Búsqueda de estrategias comunes para controlar patógenos oomicetes como Phytophthora infestans basados en los blancos para el control de parásitos apicomplexa.
Los microorganismos denominados oomicetes son un importante pero poco estudiado grupo de especies que incluyen saprofitos y patógenos de plantas, vertebrados, insectos, peces y otros microbios. Entre ellos, se destacan algunas de las mas devastadoras especies patógenicas de las plantas dicotiledónea...
- Autores:
-
Restrepo, Silvia
- Tipo de recurso:
- Investigation report
- Fecha de publicación:
- 2015
- Institución:
- Ministerio de Ciencia, Tecnología e Innovación
- Repositorio:
- Repositorio Minciencias
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
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- Acceso en línea:
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- Palabra clave:
- Hongos fitopatógenos
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Los microorganismos denominados oomicetes son un importante pero poco estudiado grupo de especies que incluyen saprofitos y patógenos de plantas, vertebrados, insectos, peces y otros microbios. Entre ellos, se destacan algunas de las mas devastadoras especies patógenicas de las plantas dicotiledóneas, responsables de graves enfermedades (que ocasionan billonarias pérdidas económicas anualmente para la agricultura mundial) y la rápida destrucción de los ecosistemas dedicados a su producción. (Apartes del texto). |
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Para ello, se pretende utilizar como organismo modelo a P. infestans, utilizando una aproximación combinada de bioinformática y trabajo experimental de laboratorio. El objetivo a largo plazo de este proyecto es validar y en caso afirmativo aportar al desarrollo de nuevas estrategias para el control de patógenos Oomicetes, basadas en un grupo sinérgico de inhibidores de las enzimas relacionadas a las rutas metabólicas utilizadas para el control de los patógenos Apicomplexa. Creemos que el principio de inhibición especie específica que presentan las enzimas de la biosíntesis de pirimidinas para el control de los parásitos Apicomplexa puede ser utilizado como punto de partida para mejorar los métodos para el control de los patógenos Oomicetes. De manera significativa nuestra propuesta no solo ayudará a la búsqueda de drogas con potencial Oomicida, sino que se buscará un mejor entendimiento de los aspectos fundamentales de biosíntesis de pirimidinas y su reciclaje en los Oomicetes, permitiendo conocer importantes intersecciones de este metabolismo con otros aspectos biológicos de los Oomicetes como su desarrollo y diferenciación.Objetivos Específicos : 1. Corroboración de la hipótesis y búsqueda de compuestos inhibidores. Comprobar in vitro si los medicamentos comerciales utilizados para el control Apicomplexa ejercen un efecto inhibitorio sobre el crecimiento de P. infestans. Desarrollar un ensayo de ""high-throughput screening"" en placa que permita identificar rápidamente y con poca cantidad los compuestos que ejercen inhibición sobre el crecimiento de Phytophthora y que posteriormente permita validar si afectan a las mismas enzimas blanco.Objetivos Específicos : 2. Confirmación y búsqueda de compuestos inhibitorios del metabolismo de pirimidinas. Validar in silico si enzimas presentes en rutas metabólicas compartidas y esenciales como la síntesis de pirimidinas son también blancos potenciales para el diseño racional drogas. Utilizar programas de ""Docking"" molecular de compuestos y el 'screening' de una librería virtual para seleccionar y evaluar compuestos con alto potencial inhibitorio, reduciendo así los costos en la búsqueda de compuestos.Objetivos Específicos : 3. Validación de los compuestos inhibitorios seleccionados. Clonar, expresar y purificar en forma recombinante las enzimas candidatas seleccionadas tanto del patógeno como de su hospedero para realizar in vitro los ensayos cinéticos de actividad e inhibición. De esta manera se seleccionan los compuestos con mayor potencial efectivo para ensayarlos in vivo en la planta.Objetivos Específicos : 4. Tiempos de mayor susceptibilidad y rol de los blancos. Identificar los niveles de expresión de estas enzimas a través del ciclo de infección, para caracterizar su regulación y establecer los momentos del ciclo en los cuales es más susceptible el patógeno al inhibidor. Silenciar tres enzimas de la ruta basados en su diferencia en expresión para evaluar el papel biológico que cumplen en el desarrollo del patógeno.PublicationORIGINAL120452128532 20152430173342.pdf120452128532 20152430173342.pdfInforme finalapplication/pdf50527490https://repositorio.minciencias.gov.co/bitstreams/f68c41b0-872a-486b-8642-578bd0550f6f/download4b2f82e6064603be46d51ea20c2f1524MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814798https://repositorio.minciencias.gov.co/bitstreams/d590209c-8c2e-4248-b311-e8cebd71afd0/download88794144ff048353b359a3174871b0d5MD52license.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-80https://repositorio.minciencias.gov.co/bitstreams/3fef6cbe-0ec9-4e88-9828-cc0d7a7c954d/downloadd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD55TEXT120452128532 20152430173342.pdf.txt120452128532 20152430173342.pdf.txtExtracted 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