Determinación de blaTEM y blaCTX-M en enterobacteriaceae productoras de Blee en aislados clínicos de la IPS Loma de Bolívar, 2018-2019

86 p.

Autores:
Becerra Durango, César Ronaldo
Villamizar Amaya, Mario Andrés
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2019
Institución:
Universidad de Santander
Repositorio:
Repositorio Universidad de Santander
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repositorio.udes.edu.co:001/4776
Acceso en línea:
https://repositorio.udes.edu.co/handle/001/4776
Palabra clave:
Blee
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openAccess
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spelling Ríos Ramírez, Yesmit Karina1c4e1cc6-b74e-4299-8e3d-f49015a8ebdb-1Becerra Durango, César Ronaldo0ab5e681-9c6a-41ce-8cf6-a16290da8291-1Villamizar Amaya, Mario Andrés4c29df87-ad39-4e46-a568-65edcba21936-1Contreras Rangel, Jael.2020-11-10T23:00:21Z2020-11-10T23:00:21Z2019-12-1386 p.La familia Enterobacteriaceae constituye un grupo grande y heterogéneo de bacterias gramnegativas. Reciben su nombre por la localización habitual como saprofitos en el tubo digestivo, aunque se trata de gérmenes ubicuos, encontrándose de forma universal en el suelo, el agua y la vegetación, así como formando parte de la microbiota intestinal de muchos animales además del hombre.; El propósito de este estudio se basa en determinar la presencia de los genes blaTEM y blaCTX-M en Enterobacterias. Objetivo: Determinar blaTEM y blaCTX-M en Enterobacteriaceae productoras de betalactamasas de espectro extendido en aislados clínicos de la IPS Loma de Bolívar, 2018-2019. Métodos: Las técnicas empleadas fueron antibiograma por disco-difusión, extracción de ADN bacteriano, reacción en cadena de la polimerasa y electroforesis en gel de agarosa. Resultados: Se demuestra la alta prevalencia de enterobacterias productoras de BLEE en las treinta muestras recolectadas (100%), lo cual indica que existe una alta resistencia bacteriana en estos aislados clínicos. Existe una presencia de los genes blaTEM y blaCTX-M en un 3,33% y 3,33%, respectivamente. Conclusiones: Este estudio permitió demostrar que el análisis de los fenotipos de resistencia a los betalactámicos, debido a las asociaciones con betalactamasas de amplio espectro entre diferentes tipos de BLEE y otros mecanismos, es de gran complejidad y no permite inferir el tipo de BLEE implicado. La BLEE del tipo TEM fue la más prevalente en nuestra ciudad, indicando que representan el mayor porcentaje de resistencia por esta enzima.The Enterobacteriaceae family is a large, heterogeneous group of gram-negative bacteria. They are named for their usual location as saprophytes in the digestive tract, although they are ubiquitous germs, universally found in soil, water and vegetation, as well as being part of the intestinal microbiota of many animals other than humans. The purpose of this study is based on determining the presence of blaTEM and blaCTX-M genes in Enterobacteria. Objective: To determine blaTEM and blaCTX-M in Enterobacteriaceae that produce extended spectrum betalactamases in clinical isolates in the IPS Loma de Bolívar, 2018-2019. Methods: The techniques used were disc-diffusion antibiogram, bacterial DNA extraction, polymerase chain reaction and agarose gel electrophoresis. Results: the high prevalence of BLEE producing enterobacteria is demonstrated in the thirty samples collected (100%), which indicates that there is a high bacterial resistance in these clinical isolates. blaTEM, blaCTX-M are present in 3,33%, 3,33%, respectively. Conclusions: This study showed that the analysis of phenotypes of resistance to beta-lactams, due to associations with broad-spectrum beta-lactamases between different types of BLEE and other mechanisms, is very complex and does not allow inferring the type of BLEE involved. The TEM type BLEE was the most prevalent in our city, indicating that they represent the highest percentage of resistance to this enzyme.PregradoBacteriólogo(a) y Laboratorista ClínicoPág. INTRODUCCIÓN 23 1. PROBLEMA 24 1.1 PLANTEAMIENTO DE PROBLEMA 24 1.