PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia
1 recurso en línea (páginas 7-18).
- Autores:
-
Solano Luna, Luis Miguel
Chavarro Mesa, Edisson
Angel Díaz, Jorge Evelio
- Tipo de recurso:
- Article of journal
- Fecha de publicación:
- 2018
- Institución:
- Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia
- Repositorio:
- RiUPTC: Repositorio Institucional UPTC
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.uptc.edu.co:001/2291
- Acceso en línea:
- http://repositorio.uptc.edu.co/handle/001/2291
- Palabra clave:
- Frutas cítricas - Control integrado
Cítricos - Cultivo
Cítricos - Enfermedades y plagas
Closterovirus tristeza del citrus
Virosis (Plantas)
Virus de la tristeza de los cítricos
Agrosavia
Closterovirus
Cuantificación absoluta
Detección de patógenos vegetales
Enfermedades de los cítricos
PCR en tiempo real SYBR Green
- Rights
- openAccess
- License
- Copyright (c) 2018 Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia
| id |
REPOUPTC2_fc2f380b2fda4f10dbb5e0aca8e42825 |
|---|---|
| oai_identifier_str |
oai:repositorio.uptc.edu.co:001/2291 |
| network_acronym_str |
REPOUPTC2 |
| network_name_str |
RiUPTC: Repositorio Institucional UPTC |
| repository_id_str |
|
| dc.title.spa.fl_str_mv |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia |
| dc.title.alternative.eng.fl_str_mv |
Quantitative PCR for detection of Citrus tristeza virus in Colombia |
| title |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia |
| spellingShingle |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia Frutas cítricas - Control integrado Cítricos - Cultivo Cítricos - Enfermedades y plagas Closterovirus tristeza del citrus Virosis (Plantas) Virus de la tristeza de los cítricos Agrosavia Closterovirus Cuantificación absoluta Detección de patógenos vegetales Enfermedades de los cítricos PCR en tiempo real SYBR Green |
| title_short |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia |
| title_full |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia |
| title_fullStr |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia |
| title_full_unstemmed |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia |
| title_sort |
PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia |
| dc.creator.fl_str_mv |
Solano Luna, Luis Miguel Chavarro Mesa, Edisson Angel Díaz, Jorge Evelio |
| dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
Solano Luna, Luis Miguel Chavarro Mesa, Edisson Angel Díaz, Jorge Evelio |
| dc.subject.armarc.none.fl_str_mv |
Frutas cítricas - Control integrado Cítricos - Cultivo Cítricos - Enfermedades y plagas Closterovirus tristeza del citrus Virosis (Plantas) Virus de la tristeza de los cítricos |
| topic |
Frutas cítricas - Control integrado Cítricos - Cultivo Cítricos - Enfermedades y plagas Closterovirus tristeza del citrus Virosis (Plantas) Virus de la tristeza de los cítricos Agrosavia Closterovirus Cuantificación absoluta Detección de patógenos vegetales Enfermedades de los cítricos PCR en tiempo real SYBR Green |
| dc.subject.armarc.spa.fl_str_mv |
Agrosavia |
| dc.subject.proposal.spa.fl_str_mv |
Closterovirus Cuantificación absoluta Detección de patógenos vegetales Enfermedades de los cítricos PCR en tiempo real SYBR Green |
| description |
1 recurso en línea (páginas 7-18). |
| publishDate |
2018 |
| dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2018-11-14T21:30:41Z |
| dc.date.available.none.fl_str_mv |
2018-11-14T21:30:41Z |
| dc.date.issued.none.fl_str_mv |
2018-02-01 |
| dc.type.spa.fl_str_mv |
Artículo de revista |
