Evaluación del efecto de fragmentos F(ab)2? de anticuerpos policlonales de conejo, inducidos por pseudopéptidos amida reducida de la region N-terminal del antígeno msp-1 de p. falciparum en un modelo de malaria en ratones balb/c

En este trabajo se propone evaluar el efecto de la transferencia pasiva de fragmentos F(ab)2? de anticuerpos producidos en conejos Nueva Zelanda, en ratones BALB/c infectados con P. yoelii. El diseño experimental se basó en un fragmento de la región N-terminal de la proteína MSP-1 de P. falciparum....

Full description

Autores:
Tipo de recurso:
masterThesis
Fecha de publicación:
2009
Institución:
Pontificia Universidad Javeriana
Repositorio:
Repositorio Universidad Javeriana
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/623
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/10554/623
https://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.623
Palabra clave:
Enlace péptidico
Pseudopeptido
Fragmentos F(ab)'2
Peptide-bond isoster
Pseudopeptide
Transition-state-mimetic
Immunoglobulin, F(ab)2´
Enlace proteico
Lipoproteínas
Péptidos
Maestría en biología - Tesis y disertaciones académicas
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Bohórquez Araque, Magda Yenith
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description En este trabajo se propone evaluar el efecto de la transferencia pasiva de fragmentos F(ab)2? de anticuerpos producidos en conejos Nueva Zelanda, en ratones BALB/c infectados con P. yoelii. El diseño experimental se basó en un fragmento de la región N-terminal de la proteína MSP-1 de P. falciparum. Se selecciono el péptido 1513 el cual posee el motivo de unión a glóbulos rojos ?K-KMVL-. Los enlaces peptídicos adyacentes a cada residuo se sustituyeron por enlaces del tipo amida reducida ?-[CH2-NH]- para generar los pseudopéptidos codificados como ?-437, ?-439, ?-440, ?-441 y ?-442. Posteriormente, se obtuvieron conjugados del péptido base y sus pseudopéptidos a albúmina sérica bovina (BSA), para inmunizar conejos Nueva Zelanda. A partir de los anticuerpos generados se obtuvieron los fragmentos F(ab) 2?, los cuales se lograron con una pureza cercana al 100%. Estos se caracterizaron por su perfil de estructura secundaría por Dicroísmo Circular (DC), presentando un perfil estructural con un alto contenido en hebras-? y porcentajes bajos de hélices-?. Finalmente se realizaron dos ensayos biológicos. La inhibición de la invasión in vitro del P. falciparum a los glóbulos rojos humanos (GR), mostró porcentajes inhibitorios de los F(ab)?2 entre el 70 y el 100%. El ensayo in vivo de inmunización pasiva de ratones BALB/c, evidencio un efecto protector neutralizante capaz de demorar o suprimir la parasitemia e incrementar la supervivencia de los animales protegidos.
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Los enlaces peptídicos adyacentes a cada residuo se sustituyeron por enlaces del tipo amida reducida ?-[CH2-NH]- para generar los pseudopéptidos codificados como ?-437, ?-439, ?-440, ?-441 y ?-442. Posteriormente, se obtuvieron conjugados del péptido base y sus pseudopéptidos a albúmina sérica bovina (BSA), para inmunizar conejos Nueva Zelanda. A partir de los anticuerpos generados se obtuvieron los fragmentos F(ab) 2?, los cuales se lograron con una pureza cercana al 100%. Estos se caracterizaron por su perfil de estructura secundaría por Dicroísmo Circular (DC), presentando un perfil estructural con un alto contenido en hebras-? y porcentajes bajos de hélices-?. Finalmente se realizaron dos ensayos biológicos. La inhibición de la invasión in vitro del P. falciparum a los glóbulos rojos humanos (GR), mostró porcentajes inhibitorios de los F(ab)?2 entre el 70 y el 100%. El ensayo in vivo de inmunización pasiva de ratones BALB/c, evidencio un efecto protector neutralizante capaz de demorar o suprimir la parasitemia e incrementar la supervivencia de los animales protegidos.Magíster en Ciencias BiológicasMaestríaPontificia Universidad JaverianaMaestría en Ciencias BiológicasFacultad de CienciasLozano Moreno, José Manuel2010-11-30T18:45:54Z2011-09-30T03:16:48Z2014-10-09T02:53:52Z2016-01-13T19:38:34Z2020-04-16T19:44:44Z2010-11-30T18:45:54Z2011-09-30T03:16:48Z2014-10-09T02:53:52Z2016-01-13T19:38:34Z2020-04-16T19:44:44Z2009http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aaTesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestríahttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdccinfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionPDFapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10554/623https://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.623instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.cospaBogotá (Colombia)Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2reponame:Repositorio Universidad Javerianainstname:Pontificia Universidad Javerianainstacron:Pontificia Universidad Javeriana2022-04-29T17:38:21Z