Diseño in silico de una proteína multi-epítopes y evaluación de sus propiedades inmunogénicas e hipoalergénicas

Las enfermedades alérgicas se caracterizan por tener una alta prevalencia a nivel mundial. La inmunoterapia alérgeno-específica es capaz de modificar la inflamación alérgica. La cisteína proteasa, la glutatión S transferasa y la tropomiosina de los ácaros del polvo doméstico – APD - (Dermatophagoide...

Full description

Autores:
Fang Mercado, Luis Carlos
Tipo de recurso:
Doctoral thesis
Fecha de publicación:
2023
Institución:
Universidad del Norte
Repositorio:
Repositorio Uninorte
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:manglar.uninorte.edu.co:10584/12052
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/10584/12052
Palabra clave:
Asma -- Investigaciones
Inmunoterapia
Respuesta inmune
Clonación molecular
Áscaris lumbricoides -- Investigaciones
Rights
openAccess
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description Las enfermedades alérgicas se caracterizan por tener una alta prevalencia a nivel mundial. La inmunoterapia alérgeno-específica es capaz de modificar la inflamación alérgica. La cisteína proteasa, la glutatión S transferasa y la tropomiosina de los ácaros del polvo doméstico – APD - (Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Blomia tropicalis) y Ascaris lumbricoides son los principales agentes implicados en la sensibilización alérgica en poblaciones del trópico. En la presente tesis se diseñó, expresó y caracterizó una proteína multi-epítopes (MP-001) basada en epítopes de células T de Ascaris lumbricoides y APD. MP-001 se produjo en E coli. La reactividad de IgE se evaluó mediante Dot-blot y ELISA en el suero de individuos alérgicos. Se evaluó la prueba de activación de basófilos, el porcentaje de proliferación de linfocitos T CD3+ y CD4+ y las poblaciones Treg (CD4+, CD25+ y FoxP3) mediante citometría de flujo en monocitos de sangre periférica (PBMC) de pacientes con asma alérgica sensibilizados a APD. MP-001 mostró una reactividad de IgE significativamente menor que el extracto de D. pteronyssinus. MP-001 indujo una menor activación de basófilos que el extracto de alérgeno. MP-001 indujo la proliferación de células T CD3+ CD4+ específicas y aumentó el porcentaje de células Treg en cultivos de PBMC. Estos resultados sugieren que MP-001 tiene propiedades inmunológicas con uso potencial en la modulación de enfermedades alérgicas asociadas a APD.
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Se evaluó la prueba de activación de basófilos, el porcentaje de proliferación de linfocitos T CD3+ y CD4+ y las poblaciones Treg (CD4+, CD25+ y FoxP3) mediante citometría de flujo en monocitos de sangre periférica (PBMC) de pacientes con asma alérgica sensibilizados a APD. MP-001 mostró una reactividad de IgE significativamente menor que el extracto de D. pteronyssinus. MP-001 indujo una menor activación de basófilos que el extracto de alérgeno. MP-001 indujo la proliferación de células T CD3+ CD4+ específicas y aumentó el porcentaje de células Treg en cultivos de PBMC. Estos resultados sugieren que MP-001 tiene propiedades inmunológicas con uso potencial en la modulación de enfermedades alérgicas asociadas a APD.DoctoradoDoctor en Ciencias Biomédicasapplication/pdf143 páginasspaUniversidad del NorteDoctorado en Ciencias BiomédicasDepartamento de medicinaBarranquilla, ColombiaDiseño in silico de una proteína multi-epítopes y evaluación de sus propiedades inmunogénicas e hipoalergénicasTrabajo de grado - Doctoradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_db06info:eu-repo/semantics/doctoralThesisTexthttp://purl.org/coar/version/c_71e4c1898caa6e32https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Asma -- InvestigacionesInmunoterapiaRespuesta inmuneClonación molecularÁscaris lumbricoides -- InvestigacionesEstudiantesDoctoradoORIGINALResumen.pdfResumen.pdfapplication/pdf36998https://manglar.uninorte.edu.co/bitstream/10584/12052/1/Resumen.pdff4d572868aef11b4ed53cca5b8f6f8f4MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://manglar.uninorte.edu.co/bitstream/10584/12052/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD5210584/12052oai:manglar.uninorte.edu.co:10584/120522024-06-17 16:59:59.976Repositorio Digital de la Universidad del Nortemauribe@uninorte.edu.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