| dc.type.coar.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_2df8fbb1 |
| dc.type.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 |
| dc.type.driver.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/article |
| dc.type.version.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| dc.type.content.spa.fl_str_mv |
Text |
| dc.type.redcol.spa.fl_str_mv |
https://purl.org/redcol/resource_type/ART |
| dc.type.coarversion.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 |
| format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 |
| status_str |
publishedVersion |
| dc.identifier.citation.spa.fl_str_mv |
Solano Luna, L. M., Chavarro Mesa, E. & Angel Díaz, J. E. (2018). PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia. Ciencia y Agricultura, 15(1), 7-18. DOI: https://doi.org/10.19053/01228420.v15.n1.2018.7789. http://repositorio.uptc.edu.co/handle/001/2291 |
| dc.identifier.issn.none.fl_str_mv |
2539-0899 |
| dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
http://repositorio.uptc.edu.co/handle/001/2291 |
| dc.identifier.doi.none.fl_str_mv |
10.19053/01228420.v15.n1.2018.7789 |
| identifier_str_mv |
Solano Luna, L. M., Chavarro Mesa, E. & Angel Díaz, J. E. (2018). PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia. Ciencia y Agricultura, 15(1), 7-18. DOI: https://doi.org/10.19053/01228420.v15.n1.2018.7789. http://repositorio.uptc.edu.co/handle/001/2291 2539-0899 10.19053/01228420.v15.n1.2018.7789 |
| url |
http://repositorio.uptc.edu.co/handle/001/2291 |
| dc.language.iso.spa.fl_str_mv |
spa |
| language |
spa |
| dc.relation.references.spa.fl_str_mv |
Caicedo A., Muñoz O., Triviño A., Gómez JE. Bases para la certificación de plántulas de cítricos libres de enfermedades en Colombia. Novedades Técnicas. 2006; 7: 9-16. Morales J., Acosta O., Tamayo P., Peñaranda J. Characterization of Citrus tristeza virus isolates from Colombia. Rev. Protección Veg. 2013; 28(1): 45-53. Ruiz-Ruiz S., Moreno P., Guerri J., Ambros S. Discrimination between mild and severe Citrus tristeza virus isolates with a rapid and highly specific Real-Time Reverse Transcription-polymerase chain reaction method using TaqMan LNA probe. Phytopathology. 2009; 99: 307-315. DOI: http://doi.org/10.1094/ PHYTO-99-3-0307 Dawson WO., Bar-Joseph M., Garnsey SM., Moreno P. Citrus tristeza virus: Making an Ally from an Enemy. Annu. Rev. Phytopathol. 2015; 53: 137-55. DOI: http://doi.org/10.1146/annurev- phyto-080614-120012 Oliveros GO., Martínez SN., Torres R., Acosta O. CPm gene diversity in field isolates of Citrus tristeza virus from Colombia. Archives of Virology. 2009; 154(12): 1933-1937. DOI: http://doi. org/10.1007/s00705-009-0530-6. Costa A., Nunes W., Zanutto C., Müller G. Stability of Citrus tristeza virus protective isolates in field conditions. Pesquisa Agropecuaria Bras. 2010; 45(7): 693-700. DOI: http://doi. org/10.1590/S0100-204X2010000700009. Ruiz-Ruiz S., Moreno P., Guerri J., Ambros S. A Real-Time RT-PCR assay for detection and absolute quantitation of Citrus tristeza virus in different plant tissues. Journal of virogical methods. 2007; 145: 96-105. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet. 2007.05.011. Harper SJ. Citrus tristeza virus: evolution of complex and varied genotypic groups. Front. Microbiol. 2013; 4: 93. DOI: http://doi. org/10.3389/fmicb.2013.00093. Febres VJ., Ashoulin L., Mawassi M., Frank A., Bar-Joseph M., Manjunath KL., Lee RF., Niblett CL. The p27 protein is present at one end of Citrus tristeza virus particles. Phytopathology. 