Evaluación de la Patogenicidad de Cryptococcus Neoformans Serotipo Vni en Galleria Mellonella In Vitro en el 2018.
101 p.
- Autores:
-
Avellaneda Figueroa, Luis Alfredo
Contreras Niño, Elizabeth
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Universidad de Santander
- Repositorio:
- Repositorio Universidad de Santander
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.udes.edu.co:001/4131
- Acceso en línea:
- https://repositorio.udes.edu.co/handle/001/4131
- Palabra clave:
- Cryptococcus
Cryptococcus
Capacidad Patogénica
Pathogenic Capacity
Cambios Adaptativos
Pathogenic Capacity
Galleria Mellonella
Adaptive Changes
Cepas Clínicas Y Ambientales
Galleria Mellonella, Clinical And Environmental Strains
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- openAccess
- License
- Derechos Reservados - Universidad de Santander, 2019
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Angarita Sanchez, Asbleide Karina.618e792d-9f3b-4a08-a3ae-b265db949840-1Contreras Rangel, Jael.89006b21-779d-4a0c-a16c-0e6c3f0c6b1e-1Avellaneda Figueroa, Luis Alfredo8c509542-af7a-4de4-8918-05d8ff5cae80-1Contreras Niño, Elizabeth3452ae46-0048-43b0-a491-572c41ba6f1e-12019-12-05T16:56:51Z2019-12-05T16:56:51Z2019-07-04101 p.Cryptococcosis is an opportunistic mycosis of great interest, especially because of its associated presentation in patients with HIV. Studies carried out by the Group of works of the UDES, have allowed the conformation of a bank of strains constituted by clinical and environmental samples of Cryptococcus, it is important to know that there are references on the use of the Galleria mellonella model for the study of the pathogenesis of Cryptococcus neoformans highlighting the advantages of this simple model, unlike the mammals models where their manipulation is more complicated and they are expensive. Therefore, the general objective of the project was the evaluation of the pathogenicity of Cryptococcus neoformans serotype VNI in Galleria mellonella. To this end, two control strains of Cryptococcus (H99 and JEC21) were used, which correspond to the variety grubbi and the variety neoformans, respectively, which, like the strains studied, were incubated and subsequently inoculated in the invertebrate model G. mellonella, Pathogenicity modulation was evaluated by survival curves by the Kaplan mejer statistical method, where the days of death of the larvae caused by each of the clinical and environmental isolates were observed. Additionally, the capsular size of the Cryptococcus studied was evaluated, because the capsule is the main factor of virulence. The capsule was measured in fresh preparations 15 with Chinese ink before and after infection, in the same way the adaptive changes of Cryptococcus neoformans were evaluated, submitting them to an oxidative stress with NaOH, HCl and Menadione. This work made important contributions on the pathogenicity characteristics of both clinical and environmental Cryptococcus strains of the region, thus contributing to the development of studies of Cryptococcosis.La Criptococosis es una micosis oportunista de gran interés sobre todo por su presentación asociada en pacientes con VIH. Estudios realizados por el Grupo de trabajos de la UDES, han permitido la conformación de un banco de cepas constituido por muestras Clínicas y ambientales de Cryptococcus, es importante conocer que se existen referentes sobre la utilización del modelo de Galleria mellonella para estudio de la patogénesis de Cryptococcus neoformans resaltando la ventajas de este modelo simple a diferencia de los modelos mamíferos donde su manipulación es más complicada y son de alto costo. Por lo tanto el objetivo general del proyecto fue la