Caracterización de cristales piezoeléctricos biofuncionalizados para la detección de una biomolécula modelo

93 páginas

Autores:
Barrientos Urdinola, Kaory
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2015
Institución:
Universidad EIA .
Repositorio:
Repositorio EIA .
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.eia.edu.co:11190/1989
Acceso en línea:
https://repository.eia.edu.co/handle/11190/1989
Palabra clave:
Inmunosensores piezoeléctricos
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openAccess
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Derechos Reservados - Universidad EIA, 2018
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Estos dispositivos constan de dos partes fundamentales: la interfase biológica, la cual permite la inmovilización de la biomolécula de interés, fundamental para alcanzar la especificidad del evento biológico a detectar y un sistema de transducción que permite sensar, medir y cuantificar los pequeños cambios de masa ocurridos en la superficie del inmunosensor por la unión específica entre el antígeno y anticuerpo. La selección de la metodología para la funcionalización y la caracterización de la superficie bioactiva constituyen procesos esenciales para garantizar la adecuada construcción de la interfase biológica y por lo tanto contribuir en el desarrollo de un biosensor óptimo que cumpla con los parámetros de especificidad, sensibilidad y reusabilidad requeridas. En la actualidad una de las técnicas de inmovilización más estudiadas y usadas para la funcionalización de sustratos de oro es la técnica de monocapas autoensambladas (SAM), por permitir la modificación de estos sustratos mediante monocapas de moléculas inmovilizadas con buenas características de homogeneidad, densidad y orientación; lo cual permite un buen desempeño del método. Sin embargo, variables como homogeneidad y rugosidad afectan la formación de estas monocapas y deben ser controladas y caracterizadas para cada aplicación específica. En el presente trabajo se describe el protocolo propuesto para la construcción y caracterización de la interfase biológica de un inmunosensor piezoeléctrico para la detección de la proteína albumina sérica bovina (BSA), como modelo inicial para la detección de biomarcadores de interés utilizando este biosensor. Se usó la técnica de monocapas autoensambladas mixtas (MSAM) formadas a partir de 11 mercapto-1-undecanol (MUA) y ácido 16-mercaptohexadecanoico (MHDA), en una proporción 50:1 respectivamente, para modificar la superficie del electrodo de oro de un cristal de cuarzo de 10 MHz. La caracterización de la superficie bioactiva se hizo mediante la técnica de Microscopía de Fuerza Atómica (AFM) y Espectroscopia Infrarroja por Transformada de Fourier (FTIR) para conocer la topografía de la superficie y la composición química de la misma, y con esto confirmar las características de homogeneidad, rugosidad y altura de las moléculas de la monocapa obtenida y la presencia de la proteína inmovilizada. Adicionalmente se comparó si existía diferencia entre la metodología de inmovilización propuesta (MSAM) y la tomada de referencia (SAM simples) por medio de ensayos realizados con el biosensor piezoeléctrico (QCM) (March, Manclús, Jiménez, Arnau, & Montoya, 2009). Estos estudios permitieron determinar que, para obtener superficies bioactivas de BSA con las características superficiales y químicas antes mencionadas, la dupla de concentraciones adecuadas de MSAM y proteína es 50 µM y 200 µg/mL, respectivamente; lo que posibilitará la optimización de la técnica de inmovilización en el desarrollo de inmunosensores piezoeléctricos para la detección de biomarcadores, relacionado con un ahorro significativo de reactivos respecto al protocolo de referencia.PregradoIngeniero(a) Biomédico(a)application/pdfspaUniversidad EIABiomédica, Mecatrónica y MecánicaEnvigado (Antioquia, Colombia). Universidad EIA, 2015Medellín (Antioquia, Colombia) Universidad CES, 2015Ingeniería BiomédicaDerechos Reservados - Universidad EIA, 2018https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/El autor de la obra, actuando en nombre propio, hace entrega del ejemplar respectivo y de sus anexos en formato digital o electrónico y autoriza a la ESCUELA DE INGENIERIA DE ANTIOQUIA, para que en los términos establecidos en la Ley 23 de 1982, Ley 44 de 1993, Decisión andina 351 de 1993, Decreto 460 de 1995, y demás normas generales sobre la materia, utilice y use por cualquier medio conocido o por conocer, los derechos patrimoniales de reproducción, comunicación pública, transformación y distribución de la obra objeto del presente documento. PARÁGRAFO: La presente autorización se hace extensiva no sólo a las dependencias y derechos de uso sobre la obra en formato o soporte material, sino también para formato virtual, electrónico, digital, y en red, internet, extranet, intranet, etc., y en general en cualquier formato conocido o por conocer. EL AUTOR, manifiesta que la obra objeto de la presente autorización es original y la realiza sin violar o usurpar derechos de autor de terceros, por lo tanto la obra es de exclusiva autoría y tiene la titularidad sobre la misma. PARÁGRAFO: En caso de presentarse cualquier reclamación o acción por parte de un tercero en cuanto a los derechos de autor sobre la obra en cuestión, EL AUTOR, asumirá toda la responsabilidad, y saldrá en defensa de los derechos aquí autorizados; para todos los efectos la ESCUELA DE INGENIERÍA DE ANTIOQUIA actúa como un tercero de buena fe.info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercialhttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Caracterización de cristales piezoeléctricos biofuncionalizados para la detección de una biomolécula modeloTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionTexthttps://purl.org/redcol/resource_type/TPhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Inmunosensores piezoeléctricosTransductorSuperficie bioactivaBiosensorPiezoelectric immunosensorsTransducerBioactive surfaceBIOM00246PublicationTHUMBNAILBarrientosKaory_2015_CaracterizacionCristalesPiezoelectricos.pdf.jpgBarrientosKaory_2015_CaracterizacionCristalesPiezoelectricos.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg8832https://repository.eia.edu.co/bitstreams/ab4aa0ab-b145-4acb-b203-a33c1600111b/download3557ad56a050636658e8000a59a9abf1MD54LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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