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA 25 1.3 OBJETIVOS 25 1.3.1 Objetivo General. 25 1.3.2 Objetivos Específicos. 26 1.4. JUSTIFICACIÓN 26 2. MARCO REFERENCIAL 28 2.1 ANTECEDENTES 28 2.2 MARCO TEÓRICO 31 2.2.1 Resistencia bacteriana 31 2.2.2 Mecanismos de resistencia (fenotípica y genotípica) 31 2.2.2.1 Prevención de la resistencia bacteriana 32 2.2.3 Familia Enterobacteriaceae 35 2.2.4 Género Klebsiella spp. 36 2.2.5 Género Enterobacter spp. 36 2.2.6 Género Escherichia spp. 37 2.2.7 Betalactámicos 37 2.2.8 Efectos adversos, contraindicaciones e interacciones 38 2.2.9 Ácido clavulánico 39 2.2.10 Penicilinas 40 2.2.11 Cefalosporinas 41 2.2.11.1 Cefalosporina de primera generación 41 2.2.11.2 Cefalosporinas de segunda generación 41 2.2.11.3 Cefalosporinas de tercera generación 42 2.2.11.4 Cefalosporinas de cuarta generación 42 2.2.12 Monobactámicos 43 2.2.13 Carbapenémicos 43 2.2.14 Aztreonam 44 2.3 MARCO CONCEPTUAL 45 2.4 MARCO LEGAL 46 2.5 MARCO CONTEXTUAL 51 2.6 SISTEMA DE HIPÓTESIS 51 2.7 MATRIZ OPERATIVA DE LAS VARIABLES 53 3. MARCO METODOLÓGICO 54 3.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN 54 3.1.1 Nivel de la Investigación 54 3.1.2 Diseño de la Investigación: 54 3.2 MATERIALES Y MÉTODOS 54 3.2.1 Fase I preparatoria: 54 3.2.2 Fase II descriptiva: 55 3.2.3 Fase III analítica: 55 3.2.4 Fase de cierre: 56 3.3 POBLACIÓN Y MUESTRA 56 3.3.1 Población. 56 3.3.2 Muestra. 56 3.4 TÉCNICA E INSTRUMENTOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS 57 3.5 TÉCNICA DE PROCESAMIENTO Y ANÁLISIS DE DATOS 57 4. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS 58 4.1 RESULTADOS E INTERPRETACIÓN 58 4.1.1 Determinación de BLEE en Enterobacterias mediante test de difusión en disco 58 4.12 Identificación de blaTEM y blaCTX-M mediante reacción en cadena de la polimerasa. 60 4.2 Discusión 63 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 66 5.1 CONCLUSIONES 66 5.2 RECOMENDACIONES 66 BIBLIOGRAFIA 67 ANEXOS 76   LISTA DE ANEXOS Pág. Anexo A. Procedimiento Operativo Estándar (POE) 77 Anexo B. Evidencia fotográfica 85   LISTA DE FIGURAS Pág. Figura 1: Principales mecanismos de resistencia a los antibióticos. 1. Enzimas modificadoras. 2. Bombas de salida. 3. Cierre de porinas. 4. Proteínas unidoras de penicilinas. 32 Figura 2. Efectos adversos de los inhibidores de las ß-lactamasas 39 Figura 3. Determinación BLEE en aislados clínicos 58 Figura 4. Detección del gen blaTEM en aislados clínicos 61 Figura 5. Detección del gen blaCTX-M en aislados clínicos 62   LISTA DE GRAFICOS Pág. Grafico 1. Total de muestras por género 59 Grafico 2. Total de muestras productoras de BLEE 59 Grafico 3. Porcentaje de genes en cepas analizadas 62   LISTA DE TABLAS Pág. Tabla 1. Clasificación de las betalactamasas de espectro extendido 33 Tabla 2. Clasificación de las penicilinas 41 Tabla 3. Clasificación de las cefalosporinas 43 Tabla 4. Operacionalización de las variables 53 Tabla 5. Concentración y pureza del ADN en las muestras analizadas. 60 Tabla 6. Concentraciones y absorbancias óptimas de un ADN 61Ej. 1application/pdfT 17.19 B212dhttps://repositorio.udes.edu.co/handle/001/4776spaCúcuta, Universidad de Santander, 2019Facultad Ciencias de la SaludBacteriología y Laboratorio ClínicoEnterobacterias [Internet]. 3m.com.co. 2019. https://www.3m.com.co/3M/es_CO/food-safety-la/biblioteca-de-documentos/microorganismos/enterobacterias/ (acceso 4 de noviembre de 2019).Oliver A, Cantón R. [Internet]. Seimc.org. 2014 https://www.seimc.org/contenidos/ccs/revisionestematicas/bacteriologia/Blees.pdf (acceso 4 de noviembre de 2019).Garbayo L. ¿Qué es la resistencia bacteriana y cómo afecta a nuestra salud? CEAC [Internet]. Ceac.es. 2017 https://www.ceac.es/blog/que-es-la-resistencia-bacteriana-y-como-afecta-nuestra-salud(acceso 4 de noviembre de 2019)Gen|NHGRI [Internet]. Genome.gov. 2015 https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Gen (Acceso 4 de noviembre de 2019)Amoxicilina y Ácido Clavulánico: MedlinePlus medicinas [Internet]. 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