evaluación de la patogenicidad de Cryptococcus neoformans serotipo VNI en Gallería mellonella. Para ello se utilizaron dos cepas controles de Cryptococcus (H99 y JEC21), que corresponden a la variedad grubbi y la variedad neoformans, respectivamente las cuales al igual que las cepas ha estudio fueron incubadas y posteriormente inoculadas en el modelo invertebrado G. mellonella, la modulación de la patogenicidad fue evaluada mediante curvas de supervivencia por el método estadístico Kaplan mejer, donde se observó los días de muerte de las larvas provocada por cada uno de los aislamientos clínicos y ambientales. Adicionalmente se valoró el tamaño capsular de los Cryptococcus estudiados, debido a que la cápsula es el 13 principal factor de virulencia. La medición de la cápsula se realizó en preparaciones en fresco con tinta china pre y post infección, del mismo modo se evaluaron los cambios adaptativos de Cryptococcus neoformans sometiéndolos a un estrés oxidativo con NaOH, HCl y Menadiona. Este trabajo realizó aportes importantes sobre las características de patogenicidad de las cepas de Cryptococcus tanto Clínicos y ambientales de la región, contribuyendo así con el desarrollo de estudios de la Criptococosis.PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista ClínicoCONTENIDO Pág. INTRODUCCIÓN 26 1. PROBLEMA. 28 1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. 28 1.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA 30 1.3 OBJETIVOS 30 1.3.1 Objetivo general 30 1.3.2 Objetivos específicos 30 1.4 JUSTIFICACION 31 2. MARCO REFERENCIAL 33 2.1 ANTECENDENTES 33 2.2 MARCO TEORICO 36 2.2.1. Taxonomía 37 2.2.2 Etiología 39 2.2.3 Epidemiología 42 2.2.4 Cryptococosis 43 2.2.5 Respuesta Inmunológica 47 2.2.6 Factores de virulencia de Cryptococcus sp 48 2.2.7 Modelos in-vivo en el estudio de infecciones 51 2.2.8 Gallería mellonella modelo in-vivo para el estudio de infección por C. neoformans 52 2.2.9 Estrés oxidativo 54 2.2.10 Estrés por pH 55 2.3 MARCO CONCEPTUAL 56 2.4 MARCO LEGAL 58 2.5 MARCO CONTEXTUAL 59 20 2.5.1 Cúcuta, Norte de Santander 59 2.5.2 Universidad de Santander UDES 60 2.6 SISTEMA DE HIPOTESIS 61 2.7 MATRIZ TIPOS DE VARIABLES 62 3. MARCO METODOLÓGICO. 63 3.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN 63 3.1.1 NIVEL DE INVESTIGACIÓN 63 3.1.2 DISEÑO DE INVESTIGACIÓN 63 3.2 METODOS DE INVESTIGACION 63 3.3 POBLACIÓN Y MUESTRA 69 3.3.1 Población 69 3.3.2 Muestra 70 3.4 TÉCNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCION DE DATOS 70 3.5 TECNICAS DE PROCESAMIENTO Y ANÁLISIS DE LOS DATOS 71 4. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS. 72 4.1. RESULTADOS E INTERPRETACION 72 4.1.1. Curva de Supervivencia de Galleria mellonella 72 4.1.2. Respuesta de los aislados a estrés por pH 73 4.1.3. Respuesta de los aislados a estrés oxidativo 74 4.1.4. Tamaño total de aislados clínicos y ambientales 75 4.1.5. Tamaño capsular de aislados clínicos y ambientales 76 4.1.6. Imagen capsular de aislados clínicos y ambientales 77 4.2 DISCUSIÓN 78 5. CONCLUSIÓN Y RECOMENDACIONES 81 5.1 CONCLUSIONES 81 5.2 RECOMENDACIÓNES 82 21 BIBLIOGRAFIA 83 ANEXOS 95Ej. 1application/pdfT 17.18 A925ehttps://repositorio.udes.edu.co/handle/001/4131spaCúcuta: Universidad de Sántander, 2019Facultad Ciencias de la SaludBacteriología y Laboratorio ClínicoACOSTA, R. evaluación de la patogenicidad de Cryptococcus neoformans en Gallería mellonella bajo diferentes concentraciones de hierro [Online]. 2015, [consultado 24/10/2018]; Disponible en https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/20403/AcostaMoraCarmenRosa 2015.pdf?sequence=1AMINNEJAD, M; COGLIATI, M. & DUAN, S. et al. 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