Proporción de subpoblaciones linfoides T y B con fenotipo regulador, inflamatorio y autorreactivo en tejido gingival de pacientes con periodontitis
La periodontitis es una patología infecciosa e inflamatoria crónica de etiología multifactorial asociada a la interacción entre la disbiosis de la biopelícula dental y la respuesta inmune, esta última caracterizada por la respuesta inmune innata, la cual tiene la capacidad de guiar el inicio y la pr...
- Autores:
- Tipo de recurso:
- masterThesis
- Fecha de publicación:
- 2019
- Institución:
- Pontificia Universidad Javeriana
- Repositorio:
- Repositorio Universidad Javeriana
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- OAI Identifier:
- oai:repository.javeriana.edu.co:10554/50661
- Palabra clave:
- Inmunología oral
Enfermedad periodontal
Periodontitis
Linfocitos
Linfocito B
Linfocito T
Citoquinas
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Cartometría de flujo
Oral immunology
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Periodontitis
Lymphocytes
B lymphocyte
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Cytokines
Immunhistochemistry
Flow citrometry
Maestría en ciencias biológicas - Tesis y disertaciones académicas
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Proporción de subpoblaciones linfoides T y B con fenotipo regulador, inflamatorio y autorreactivo en tejido gingival de pacientes con periodontitis
Blanco López, Margarita María Inmunología oral Enfermedad periodontal Periodontitis Linfocitos Linfocito B Linfocito T Citoquinas Inmunhistoquimica Cartometría de flujo Oral immunology Periodontal disease Periodontitis Lymphocytes B lymphocyte T lymphocyte Cytokines Immunhistochemistry Flow citrometry Maestría en ciencias biológicas - Tesis y disertaciones académicas Inmunología Periodontitis Linfocitos B Células T |
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Inmunología oral Enfermedad periodontal Periodontitis Linfocitos Linfocito B Linfocito T Citoquinas Inmunhistoquimica Cartometría de flujo Oral immunology Periodontal disease Periodontitis Lymphocytes B lymphocyte T lymphocyte Cytokines Immunhistochemistry Flow citrometry Maestría en ciencias biológicas - Tesis y disertaciones académicas Inmunología Periodontitis Linfocitos B Células T |
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La periodontitis es una patología infecciosa e inflamatoria crónica de etiología multifactorial asociada a la interacción entre la disbiosis de la biopelícula dental y la respuesta inmune, esta última caracterizada por la respuesta inmune innata, la cual tiene la capacidad de guiar el inicio y la progresión de la respuesta inmune adaptativa, de la cual, se han descrito roles importantes de las células y citoquinas que la conforman, como lo son los linfocitos T (LT) y linfocitos B (LB), aunque su participación en la patogénesis de la enfermedad periodontal ha sido ampliamente investigada; el papel exacto en la regulación, inflamación, autorreactividad y su localización en los diferentes sitios del tejido epitelial y conectivo encontrado en el periodonto, aún sigue siendo controversial. Por esta razón, es importante comprender los mecanismos involucrados, en el inicio y progresión de la enfermedad, para determinar la naturaleza de la respuesta inmune, la cual podría establecer el carácter de la enfermedad periodontal y por ende el efecto de la subpoblaciones de LT y LB, Por tal motivo el objetivo de este trabajo fue establecer la proporción de las subpoblaciones linfoides T y B con fenotipo regulador, inflamatorio y autorreactivo en tejido gingival de pacientes con periodontitis. Para esto se obtuvieron 24 muestras de tejido gingival con diagnostico de Sano/Gingivitis (S/G) (10) y Periodontitis (P) (14) a partir de incisiones a bisel interno, el resultado de esta incisión se dividió en dos partes, una fue procesada para tinción con los marcadores CD3, CD4, CD25, CD161, RIL23, FOXP3, CD19, CD5, CD1d por inmunohistoquímica y la segunda parte se analizo por citometría de flujo caracterizando, las población según esta distribución, T reguladoras: CD3, CD4, CD25, CD127, CD45 y FoxP3. TH17: CD3, CD4, CD25, CD161, RIL-23, CD45 y Células B: CD19, CD5, CD1d, CD3, CD45 y 7AAD. La pruebas estadistas realizadas a los resultado obtenidos fueron la prueba de normalidad Skewness/Kurtosis, t con varianzas iguales y ANOVA. Los resultados de esta investigación reportan expresión positiva en todos los marcadores evaluados por inmunohistoquímica fueron en algunas zonas del tejido S/G comparado con el tejido con P lo que puede sugerir que independientemente de la presencia de las poblaciones linfoides, el daño