Dental pulp stem cells extraction, culture and cryopreservation protocol
53 páginas
- Autores:
-
Cuadros Herrón, Alejandra
Puerta Mejía, Valentina
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2020
- Institución:
- Universidad EIA .
- Repositorio:
- Repositorio EIA .
- Idioma:
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- OAI Identifier:
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- Acceso en línea:
- https://repository.eia.edu.co/handle/11190/2711
- Palabra clave:
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Estas células constituyen la base de la biología moderna y gracias a los estudios que se han venido haciendo con ellas se ha logrado cerrar la brecha existente en esta área del conocimiento. La implementación de estas células es vital para mejorar la salud, calidad y esperanza de vida de la humanidad debido a que son pieza fundamental para el tratamiento de enfermedades isquémicas, degenerativas y diferentes traumas. Gracias al impacto que ha causado el uso de estas células en la medicina regenerativa actual y el aumento en sus aplicaciones se ha visto necesario contar con biobancos, repositorios biológicos específicos para estas células y allí poder almacenarlas para su posterior uso con fines investigativos. La función mencionada anteriormente de las células madre en la medicina regenerativa y la ingeniería de tejidos sirve como motivo para implementar un biobanco en la Universidad EIA en el cual se puedan almacenar las células que serán previamente extraídas de pulpa dental (considerado material de descarte), cultivadas y criopreservadas para poder llevar a cabo las diferentes investigaciones que se requieran para dichas áreas en esta institución. El objetivo principal de este proyecto fue diseñar protocolos específicos de extracción, cultivo y criopreservación de las células madre de la pulpa dental para poder establecer una metodología estándar y así poder garantizar resultados óptimos, y constatar el adecuado funcionamiento del biobanco y la viabilidad de las células manipuladas. Se eligieron las mejores condiciones de cultivo, incluyendo 1% ATB + 10% DMSO + DMEM y se evaluó la viabilidad de las células, y se obtuvo una viabilidad máxima de 99.1%. Luego, las DPSCs fueron congeladas bajo 2 condiciones diferentes, 10% DMSO y 10% Glicerol durante 1 y 2 meses, se evalúo la viabilidad después de la criopreservación y se observó que la muestra que mejor porcentaje de viabilidad mostró fue la que estaba sometida a 10%DMS y 1 mes de congelación.ABSTRACT: During the last decades, demand for stem cells has increased noticeably due to various research and potential applications in regenerative medicine. Stem cells play a key role in tissue engineering and regenerative medicine due to their ability to self-renew and differentiate into various cell types depending on their location in the organism. These cells serve as one of the bases of modern biology and many studies are closing the knowledge gap in this field. Stem Cells applications are fundamental in the ischemic and degenerative diseases and other traumas treatment; therefore, their implementation is inevitable as a mean to improve humanity’s health quality and life expectancy. The impact of stem cells usage in regenerative medicine has brought up the necessity to establish biobanks, specific biological repositories for these cells, easing up their availability for later research purposes and translational medicine use. Aforementioned stem cell’s role in regenerative medicine serves as a reason to establish a cell deposit at EIA University. The stem cells used in this study were originated from extracted dental pulp (considered a discardable biomaterial), they were cultured and cryopreserved for further research projects in the field of regenerative medicine and tissue engineering at the same institution. The main purpose of this project was to design specific protocols for extraction of teeth, culture and cryopreservation of stem cells, establishing a standardized methodology to guarantee appropriate results (cell viability maintenance) and well-established cellular deposit function. The best culture conditions were chosen by evaluating different reagent concentrations, selecting 1% ATB + 10% DMSO + DMEM as it showed a maximum of 99,1% viability. Then, DPSCs were cryopreserved using two different conditions, 10% DMSO and 10% Glycerol during periods of one and two months, evaluating cell viability afterwards. The highest viability was reached by sample 2, using 10% DMSO and one month of cryopreservation. The study concluded that chosen conditions brought good results in terms of viability.PregradoIngeniero(a) Biomédico(a)application/pdfspaUniversidad EIAIngeniería BiomédicaEscuela de Ciencias de la VidaEnvigado (Antioquia, Colombia)Derechos Reservados - Universidad EIA, 2020https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Repositorio Institucional Universidad EIADental pulp stem cells extraction, culture and cryopreservation protocolTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionTexthttps://purl.org/redcol/resource_type/TPhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85CriopreservaciónPulpa dentalCélulas madreDMSOCongelaciónCryopreservationDental pulpStem cellsFreezingPublicationORIGINALCuadrosAlejandra_2020_DentalPulpStem.pdfCuadrosAlejandra_2020_DentalPulpStem.pdfTrabajo de gradoapplication/pdf1292823https://repository.eia.edu.co/bitstreams/01286739-f17c-4f56-9899-54213ae0bf65/download4bd0a0b87931bf2f14c8815c3a7ac2a5MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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