Detección e identificación simultánea y discriminación del Actinobacillus leuropneumoniae serotipos 1, 5 y 7 por técnicas de pcr múltiple basadas en genes apxIVAy y cps

Actinobacillus pleuropneumoniae (A. pleuropneumoniae) es un patógeno respiratorio del ganado porcino con 15 serotipos reconocidos. En Colombia, los más prevalentes son el 1, 5 y 7. En este trabajo se describen una serie de protocolos de PCR tipo múltiple (mPCR) basados en la utilización de nuevos in...

Full description

Autores:
Tipo de recurso:
masterThesis
Fecha de publicación:
2010
Institución:
Pontificia Universidad Javeriana
Repositorio:
Repositorio Universidad Javeriana
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/827
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/10554/827
https://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.827
Palabra clave:
Actinobacillus pleuropneumoniae
Exotoxinas
Reacción en cadena por polimerasa
Enfermedades en el ganado
Maestría en biología - Tesis y disertaciones académicas
Rights
openAccess
License
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
Description
Summary:Actinobacillus pleuropneumoniae (A. pleuropneumoniae) es un patógeno respiratorio del ganado porcino con 15 serotipos reconocidos. En Colombia, los más prevalentes son el 1, 5 y 7. En este trabajo se describen una serie de protocolos de PCR tipo múltiple (mPCR) basados en la utilización de nuevos iniciadores específicos contra las regiones de biosíntesis de polisacáridos capsulares (cps) de los serotipos 1, 5 y 7, combinados respectivamente con nuevos iniciadores específicos contra el determinante genético de la exotoxina IV (apxIVA), en la especie bacteriana A. pleuropneumoniae. Los protocolos se optimizaron usando cepas de referencia y aislados de campo colombianos, y posteriormente se aplicaron sobre tejido pulmonar con lesiones aparentes de pleuroneumonía porcina. Se determinó la especificidad y sensibilidad tanto analítica como diagnóstica de las mPCR mediante su comparación contra los resultados obtenidos por el método de identificación bacteriológica convencional a partir de cultivos puros. Los resultados demostraron la aplicabilidad de las mPCR como herramientas alternativas para la detección e identificación de aislados del A. pleuropneumoniae, al ser técnicas rápidas, específicas, sensibles y versátiles. En conclusión, se presentan tres protocolos de mPCR para el diagnóstico del A. pleuropneumoniae serotipos 1, 5 y 7 a partir de cepas de referencia y aislados de campo.