1996; 86: 1331-1335. Saponari M., Manjunath K., Yokomi R. Quantitative detection of Citrus tristeza virus in citrus and aphids by Real-Time reverse transcription-PCR (TaqMan). Journal of Virogical Methods. 2008; 147: 43-53. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.026. Bertolini E., Moreno A., Capote N., Olmos A., Vidal E., Pérez J., Cambra M. Quantitative detection of Citrus tristeza virus in plant tissues and single aphid by Real-Time RT-PCR. Plant Pathology. 2008; 120: 177-188. DOI: http://doi.org/10.1007/s10658-007- 9206-9. Gómez G. Estado actual de la citricultura en cifras, pp. 12-20. En: Gómez B. G, Caicedo A. A, Gil V. L, (eds.). Tecnología para el cultivo de cítricos en la región Caribe colombiana, Produmedios, Colombia, 2008. Rodríguez P., Romero de Pérez G., Guzmán M. Detección del virus de la tristeza de los cítricos por serología, microscopía e hibridación in situ. Revista Colombiana de Biotecnología. 2009; XI(1): 94-106. Satyanarayana T., Bar-Joseph M., Mawassi M., Albiach-Martí MR., Ayllón MA., Gowda S., Hilf ME., Moreno P., Garnsey SM., Dawson WO. Amplification of Citrus tristeza virus from a cDNA clone and infection of citrus trees. Virology. 2001; 280: 87-96. DOI: http://doi.org/10.1006/viro.2000.0759. Ananthakrishnan G., Venkataprasanna T., Roy A., Brlansky R. Characterization of the mixture of genotypes of a Citrus tristeza virus isolate by reverse transcription-quantitative real-time PCR. Journal of Virological Methods. 2010; 64(1-2): 75-82. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet.2009.12.001 Folimonova SY., Robertson CJ., Shilts T., Folimonov AS., Hilf ME. Infection with strains of Citrus tristeza virus does not exclude superinfection by other strains of the virus. J. Virol. 2010; 84: 1314-25. DOI: http://doi.org/10.1128/JVI.02075-09. Heid CA., Stevens J., Livak KJ., Williams PM. Real time quantitative PCR. Genome Res. 1996; 6: 986-994. DOI: http://doi. org/10.1101/gr.6.10.986. Freeman WM., Walker SJ., Vrana KE. Quantitative RT-PCR: pitfalls and potential. Biotechniques. 1999; 26: 112-125. Bustin SA. Quantification or mRNA using real-time reverse transcription PCR (RT-PCR): trends and problems. J. Mol. Endocrinol. 2002; 29: 23-29. DOI: http://doi.org/10.1677/jme.0.0290023. Mackay IM., Arden KE., Nitsche A. Real time PCR in virology. Nucleic Acids Res. 2002; 30: 1292-1305. DOI: http://doi. org/10.1093/nar/30.6.1292. Whelan JA., Rusell NB., Whelan MA. A method for the absolute quantification of cDNA using real-time PCR. Journal of Immunological Methods. 2003; 278: 261-269. DOI: http://doi. org/10.1016/S0022-1759(03)00223-0. Tan BH., Lim EA., Liaw JC., Seah SG., Yap EP. Diagnostic value of real-time capillary thermal cycler in virus detection. Expert Rev. Mol. Diagn. 2004; 4: 219-230. DOI: http://doi. org/10.1586/14737159.4.2.219. Roy A., Ananthakrishnan G., Hartung JS., Brlansky RH. Development Citrus tristeza virus and application of a multiplex reverse transcription polymerase chain reaction assay for screening a global collection of Citrus tristeza virus isolates. Phytopathology. 2010; 100: 1077-1088. DOI: http://doi.org/10.1094/ PHYTO-04-10-0102. Mirmajlessi S., Loit E. General principles of real-time PCR: a technology for quantitative detection of phytopathogens. Journal of medical and bioengineering. 2016; 5(1), February. Rutledge RG., Coté C. Mathematics of quantitative kinetic PCR and the application of standard curves. Nucleic Acids Research. 2003; 31: 93. DOI: http://doi.org/10.1093/nar/gng093. Casal J., Mateu E. Tipos de muestreo. Rev. Epidem. Med. Prev. 2003; 1: 3-7. Lee C., Kim J., Shin SG., Hwang S. Absolute and relative qPCR quantification of plasmid copy number in Escherichia coli. Journal of Biotechnology. 