Analysis of NK1r and NMDAr expression in dorsal root ganglia neurons in the presence of nerve growth factor (NGF) and prostaglandin E2 (PGE2)
El laboratorio del departamento de Anestesiología de la Universidad de New York, investiga como la SustanciaP (SP) regula el aumento de la producción de NMDA relacionado con la concentración de Calcio citoplasmático presente en las neuronas primarias de los Ganglios de la Raíz Dorsal (GRD), como pos...
- Autores:
- Tipo de recurso:
- masterThesis
- Fecha de publicación:
- 2012
- Institución:
- Pontificia Universidad Javeriana
- Repositorio:
- Repositorio Universidad Javeriana
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- Palabra clave:
- NMDA
Ganglio de la raíz dorsal
Factor de crecimiento neuronal
PGE2
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NMDA
Dorsal root ganglia
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Ganglios espinales
Columna vertebral
Neurobiología
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Maestría en biología - Tesis y disertaciones académicas
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- openAccess
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Analysis of NK1r and NMDAr expression in dorsal root ganglia neurons in the presence of nerve growth factor (NGF) and prostaglandin E2 (PGE2) Baquero Buitrago, Jairo NMDA Ganglio de la raíz dorsal Factor de crecimiento neuronal PGE2 NK1 NMDA Dorsal root ganglia Nerve growth factor PGE2 NK1 Ganglios espinales Columna vertebral Neurobiología Prostaglandinas Maestría en biología - Tesis y disertaciones académicas |
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El laboratorio del departamento de Anestesiología de la Universidad de New York, investiga como la SustanciaP (SP) regula el aumento de la producción de NMDA relacionado con la concentración de Calcio citoplasmático presente en las neuronas primarias de los Ganglios de la Raíz Dorsal (GRD), como posible mecanismo donde ellas pueden ser sobre-excitadas después de sufrir daño. Estudios preliminares mostraron que neuronas GRD requieren de Factor de Crecimiento Neural (FCN) y prostaglandina E2 (PGE2) para tal fin. Mi proyecto consistió en estudiar si las neuronas de GRD producen respuesta al estímulo de NMDA aumentando sus receptores y/o los receptores de neuro-kinin 1 (NK1) Los cultivos primarios de neuronas de GRD fueron tratados así: control (solo medio de cultivo), PGE2 y NGF independientes y simultáneos en el mismo medio. Resultados: el tratamiento con FCN+PGE2 mostraron aumento en la expresión de NK1r comparados con grupo de control. En las subunidades de NMDAr, la NR1 no mostró ningún aumento significativo en su expresión bajo ninguno de los tratamientos. La subunidad NR2B mostró un aumento en la expresión en neuronas de la proteína en los receptores de NMDA ni de NK1r. |
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Analysis of NK1r and NMDAr expression in dorsal root ganglia neurons in the presence of nerve growth factor (NGF) and prostaglandin E2 (PGE2)Baquero Buitrago, JairoNMDAGanglio de la raíz dorsalFactor de crecimiento neuronalPGE2NK1NMDADorsal root gangliaNerve growth factorPGE2NK1Ganglios espinalesColumna vertebralNeurobiologíaProstaglandinasMaestría en biología - Tesis y disertaciones académicasEl laboratorio del departamento de Anestesiología de la Universidad de New York, investiga como la SustanciaP (SP) regula el aumento de la producción de NMDA relacionado con la concentración de Calcio citoplasmático presente en las neuronas primarias de los Ganglios de la Raíz Dorsal (GRD), como posible mecanismo donde ellas pueden ser sobre-excitadas después de sufrir daño. Estudios preliminares mostraron que neuronas GRD requieren de Factor de Crecimiento Neural (FCN) y prostaglandina E2 (PGE2) para tal fin. Mi proyecto consistió en estudiar si las neuronas de GRD producen respuesta al estímulo de NMDA aumentando sus receptores y/o los receptores de neuro-kinin 1 (NK1) Los cultivos primarios de neuronas de GRD fueron tratados así: control (solo medio de cultivo), PGE2 y NGF independientes y simultáneos en el mismo medio. Resultados: el tratamiento con FCN+PGE2 mostraron aumento en la expresión de NK1r comparados con grupo de control. En las subunidades de NMDAr, la NR1 no mostró ningún aumento significativo en su expresión bajo ninguno de los tratamientos. La subunidad NR2B mostró un aumento en la expresión en neuronas de la proteína en los receptores de NMDA ni de NK1r.The Anesthesiology Laboratory from The New York University, Langone Medical Center investigates the role of Substance P (SP) in regulating the NMDA-evoked increase in cytoplasmic Ca2+ ([Ca2+]cyt) present in primary sensory Dorsal Root Ganglia (DRG) neurons, as a possible mechanism by which DRG neurons may become hyperexcitable following injury. Preliminary studies showed that in tissue culture, DRG neurons require both nerve growth factor (NGF) and prostaglandin E2 (PGE2) in order to get a NMDA-evoked increase in [Ca2+]cyt . Hence, my project consisted in investigating whether the ability of these neurons become NMDA responsive was due to an increase in NMDA receptors and/or due to neurokinin receptors. NGF and PGE2 have been previously shown to increase during injury and to contribute in neuronal sensitization. In order to evaluate changes in the expression of NMDA and Neurokinin receptors in cultured adult rat DRG neuron, we used two different methods: Immunostaining and Western Blotting. For the immunostaining: we prepared single cell cultures of DRG neurons exposed to three different treatments: the control, which is the culture media; the addition of PGE2 and NGF independently and simultaneously. We used specific primary antibodies against the Substance P (SP) receptor, the NK1r, and for the subunits NR1 and NR2B in N-methyl D-aspartate (NMDA) receptor. We found that treatment with both factors NGF+PGE2, showed a slight increase in the expression of the NK1r as compared to the control group. About NMDAr’s subunits, the NR1 does not show any significant increase in its expression under any of the treatments. The NR2B subunit shows an increase in expression in the medium size DRG neurons in all the treated groups compared to control. We used Western blots to measure levels of protein expression from the receptors presented in NK1r, and NMDAr NR2B subunit using as a source the whole protein from the cell culture. Western blot analysis did not showed any increase in the expression of NK1r or NR2B subunit in any of the treatments. Therefore, the observed increase in NMDA-responsiveness gotten in the laboratory does not reflect a change in the expression of NMDAr or in the neurokinin receptor.Magíster en Ciencias BiológicasMaestríaPontificia Universidad JaverianaMaestría en Ciencias BiológicasFacultad de CienciasRecio-Pinto, Esperanza2013-04-03T20:28:39Z2014-10-09T02:54:11Z2016-01-13T19:38:50Z2020-04-16T19:43:49Z2013-04-03T20:28:39Z2014-10-09T02:54:11Z2016-01-13T19:38:50Z2020-04-16T19:43:49Z2012http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aaTesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestríahttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdccinfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionPDFapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10554/3365https://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.3365instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.cospaAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2reponame:Repositorio Universidad Javerianainstname:Pontificia Universidad Javerianainstacron:Pontificia Universidad Javeriana2022-04-29T19:22:01Z |