tisular no es mediado en su totalidad por ellas o que en su dinámica de plasticidad inmune determinada por el perfil de citocinas/factores que contribuyen a la destrucción tisular y de tejido óseo. En cuanto a la citometría de flujo, por primera vez se reporta la presencia de células TH17 reguladoras y proinflamatorias discriminadas por el marcador CD25 y los linfocitos B reguladores (CD1d+) en el tejido gingival, a su vez, se muestra una proporción mayor de fenotipos reguladores en tejido sano y enfermo, pero no hay diferencias estadísticamente significativas concluyentes entre los tejidos, lo que nos permite hipotetizar que mas allá de la proporción de diferentes fenotipos de células T y B, los fenómenos de plasticidad en la función de estas células de manera cíclica u otros factores inmunes asociados a la inmunidad innata podrían jugar un papel importante en la mediación del daño tisular que se observa en la enfermedad. |
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Proporción de subpoblaciones linfoides T y B con fenotipo regulador, inflamatorio y autorreactivo en tejido gingival de pacientes con periodontitis
Proportion of T and B lymphoid subpopulations with regulatory, inflammatory and autoreactive phenotype in gingival tissue of patients with periodontitisBlanco López, Margarita MaríaInmunología oralEnfermedad periodontalPeriodontitisLinfocitosLinfocito BLinfocito TCitoquinasInmunhistoquimicaCartometría de flujoOral immunologyPeriodontal diseasePeriodontitisLymphocytesB lymphocyteT lymphocyteCytokinesImmunhistochemistryFlow citrometryMaestría en ciencias biológicas - Tesis y disertaciones académicasInmunologíaPeriodontitisLinfocitos BCélulas TLa periodontitis es una patología infecciosa e inflamatoria crónica de etiología multifactorial asociada a la interacción entre la disbiosis de la biopelícula dental y la respuesta inmune, esta última caracterizada por la respuesta inmune innata, la cual tiene la capacidad de guiar el inicio y la progresión de la respuesta inmune adaptativa, de la cual, se han descrito roles importantes de las células y citoquinas que la conforman, como lo son los linfocitos T (LT) y linfocitos B (LB), aunque su participación en la patogénesis de la enfermedad periodontal ha sido ampliamente investigada; el papel exacto en la regulación, inflamación, autorreactividad y su localización en los diferentes sitios del tejido epitelial y conectivo encontrado en el periodonto, aún sigue siendo controversial. Por esta razón, es importante comprender los mecanismos involucrados, en el inicio y progresión de la enfermedad, para determinar la naturaleza de la respuesta inmune, la cual podría establecer el carácter de la enfermedad periodontal y por ende el efecto de la subpoblaciones de LT y LB, Por tal motivo el objetivo de este trabajo fue establecer la proporción de las subpoblaciones linfoides T y B con fenotipo regulador, inflamatorio y autorreactivo en tejido gingival de pacientes con periodontitis. Para esto se obtuvieron 24 muestras de tejido gingival con diagnostico de Sano/Gingivitis (S/G) (10) y Periodontitis (P) (14) a partir de incisiones a bisel interno, el resultado de esta incisión se dividió en dos partes, una fue procesada para tinción con los marcadores CD3, CD4, CD25, CD161, RIL23, FOXP3, CD19, CD5, CD1d por inmunohistoquímica y la segunda parte se analizo por citometría de flujo caracterizando, las población según esta distribución, T reguladoras: CD3, CD4, CD25, CD127, CD45 y FoxP3. TH17: CD3, CD4, CD25, CD161, RIL-23, CD45 y Células B: CD19, CD5, CD1d, CD3, CD45 y 7AAD. La pruebas estadistas realizadas a los resultado obtenidos fueron la prueba de normalidad Skewness/Kurtosis, t con varianzas iguales y ANOVA. Los resultados de esta investigación reportan expresión positiva en todos los marcadores evaluados por inmunohistoquímica fueron en algunas zonas del tejido S/G comparado con el tejido con P lo que puede sugerir que independientemente de la presencia de las poblaciones linfoides, el daño tisular no es mediado en su totalidad por ellas o que en su dinámica de plasticidad inmune determinada por el perfil de citocinas/factores que contribuyen a la destrucción tisular y de tejido óseo. En cuanto a la citometría de flujo, por primera vez se reporta la presencia de células TH17 reguladoras y proinflamatorias discriminadas por el marcador CD25 y los linfocitos B reguladores (CD1d+) en el tejido gingival, a su vez, se muestra una proporción mayor de fenotipos reguladores en tejido sano y enfermo, pero no hay diferencias estadísticamente significativas concluyentes entre los tejidos, lo que nos permite hipotetizar que mas allá de la