Evaluación de técnicas de conservación para microorganismos de importancia en microbiología industrial en el Cepario de la Universidad de Santander.
98 p.
- Autores:
-
Acosta Ovallos, Angy Karolina
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Universidad de Santander
- Repositorio:
- Repositorio Universidad de Santander
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- Acceso en línea:
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- Gram positive bacteria
Gram negative bacteria
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Métodos: la población objeto de estudio estuvo constituida por 14 cepas microbianas, 8 de ellas bacterias y 6 cepas de Hongos Filamentosos sometidas a 3 métodos de conservación cada uno. Resultados: Los métodos de conservación evaluados mostraron resultados satisfactorios con alta tasa de supervivencia de 1,34 UFC/mL para bacterias Gram Negativas y 1,57 UFC/mL para bacterias Gram Positivas. Con esta condición de conservación obtuvimos 95,7% para Bacterias Gram Negativas y 98,3% para Bacterias Gram Positivas de recuperación de viabilidad a los 12 meses de conservación como resultado promedio. Cabe resaltar que este primer informe de conservación fue muy eficiente ya que los microorganismos se mantuvieron en todo el proceso. Conclusión: Se evaluaron métodos exitosos de conservación, para las cepas microbianas estudiadas, incluyendo los hongos filamentosos que lograron mantenerse con buena esporulación hasta el final. El metodo de Glicerol permitió una viabilidad del 99,2% en Glicerol al 30%, 98,5% en Leche descremada al 20% y 93,3% en Papel de filtro a los 12 meses de conservación.Microbial preservation constructs an important step to ensure the maintenance of the great biotechnological potential of the bacterial genome. The correct microbial preservation must guarantee the preservation of axenic cultures, with high percentages of viability and genetic stability. Objective: To evaluate conservation techniques for microorganisms of importance in industrial microbiology in the University of Santander stock, by evaluating the efficiency of conservation methods (30% glycerol, 20% skim milk, sterile water and waste paper). Filter) and determining the percentage of viability and purity in a period of 3.6 and 12 months in 14 strains. Methods: the population studied consisted of 14 microbial strains, 8 of them bacteria and 6 Strains of Filamentous Fungi with 3 conservation methods each. Results: Conservation methods evaluated satisfactory results with a high survival rate of 1.34 CFU / ml for Gram-negative bacteria and 1.57 CFU / ml for Gram-positive bacteria. With this conservation condition, we obtained 95.7% for Gram-negative bacteria and 98.3% for Gram-positive bacteria for recovery of viability at 12 months of conservation as an average result. It should be noted that this first conservation report was very efficient since microorganisms were maintained throughout the process. Conclusion: Successful conservation methods were evaluated for the microbial strains studied, including the filamentous fungi that were achieved with good sporulation until the final. The Glycerol method allows a viability of 99.2% in Glycerol at 30%, 98.5% in List described at 20% and 93.3% in Filter paper at 12 months of storage.PregradoMicrobiólogo IndustrialIntroducción .................................................................................................................................... 1 1. Planteamiento del problema y justificación ............................................................................. 3 2. Objetivos ................................................................................................................................... 5 1.1 Objetivo General ................................................................................................................ 5 1.2 Objetivos Específicos ........................................................................................................ 5 2. Marco teórico ............................................................................................................................ 6 2.1 Estado del Arte.................................................................7 2.2 Colecciones de Microorganismos ........................................................................................... 8 2.3 Conservación y Preservación de Microorganismos ........................................................... 9 2.3.1 Métodos de Conservación a largo plazo. ............................................................... 10 2.3.2 Métodos de conservación alternativos ................................................................... 12 2.3.3 Métodos restringidos. ............................................................................................ 13 2.3.4 Crioprotectores. ..................................................................................................... 16 2.4 Curva de Crecimiento Bacteriano .................................................................................... 17 2.5 Sistemas de Identificación BBL Crystal .......................................................................... 21 2.6 Mantenimiento y viabilidad en Hongos Filamentosos .................................................... 30 3. Metodología ............................................................................................................................ 31 3.1 Tipo de Estudio ................................................................................................................ 31 3.2 Área de Estudio ................................................................................................................ 31 3.3 Universo ........................................................................................................................... 31 3.4 Población ......................................................................................................................... 32 3.5 Material Biológico ........................................................................................................... 32 3.6 Métodos ........................................................................................................................... 33 3.6.1 Recuperación de los microorganismos .................................................................. 33 3.6.2 Cinética de Crecimiento. ....................................................................................... 34 3.6.3 Conservación de Bacterias Gram (+) y Bacterias Gram (-). Para las bacterias Gram (+) y Gram (-) se probaran 3 métodos de conservación los cuales serán descritos posteriormente. ............................................................................................................... 35 3.6.4 Conservación de Hongos. ...................................................................................... 37 3.6.5 Evaluación de los métodos de Conservación. ........................................................ 38 3.6.6 Diseño del Manual de protocolos de mantenimiento, preservación y verificación de microorganismos del cepario de la Universidad de Santander .................................. 41 4. Resultados ............................................................................................................................... 42 4.1 Bacterias Gram Negativas ............................................................................................... 42 4.1.1 Escherichia coli ..................................................................................................... 42 4.1.2 Pseudomonas aeruginosa ...................................................................................... 45 4.1.3 Citrobacter freundii ............................................................................................... 47 4.1.4 Serratia marcenscens ............................................................................................. 50 4.2 Bacterias Gram Positivas ................................................................................................. 54 4.2.1 Bacillus cereus ....................................................................................................... 54 4.2.2 Bacillus licheniforms ............................................................................................. 57 4.2.3 Bacillus thuringiensis ............................................................................................ 59 4.2.4 Listeria monocytogenes ......................................................................................... 62 4.3 Hongos Filamentosos ....................................................................................................... 66 4.3.1 Evaluación de la morfología macroscópica y microscópica. Teniendo en cuenta las descripciones morfológicas macroscópicas y microscópicas de los hongos reportados bibliográficamente, se procedió a la observación e identificación de cada cepa, determinando así la estabilidad morfológica de cada cepa. ............................................ 66 4.4 Manual de protocolos de mantenimiento, preservación y verificación de microorganismos del cepario de la Universidad de Santander. (Ver Apéndice A) ............... 70 5. Discusión ................................................................................................................................ 71 6. Conclusiones ........................................................................................................................... 75 7. Recomendaciones ................................................................................................................... 77 Referencias .................................................................................... 78Ej. 1application/pdfT 33.19 A168ehttps://repositorio.udes.edu.co/handle/001/3756spaBucaramanga : Universidad de Santander, 2019Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y AgropecuariasMicrobiología IndustrialAllievi, L., and Salardi,C. 1993. Frozen storage (-20ºC and -80ºC) of soybean Bradyrhizobium cell suspension.Microb. 16: 196-08.Ángel, D. (2006). Evaluación de técnicas de conservación para hongos filamentosos y levaduriformes en el cepario de la Pontificia Universidad Javeriana. Bogotá, Colombia.Arakawa, T., Carpenter, J.F., Kita, Y.A., Crowe, J.H. 1990. The basis for toxicity of certain cryoprotectants: A hypothesis. Criobiology. 27: 401-415.Bashan, Y. 1998. Inoculants of plant growthpromoting bacteria for use in agriculture.Biotechnol. 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