2006; 123: 273-280. DOI: http://doi.org/ 10.1016/j.jbiotec.2005.11.014. Cambra M., Gorris MT., Olmos A., Martínez MC., Roman MP., Bertolini E., López A., Carbonell EA. European diagnostic protocols (DIAG-PRO) for Citrus Tristeza Virus in adult trees. In: Duran- villa N, Milne R. G., Da Graca J. V., (Eds.). En: Procedings of the 15th conference of the International Organization of citrus virologists. IOCV, Riverside, CA, 2002 Narváez G., Skander BS., Ayllon MA., Rubio L., Guerri J., Moreno P. A new procedure to differentiate Citrus tristeza virus isolates by hybridisation with digoxigenin-labelled cDNA probes. J. Virol. Methods. 2000; 85: 83-92. DOI: http://doi.org/10.1016/ S0166-0934(99)00158-5. Nolasco G., de Blas C., Torres V., Ponz F. A method combining immunocapture and PCR amplification in a microtiter plate for the detection of plant viruses and subviral pathogens. J. Virol. Methods. 1993; 45: 201-218. DOI: http://doi.org/ 10.1016/0166-0934(93)90104-Y. Olmos A., Cambra M., Esteban O., Gorris MT., Terrada E. New device and method for capture, reverse transcription and nested PCR in a single closed-tube. Nucleic Acids Res. 1999; 27: 1564- 1565. DOI: http://doi.org/10.1093/nar/27.6.1564 Permar TA., Garnsey SM., Gumpf DJ., Lee RF. A monoclonal antibody which discriminates strains of Citrus tristeza virus. Phytopathology. 1990; 80: 224-228. DOI: http://doi.org/10.1094/ Phyto-80-224 Roistacher CN. Graft-transmissible diseases of citrus. En: Handbook for Detection and Diagnosis. FAO, Rome, Italy, 1991 Vela C., Cambra M., Cortés E., Moreno P., Miguet JG., Pérez de San Román C., Sanz A. Production and characterization of monoclonal antibodies specific for Citrus tristeza virus and their use for diagnosis. J. Gen. Virol. 1986; 67: 91-96. DOI: http://doi. org/10.1099/0022-1317-67-1-91. Papin JF., Vahrson W., Dittmer DP. SYBR green-based real-time quantitative PCR assay for detection of West Nile virus circumvents false-negative results due to strain variability. J. Clin. Microbiol. 2004; 42: 1511-1518. DOI: http://doi.org/10.1128/ JCM.42.4.1511-1518.2004. Mendoza A., Salazar A., Alvarado O., Cruz MA., Barrera HA. Caracterización molecular de razas severas y débiles del virus de la tristeza de los cítricos. Ciencias UANL. 2005; 8: 250-258. Loconsole G., Saponari M., Savino V. Development of Real-Time PCR based assays for simultaneous and improved detection of citrus virus. Plant Pathology. 2010; 128: 251-259. DOI: http:// doi.org/10.1007/s10658-010-9653-6. Sambrook J, Fritschi EF., Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, 1989. |
| dc.relation.ispartofjournal.spa.fl_str_mv |
Revista Ciencia y Agricultura;Volumen 15, número 1 (Enero-Junio 2018) |
| dc.rights.spa.fl_str_mv |
Copyright (c) 2018 Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia |
| dc.rights.uri.spa.fl_str_mv |
https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/ |
| dc.rights.accessrights.spa.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
| dc.rights.creativecommons.spa.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0) |
| dc.rights.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
| rights_invalid_str_mv |
Copyright (c) 2018 Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/ Atribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0) http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
| eu_rights_str_mv |
openAccess |
| dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv |
application/pdf |
| dc.publisher.spa.fl_str_mv |
Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia |
| dc.source.spa.fl_str_mv |
https://revistas.uptc.edu.co/index.php/ciencia_agricultura/article/view/7789/6234 |
| institution |
Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia |
| bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/868c5c05-5c9a-41ed-8225-441f4f99bcbb/download https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/2a74ff17-f6e6-46e3-a888-3c2f72ae2d5c/download https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/1aaac83b-f70c-4c3f-9ed9-eca21091b83a/download https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/34632cd6-5624-4e13-ae29-5da3575c12d1/download https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/9bfc7f84-06f0-42cf-a026-c8183624d163/download https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/9a259571-b3b2-469b-b223-d217ebfb899e/download |
| bitstream.checksum.fl_str_mv |
e6f8ba848830ed48e880917a996e7469 88794144ff048353b359a3174871b0d5 a62c8f41cafb15e69ce2a885aed23736 a62c8f41cafb15e69ce2a885aed23736 69bf13b87c770c3ba64eb5ef9e998deb 69bf13b87c770c3ba64eb5ef9e998deb |
| bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 |
| repository.name.fl_str_mv |
UPTC DSpace |
| repository.mail.fl_str_mv |
repositorio.uptc@uptc.edu.co |
| _version_ |
1814076221112188928 |
| spelling |
Solano Luna, Luis MiguelChavarro Mesa, EdissonAngel Díaz, Jorge Evelio2018-11-14T21:30:41Z2018-11-14T21:30:41Z2018-02-01Solano Luna, L. M., Chavarro Mesa, E. & Angel Díaz, J. E. (2018). PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia. Ciencia y Agricultura, 15(1), 7-18. DOI: https://doi.org/10.19053/01228420.v15.n1.2018.7789. http://repositorio.uptc.edu.co/handle/001/22912539-0899http://repositorio.uptc.edu.co/handle/001/229110.19053/01228420.v15.n1.2018.77891 recurso en línea (páginas 7-18).Se aplicó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qRT-PCR), usando SYBR Green para la detección específica del virus de la tristeza de los cítricos (CTV) en Colombia. Una pareja de iniciadores, diseñados a partir de secuencias conservadas en los marcos abiertos de lectura (ORF’s) 1b y 2, permitió amplificar el ARN genómico (ARNg), y un producto de 186 pb fue obtenido sin la presencia de dímeros o inespecificidad. El análisis de la curva de fusión mostró un pico entre 81 oC y 83 oC, con un coeficiente de correlación de 0,998 y una eficiencia de 99,1 %. La curva estándar se desarrolló a partir de una amplificación del producto de 186 pb y permitió realizar un análisis cuantitativo de las muestras, con un rango de detección de 1x108 hasta 1x103 copias de RNAg y con valores de coeficiente de variación bajos. La acumulación de CTV fue más alta en tejido foliar y en frutos que en corteza; entretanto, las diferencias demostradas entre varias especies de cítricos susceptibles a la infección fueron mínimas. Los resultados de este trabajo muestran que la mayor concentración de virus se encontró en el tercio superior de las plantas analizadas, seguida por el tercio bajo y, por último, el tercio medio. La qRT-PCR es un método específico y sensible de interés práctico en los procesos de detección de las enfermedades virales presentes en el cultivo de los cítricos y otros cultivos de interés comercial.Bibliografía: páginas 17-18.application/pdfspaUniversidad Pedagógica y Tecnológica de ColombiaCopyright (c) 2018 Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombiahttps://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2https://revistas.uptc.edu.co/index.php/ciencia_agricultura/article/view/7789/6234PCR cuantitativa para la