., Puga, A., Ulbrich, B., Shinawi, M., Cleary, M., Piper, D., Conway, A. & Kimura, A. A phase II/III clinical study of enzyme replacement therapy with idursulfase in mucopolysaccharidosis II (Hunter síndrome). Genetics in Medicine. 2006; 8:465-73.Desnick, R. Enzyme replacement and enhancement Therapies for lysosomal diseases. J. Inherit. Metab. Dis. 2004; 27:385-410.Facultad de Ciencias Básicas y TecnologíasArmeniaCiencias Básicas y Tecnologías - BiologíaPublicationORIGINALTrabajo de Grado-CLAUDIA MARCELA RIVERA HOYOS.pdfTrabajo de Grado-CLAUDIA MARCELA RIVERA HOYOS.pdfapplication/pdf2271261https://bdigital.uniquindio.edu.co/bitstreams/4e17f758-259b-421e-9e6d-62ff9abedea1/download479567a36059d9547951156db69e4e7eMD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814828https://bdigital.uniquindio.edu.co/bitstreams/71a498cf-9f84-4ffb-90bb-31ba4638127b/download2f9959eaf5b71fae44bbf9ec84150c7aMD52TEXTTrabajo de Grado-CLAUDIA MARCELA RIVERA HOYOS.pdf.txtTrabajo de Grado-CLAUDIA MARCELA RIVERA HOYOS.pdf.txtExtracted texttext/plain97491https://bdigital.uniquindio.edu.co/bitstreams/f67ee7a5-a7fc-46d1-b6a5-4b4c2422ff92/downloadbcb8ebf048dd37ce090225b5b992a185MD53THUMBNAILTrabajo de Grado-CLAUDIA MARCELA RIVERA HOYOS.pdf.jpgTrabajo de Grado-CLAUDIA MARCELA RIVERA HOYOS.pdf.jpgGenerated 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