SIMPLE PROCEDURES FOR EXTRACTION OF TOTAL AND CHLOROPLAST DNA FROM Passiflora SPECIES

Se describe una técnica sencilla para la extracción de DNA total y ctDNA de especies del género Passiflora. El DNA total fue purificado a partir de bajas cantidades (40 mg) de material vegetal de diferentes fuentes (brotes, zarcillos, estípulas, nudos y hojas) en presencia de PVPP con el fin de evit...

Full description

Autores:
Tipo de recurso:
article
Fecha de publicación:
2013
Institución:
Pontificia Universidad Javeriana
Repositorio:
Repositorio Universidad Javeriana
Idioma:
eng
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
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spelling SIMPLE PROCEDURES FOR EXTRACTION OF TOTAL AND CHLOROPLAST DNA FROM Passiflora SPECIESSIMPLE PROCEDURES FOR EXTRACTION OF TOTALAND CHLOROPLAST DNA FROM Passijlora SPECIESGóngora F., Gustavo; Unidad de Biología Vegetal, Departamento de Biología, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá,Hodson de Jaramillo, Elizabeth; Unidad de Biología Vegetal, Departamento de Biología, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá,nullChloroplast Isolation; DNA Isolation; Passionfruit; Passiflora edulis; vinesnullnullChloroplast Isolation; DNA Isolation; Passionfruit; Passiflora edulis; vinesnullSe describe una técnica sencilla para la extracción de DNA total y ctDNA de especies del género Passiflora. El DNA total fue purificado a partir de bajas cantidades (40 mg) de material vegetal de diferentes fuentes (brotes, zarcillos, estípulas, nudos y hojas) en presencia de PVPP con el fin de evitar la acción deletérea de los polifenoles. El aislamiento del ctDNA se realizó a través de la lisis de cloroplastos purificados en gradientes discontinuos de sacarosa. Se obtuvo alrededor de 50 mg de ctDNA de menos de 20 g de tejido foliar. La calidad del DNA aislado por los procedimientos descritos permitió su amplificación por PCR y digestión con endonucleasas de restricción. Estas técnicas permiten el análisis rápido de plantas individuales usando pequeñas cantidades de tejido.We describe simple protocols for the extraction of total DNA and ctDNA from Passiflora species. Total DNA was purified from less than 40mg of different tissue sources (buds, tendrils, stipules, nodes or leaves) in the presence ofPVPP to avoid polyphenols. ctDNA isolation was based on the lysis of chloroplasts purified by sucrose step gradients. Up to 50mg of ctDNA were obtained from less than 20g ofleaf tissue. Both procedures yielded clean DNA suitable for PCR amplification and restriction endonuclease digestion. These techniques can be used for the analysis of DNA from single plants using small amounts of tissuPontificia Universidad Javeriananullnull2018-02-24T15:59:58Z2020-04-15T18:10:48Z2018-02-24T15:59:58Z2020-04-15T18:10:48Z2013-05-27http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Artículo de revistahttp://purl.org/coar/resource_type/c_6501info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionPDFapplication/pdfhttp://revistas.javeriana.edu.co/index.php/scientarium/article/view/50592027-13520122-7483http://hdl.handle.net/10554/31459enghttp://revistas.javeriana.edu.co/index.php/scientarium/article/view/5059/3905Universitas Scientiarum; Vol 3, No 1-2 (1996); 99-105Universitas Scientiarum; Vol 3, No 1-2 (1996); 99-105Universitas Scientiarum; Vol 3, No 1-2 (1996); 99-105nullnullnullnullnullnullAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2reponame:Repositorio Universidad Javerianainstname:Pontificia Universidad Javerianainstacron:Pontificia Universidad Javeriana2023-03-28T21:15:41Z
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