detección del virus de la tristeza de los cítricos en ColombiaQuantitative PCR for detection of Citrus tristeza virus in ColombiaArtículo de revistahttp://purl.org/coar/resource_type/c_6501http://purl.org/coar/resource_type/c_2df8fbb1info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionTexthttps://purl.org/redcol/resource_type/ARThttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Caicedo A., Muñoz O., Triviño A., Gómez JE. Bases para la certificación de plántulas de cítricos libres de enfermedades en Colombia. Novedades Técnicas. 2006; 7: 9-16.Morales J., Acosta O., Tamayo P., Peñaranda J. Characterization of Citrus tristeza virus isolates from Colombia. Rev. Protección Veg. 2013; 28(1): 45-53.Ruiz-Ruiz S., Moreno P., Guerri J., Ambros S. Discrimination between mild and severe Citrus tristeza virus isolates with a rapid and highly specific Real-Time Reverse Transcription-polymerase chain reaction method using TaqMan LNA probe. Phytopathology. 2009; 99: 307-315. DOI: http://doi.org/10.1094/ PHYTO-99-3-0307Dawson WO., Bar-Joseph M., Garnsey SM., Moreno P. Citrus tristeza virus: Making an Ally from an Enemy. Annu. Rev. Phytopathol. 2015; 53: 137-55. DOI: http://doi.org/10.1146/annurev- phyto-080614-120012Oliveros GO., Martínez SN., Torres R., Acosta O. CPm gene diversity in field isolates of Citrus tristeza virus from Colombia. Archives of Virology. 2009; 154(12): 1933-1937. DOI: http://doi. org/10.1007/s00705-009-0530-6.Costa A., Nunes W., Zanutto C., Müller G. Stability of Citrus tristeza virus protective isolates in field conditions. Pesquisa Agropecuaria Bras. 2010; 45(7): 693-700. DOI: http://doi. org/10.1590/S0100-204X2010000700009.Ruiz-Ruiz S., Moreno P., Guerri J., Ambros S. A Real-Time RT-PCR assay for detection and absolute quantitation of Citrus tristeza virus in different plant tissues. Journal of virogical methods. 2007; 145: 96-105. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet. 2007.05.011.Harper SJ. Citrus tristeza virus: evolution of complex and varied genotypic groups. Front. Microbiol. 2013; 4: 93. DOI: http://doi. org/10.3389/fmicb.2013.00093.Febres VJ., Ashoulin L., Mawassi M., Frank A., Bar-Joseph M., Manjunath KL., Lee RF., Niblett CL. The p27 protein is present at one end of Citrus tristeza virus particles. Phytopathology. 1996; 86: 1331-1335.Saponari M., Manjunath K., Yokomi R. Quantitative detection of Citrus tristeza virus in citrus and aphids by Real-Time reverse transcription-PCR (TaqMan). Journal of Virogical Methods. 2008; 147: 43-53. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.026.Bertolini E., Moreno A., Capote N., Olmos A., Vidal E., Pérez J., Cambra M. Quantitative detection of Citrus tristeza virus in plant tissues and single aphid by Real-Time RT-PCR. Plant Pathology. 2008; 120: 177-188. DOI: http://doi.org/10.1007/s10658-007- 9206-9.Gómez G. Estado actual de la citricultura en cifras, pp. 12-20. En: Gómez B. G, Caicedo A. A, Gil V. L, (eds.). Tecnología para el cultivo de cítricos en la región Caribe colombiana, Produmedios, Colombia, 2008.Rodríguez P., Romero de Pérez G., Guzmán M. Detección del virus de la tristeza de los cítricos por serología, microscopía e hibridación in situ. Revista Colombiana de Biotecnología. 2009; XI(1): 94-106.Satyanarayana T., Bar-Joseph M., Mawassi M., Albiach-Martí MR., Ayllón MA., Gowda S., Hilf ME., Moreno P., Garnsey SM., Dawson WO. Amplification of Citrus tristeza virus from a cDNA clone and infection of citrus trees. Virology. 