Caracterización de la actividad serina proteasa en taquizoitos de Toxoplasma gondii
Se realizó la caracterización enzimática de la actividad serina proteasa y la purificación de proteínas con esta actividad en antígeno total soluble y en antígeno secretorio excretorio de Toxoplasma gondii. Se encontró actividad serina proteasa del tipo tripsina en antígeno total soluble de Toxoplas...
- Autores:
-
Gómez Marín, Jorge Enrique
Lora, Fabiana
- Tipo de recurso:
- Investigation report
- Fecha de publicación:
- 2005
- Institución:
- Universidad del Quindío
- Repositorio:
- Repositorio Universidad del Quindío
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:bdigital.uniquindio.edu.co:001/5982
- Acceso en línea:
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- Palabra clave:
- Antígeno
Cisteína proteasas
Metaloproteasas
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Se realizó la caracterización enzimática de la actividad serina proteasa y la purificación de proteínas con esta actividad en antígeno total soluble y en antígeno secretorio excretorio de Toxoplasma gondii. Se encontró actividad serina proteasa del tipo tripsina en antígeno total soluble de Toxoplasma pero no en el antígeno secretorio excretorio. Luego de probar tres tipos de columnas de afinidad para serina proteasa solo la cromatografía con arginina permitió determinar la presencia de cuatro formas proteicas en la electroforesis nativa, siendo predominantes una de 45 KDa. En antígeno total o en fracción purificada se encuentra que una proteína de 45 KDa, de acuerdo con los resultados de la prueba de zimograma de caseína es la responsable de la mayor actividad serina proteasa del tipo tripsina en Toxoplasma gondii. |
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En antígeno total o en fracción purificada se encuentra que una proteína de 45 KDa, de acuerdo con los resultados de la prueba de zimograma de caseína es la responsable de la mayor actividad serina proteasa del tipo tripsina en Toxoplasma gondii.1. Resumen 2. Introducción 2.1. Generalidades de proteasas 2.2. Proteasas y parásitos 2.3. Toxoplasma y toxoplasmosis 2.4. Invasión del Toxoplasma gondii 2.5. Proteínas de Toxoplasma 2.5.1. Proteínas de las roptrías 2.5.2 Proteínas de micronemas 2.5.3 Proteínas de los gránulos densos 2.5.4 Proteínas mayores de superficie 2.5.5 Antígenos excretorios/secretorios (ESA) 2.6. Proteasas y Toxoplasma 3. MATERIALES Y METODOS 3.1. OBTENCIÓN DE TAQUIZOITOS VIVOS DE Toxoplasma gondii 3.2. FRACCIONAMIENTO CELULAR 3.2.1. Obtención de antigeno total soluble 3.2.2. Fraccionamiento de los productos liberados de los parasitos extracelulares (Antigeno secretorio excretorio-ESA-) 3.3. Determinación de proteínas totales 3.4. Purificación proteasica 3.4.1. Cromatografía en bacitracina 3.4.2. Cromatografia con arginina 3.4.3. Cromatografía con benzamidina 3.6. Ensayo de azocaseina 3.7. Determinación del peso molecular por electroforesis en poliacrilamida no denaturante y denaturante 4. Resultados 4.1. Obtención y ensayos de actividad proteasica en antigeno total soluble y ESA 4.2. Purificación por cromatografía de afinidadapplication/pdfspaDerechos reservados Universidad del Quindíohttps://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Caracterización de la actividad serina proteasa en taquizoitos de Toxoplasma gondiiInforme de investigaciónhttp://purl.org/coar/resource_type/c_18wsinfo:eu-repo/semantics/otherinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionTexthttps://purl.org/redcol/resource_type/INFhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85AntígenoCisteína proteasasMetaloproteasasAguilar F. 2001. Caracterización de la Actividad Proteásica en Antígeno total soluble de taquizoitos de Toxoplasma gondii cepa (RH). Tesis para salud en el trópico. Instituto de Salud del Trópico, Universidad Nacional de Colombia. Bogotá DCBerthonneau J, Rodier MH, El Moundi B, Jacquemin JL. 2000. Toxoplasma gondii: Purification and Characterization of an Inmunogenic Metallopeptidase. Exp Parasitol. 95: 158-162Bonhomme A, Maine GT, Beorchia A, Burlet H, Aubert D, et al. 1998. Quantitative Inmunolocalization of P29 Protein (GRA7), a New Antigen of Toxoplasma gondii. J Histochem Cytochem. 46:1411-21Boothroyd JC, Hehl A, Manger ID. 1998 The surface of Toxoplasma: more and less. Int J Parasitol. 28: 3-9Buitrago R, Olarte J, Gómez JE. 2002. Evaluation of two inhibitors of invasion : LY311727 –3-(3-acetamide-1-benzyl-2-ethyl-indolyl-5-oxy propane phosphonic acid- and AEBSF-4-(2-aminoethyl)-benzenesulfonyl fluoride- in acute murine toxoplasmosis. 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reservados Universidad del Quindíoopen.accesshttps://bdigital.uniquindio.edu.coBiblioteca Digital Universidad del 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