proporción de diferentes fenotipos de células T y B, los fenómenos de plasticidad en la función de estas células de manera cíclica u otros factores inmunes asociados a la inmunidad innata podrían jugar un papel importante en la mediación del daño tisular que se observa en la enfermedad.Pontificia Universidad JaverianaPeriodontitis is a chronic infectious and inflammatory pathology of multifactorial etiology associated with the interaction between dental biofilm dysbiosis and the immune response, the latter is characterized by the innate immune response, which has the ability to guide the initiation and progression of the adaptive immune response, from where, It has been described important roles from the cels and cytokines that compose them as are T lymphocytes (LT) and B lymphocytes (LB), although their participation in the pathogenesis of periodontal disease has been extensively investigated; the exact role in regulation, inflammation, autoreactivity and its localization in the different epithelial and connective tissue sites found in the periodontium, still remains controversial. For this reason, it is important to understand the mechanisms involved, at the beginning and progression of the disease, to determine the nature of the immune response, which could establish the character of the periodontal disease and therefore the effect of the subpopulations of LT and LB, For this reason the objective of this work is to establish the proportion of the T and B lymphoid subpopulations with regulatory, inflammatory and autoreactive phenotype in gingival tissue of patients with periodontitis. For this, 24 gingival tissue samples were obtained with a diagnosis of Sano / Gingivitis (S / G) (10) and Periodontitis (P) (14) from internal bevel incisions, the result of this incision was divided into two parts, one was processed for staining with the markers CD3, CD4, CD25, CD161, RIL23, FOXP3, CD19, CD5, CD1d by immunohistochemistry and the second part was analyzed by flow cytometry, characterizing the population according to this distribution, regulatory T: CD3, CD4, CD25, CD127, CD45, and FoxP3. TH17: CD3, CD4, CD25, CD161, RIL-23, CD45 and B cells: CD19, CD5, CD1d, CD3, CD45 and 7AAD. The statistical tests performed on the results obtained were the Skewness / Kurtosis normality test, t with equal variances and ANOVA. The results of this research report positive expression in all the markers evaluated by immunohistochemistry were in some areas of the S / G tissue compared to the tissue with P, which may suggest that regardless of the presence of lymphoid populations, tissue damage is not mediated. entirely by them or in their dynamics of immune plasticity determined by the profile of cytokines / factors that contribute to the destruction of tissue and bone tissue. Regarding flow cytometry, for the first time the presence of regulatory and pro-inflammatory TH17 cells discriminated by the CD25 marker and regulatory B lymphocytes (CD1d +) is reported in the gingival tissue, in turn, a higher proportion of phenotypes are shown regulators in healthy and diseased tissue, but there are no conclusive statistically significant differences between the tissues, which allows us to hypothesize that beyond the proportion of different phenotypes of T and B cells, the plasticity phenomena in the function of these cells in a Cyclical or other immune factors associated with innate immunity could play an important role in mediating the tissue damage seen in the disease.Magíster en Ciencias BiológicasMaestríaPontificia Universidad JaverianaMaestría en Ciencias BiológicasFacultad de CienciasRoa Molina, Nelly StellaRodríguez Ciodaro, AdrianaDueñas Villamil, Ricardo ErnestoLafaurie Villamil, Gloria InésDe Ávila Quiroga, JulietteGonzález Duque, Octavio Alberto2020-08-10T19:27:06Z2020-08-10T19:27:06Z2019-06http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aaTesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestríahttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdccinfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionPDFapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10554/50661https://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.50661instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.cospaAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/embargoedAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, "Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores", los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2reponame:Repositorio Universidad Javerianainstname:Pontificia Universidad Javerianainstacron:Pontificia Universidad Javeriana2023-12-31T05:00:00Z |