2001; 280: 87-96. DOI: http://doi.org/10.1006/viro.2000.0759.Ananthakrishnan G., Venkataprasanna T., Roy A., Brlansky R. Characterization of the mixture of genotypes of a Citrus tristeza virus isolate by reverse transcription-quantitative real-time PCR. Journal of Virological Methods. 2010; 64(1-2): 75-82. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet.2009.12.001Folimonova SY., Robertson CJ., Shilts T., Folimonov AS., Hilf ME. Infection with strains of Citrus tristeza virus does not exclude superinfection by other strains of the virus. J. Virol. 2010; 84: 1314-25. DOI: http://doi.org/10.1128/JVI.02075-09.Heid CA., Stevens J., Livak KJ., Williams PM. Real time quantitative PCR. Genome Res. 1996; 6: 986-994. DOI: http://doi. org/10.1101/gr.6.10.986.Freeman WM., Walker SJ., Vrana KE. Quantitative RT-PCR: pitfalls and potential. Biotechniques. 1999; 26: 112-125.Bustin SA. Quantification or mRNA using real-time reverse transcription PCR (RT-PCR): trends and problems. J. Mol. Endocrinol. 2002; 29: 23-29. DOI: http://doi.org/10.1677/jme.0.0290023.Mackay IM., Arden KE., Nitsche A. Real time PCR in virology. Nucleic Acids Res. 2002; 30: 1292-1305. DOI: http://doi. org/10.1093/nar/30.6.1292.Whelan JA., Rusell NB., Whelan MA. A method for the absolute quantification of cDNA using real-time PCR. Journal of Immunological Methods. 2003; 278: 261-269. DOI: http://doi. org/10.1016/S0022-1759(03)00223-0.Tan BH., Lim EA., Liaw JC., Seah SG., Yap EP. Diagnostic value of real-time capillary thermal cycler in virus detection. Expert Rev. Mol. Diagn. 2004; 4: 219-230. DOI: http://doi. org/10.1586/14737159.4.2.219.Roy A., Ananthakrishnan G., Hartung JS., Brlansky RH. Development Citrus tristeza virus and application of a multiplex reverse transcription polymerase chain reaction assay for screening a global collection of Citrus tristeza virus isolates. Phytopathology. 2010; 100: 1077-1088. DOI: http://doi.org/10.1094/ PHYTO-04-10-0102.Mirmajlessi S., Loit E. General principles of real-time PCR: a technology for quantitative detection of phytopathogens. Journal of medical and bioengineering. 2016; 5(1), February.Rutledge RG., Coté C. Mathematics of quantitative kinetic PCR and the application of standard curves. Nucleic Acids Research. 2003; 31: 93. DOI: http://doi.org/10.1093/nar/gng093.Casal J., Mateu E. Tipos de muestreo. Rev. Epidem. Med. Prev. 2003; 1: 3-7.Lee C., Kim J., Shin SG., Hwang S. Absolute and relative qPCR quantification of plasmid copy number in Escherichia coli. Journal of Biotechnology. 2006; 123: 273-280. DOI: http://doi.org/ 10.1016/j.jbiotec.2005.11.014.Cambra M., Gorris MT., Olmos A., Martínez MC., Roman MP., Bertolini E., López A., Carbonell EA. European diagnostic protocols (DIAG-PRO) for Citrus Tristeza Virus in adult trees. In: Duran- villa N, Milne R. G., Da Graca J. V., (Eds.). En: Procedings of the 15th conference of the International Organization of citrus virologists. IOCV, Riverside, CA, 2002Narváez G., Skander BS., Ayllon MA., Rubio L., Guerri J., Moreno P. A new procedure to differentiate Citrus tristeza virus isolates by hybridisation with digoxigenin-labelled cDNA probes. J. Virol. Methods. 2000; 85: 83-92. DOI: http://doi.org/10.1016/ S0166-0934(99)00158-5.Nolasco G., de Blas C., Torres V., Ponz F. A method combining immunocapture and PCR amplification in a microtiter plate for the detection of plant viruses and subviral pathogens. J. Virol. Methods. 1993; 45: 201-218. DOI: http://doi.org/ 10.1016/0166-0934(93)90104-Y.Olmos A., Cambra M., Esteban O., Gorris MT., Terrada E. New device and method for capture, reverse transcription and nested PCR in a single closed-tube. Nucleic Acids Res. 1999; 27: 1564- 1565. DOI: http://doi.org/10.1093/nar/27.6.1564Permar TA., Garnsey SM., Gumpf DJ., Lee RF. A monoclonal antibody which discriminates strains of Citrus tristeza virus. Phytopathology. 1990; 80: 224-228. DOI: http://doi.org/10.1094/ Phyto-80-224Roistacher CN. Graft-transmissible diseases of citrus. En: Handbook for Detection and Diagnosis. FAO, Rome, Italy, 1991Vela C., Cambra M., Cortés E., Moreno P., Miguet JG., Pérez de San Román C., Sanz A. Production and characterization of monoclonal antibodies specific for Citrus tristeza virus and their use for diagnosis. J. Gen. Virol. 1986; 67: 91-96. DOI: http://doi. org/10.1099/0022-1317-67-1-91.Papin JF., Vahrson W., Dittmer DP. SYBR green-based real-time quantitative PCR assay for detection of West Nile virus circumvents false-negative results due to strain variability. J. Clin. Microbiol. 2004; 42: 1511-1518. DOI: http://doi.org/10.1128/ JCM.42.4.1511-1518.2004.Mendoza A., Salazar A., Alvarado O., Cruz MA., Barrera HA. Caracterización molecular de razas severas y débiles del virus de la tristeza de los cítricos. Ciencias UANL. 2005; 8: 250-258.Loconsole G., Saponari M., Savino V. Development of Real-Time PCR based assays for simultaneous and improved detection of citrus virus. Plant Pathology. 2010; 128: 251-259. DOI: http:// doi.org/10.1007/s10658-010-9653-6.Sambrook J, Fritschi EF., Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, 1989.Revista Ciencia y Agricultura;Volumen 15, número 1 (Enero-Junio 2018)Frutas cítricas - Control integradoCítricos - CultivoCítricos - Enfermedades y plagasClosterovirus tristeza del citrusVirosis (Plantas)Virus de la tristeza de los cítricosAgrosaviaClosterovirusCuantificación absolutaDetección de patógenos vegetalesEnfermedades de los cítricosPCR en tiempo real SYBR GreenORIGINALPPS_805_PCR_cuantitativa_deteccion_virus.pdfPPS_805_PCR_cuantitativa_deteccion_virus.pdfArchivo principalapplication/pdf511228https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/868c5c05-5c9a-41ed-8225-441f4f99bcbb/downloade6f8ba848830ed48e880917a996e7469MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814798https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/2a74ff17-f6e6-46e3-a888-3c2f72ae2d5c/download88794144ff048353b359a3174871b0d5MD52TEXTPPS-805.pdf.txtPPS-805.pdf.txtExtracted texttext/plain41307https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/1aaac83b-f70c-4c3f-9ed9-eca21091b83a/downloada62c8f41cafb15e69ce2a885aed23736MD53PPS_805_PCR_cuantitativa_deteccion_virus.pdf.txtPPS_805_PCR_cuantitativa_deteccion_virus.pdf.txtExtracted texttext/plain41307https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/34632cd6-5624-4e13-ae29-5da3575c12d1/downloada62c8f41cafb15e69ce2a885aed23736MD55THUMBNAILPPS-805.pdf.jpgPPS-805.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg5123https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/9bfc7f84-06f0-42cf-a026-c8183624d163/download69bf13b87c770c3ba64eb5ef9e998debMD54PPS_805_PCR_cuantitativa_deteccion_virus.pdf.jpgPPS_805_PCR_cuantitativa_deteccion_virus.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg5123https://repositorio.uptc.edu.co/bitstreams/9a259571-b3b2-469b-b223-d217ebfb899e/download69bf13b87c770c3ba64eb5ef9e998debMD56001/2291oai:repositorio.uptc.edu.co:001/22912021-02-10 19:01:04.725https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/Copyright (c) 2018 Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombiaopen.accesshttps://repositorio.uptc.edu.coUPTC DSpacerepositorio.uptc@uptc.edu.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 |