Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh
Estudios previos han demostrado que los extractos P2Et (proveniente de Caesalpinia spinosa) y supercrítico SC (proveniente de Petiveria alliacea) presentan actividad anti-tumoral a través de distintos mecanismos biológicos, que pueden incluir la modulación de los niveles intracelulares de especies r...
- Autores:
-
García Ortiz, Jimmy Alejandro
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2022
- Institución:
- Pontificia Universidad Javeriana
- Repositorio:
- Repositorio Universidad Javeriana
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.javeriana.edu.co:10554/60390
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/10554/60390
- Palabra clave:
- Cáncer
Leucemia
ROS
Viabilidad celular
Proliferación
K562
Reh
Cancer
Leukemia
ROS
Cell viability
Proliferation
K562
Reh
Bacteriología - Tesis y disertaciones académicas
Cáncer - Tratamiento
Células tumorales
Radicales libres
Leucemia aguda
- Rights
- openAccess
- License
- Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
id |
JAVERIANA2_f749d8866d3e6bf38de181308d7f83d8 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/60390 |
network_acronym_str |
JAVERIANA2 |
network_name_str |
Repositorio Universidad Javeriana |
repository_id_str |
|
dc.title.spa.fl_str_mv |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh |
dc.title.english.spa.fl_str_mv |
Evaluation of the effect of SC (Petiveria alliacea) and P2Et (Caesalpinia spinosa) extracts on the levels of reactive oxygen species in the leukemic cell lines K562 and Reh |
title |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh |
spellingShingle |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh Cáncer Leucemia ROS Viabilidad celular Proliferación K562 Reh Cancer Leukemia ROS Cell viability Proliferation K562 Reh Bacteriología - Tesis y disertaciones académicas Cáncer - Tratamiento Células tumorales Radicales libres Leucemia aguda |
title_short |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh |
title_full |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh |
title_fullStr |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh |
title_full_unstemmed |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh |
title_sort |
Evaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y Reh |
dc.creator.fl_str_mv |
García Ortiz, Jimmy Alejandro |
dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv |
Quijano Gómez, Sandra Quijano Rodríguez Pardo, Viviana Marcela Arévalo Olaya, Cindy Mayerli |
dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
García Ortiz, Jimmy Alejandro |
dc.contributor.evaluator.none.fl_str_mv |
Aristizábal Pachón, Andrés Felipe Patiño Escobar, Orlando Bonell |
dc.subject.spa.fl_str_mv |
Cáncer Leucemia ROS Viabilidad celular Proliferación K562 Reh |
topic |
Cáncer Leucemia ROS Viabilidad celular Proliferación K562 Reh Cancer Leukemia ROS Cell viability Proliferation K562 Reh Bacteriología - Tesis y disertaciones académicas Cáncer - Tratamiento Células tumorales Radicales libres Leucemia aguda |
dc.subject.keyword.spa.fl_str_mv |
Cancer Leukemia ROS Cell viability Proliferation K562 Reh |
dc.subject.armarc.spa.fl_str_mv |
Bacteriología - Tesis y disertaciones académicas Cáncer - Tratamiento Células tumorales Radicales libres Leucemia aguda |
description |
Estudios previos han demostrado que los extractos P2Et (proveniente de Caesalpinia spinosa) y supercrítico SC (proveniente de Petiveria alliacea) presentan actividad anti-tumoral a través de distintos mecanismos biológicos, que pueden incluir la modulación de los niveles intracelulares de especies reactivas de oxígeno en modelos de cáncer de mama, melanoma y leucemia. Se desconoce el impacto de esta modulación en la viabilidad celular en leucemias agudas. En el presente trabajo se evaluó el efecto de estos extractos, solos y en combinación con agentes quimioterapéuticos convencionales, en los niveles de expresión de especies reactivas de oxígeno (ROS) y en la proliferación celular, en dos líneas celulares derivadas de leucemia mieloide aguda (K562) y leucemia linfoide aguda (Reh). Las líneas celulares leucémicas K562 y Reh fueron cultivadas y posteriormente se expusieron a los extractos solos y en combinación con agentes quimioterapéuticos convencionales durante 12h. Se marcaron las células con la sonda fluorescente H2DCFDA y se adquirieron en el citómetro FACS ARIA II BDB. Se determinó paralelamente la viabilidad celular mediante tinción con azul tripán. En la línea celular K562 los extractos P2Et y SC ejercieron un efecto antioxidante con disminución significativa de ROS en comparación con los niveles basales. Adicionalmente, cuando se emplean en combinación con los agentes quimioterapéuticos idarrubicina y citarabina revierten la capacidad pro-oxidante de estos fármacos encontrándose una modulación negativa de los niveles de ROS. Esta disminución en los niveles de ROS se vio acompañada de una disminución en los conteos celulares (número de células/mL). De manera similar, en la línea celular Reh los extractos P2Et y SC también ejercieron un efecto antioxidante pero únicamente en comparación con los niveles basales de ROS, sin modular estos niveles en combinación con los quimioterapéuticos metrotexato, vincristina y doxorrubicina. Así se concluyó que los extractos P2Et y SC modulan negativamente los niveles de ROS en las dos líneas celulares de leucemia mieloide y leucemia linfoide aguda evaluadas, con un efecto en la disminución del número de células leucémicas en el caso del extracto P2Et. Esto puede indicar que el uso de este extracto solo o en combinación con la quimioterapia convencional favorece una menor carga tumoral asociada a una cantidad significativamente menor de ROS intracelulares. |
publishDate |
2022 |
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2022-06-22T19:26:36Z |
dc.date.available.none.fl_str_mv |
2022-06-22T19:26:36Z |
dc.date.created.none.fl_str_mv |
2022-06-03 |
dc.type.local.spa.fl_str_mv |
Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado |
dc.type.coar.none.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
dc.type.driver.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
http://hdl.handle.net/10554/60390 |
dc.identifier.instname.spa.fl_str_mv |
instname:Pontificia Universidad Javeriana |
dc.identifier.reponame.spa.fl_str_mv |
reponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana |
dc.identifier.repourl.spa.fl_str_mv |
repourl:https://repository.javeriana.edu.co |
url |
http://hdl.handle.net/10554/60390 |
identifier_str_mv |
instname:Pontificia Universidad Javeriana reponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana repourl:https://repository.javeriana.edu.co |
dc.language.iso.spa.fl_str_mv |
spa |
language |
spa |
dc.rights.licence.*.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional |
dc.rights.uri.*.fl_str_mv |
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
dc.rights.accessrights.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
dc.rights.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
rights_invalid_str_mv |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.spa.fl_str_mv |
PDF |
dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.publisher.spa.fl_str_mv |
Pontificia Universidad Javeriana |
dc.publisher.program.spa.fl_str_mv |
Bacteriología |
dc.publisher.faculty.spa.fl_str_mv |
Facultad de Ciencias |
institution |
Pontificia Universidad Javeriana |
bitstream.url.fl_str_mv |
http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/1/Trabajo%20de%20grado.pdf http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/2/Carta%20de%20autorizaci%c3%b3n%20autores.pdf http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/3/Carta%20aprobaci%c3%b3n%20directores.pdf http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/4/license.txt http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/5/Trabajo%20de%20grado.pdf.jpg http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/6/Carta%20de%20autorizaci%c3%b3n%20autores.pdf.jpg http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/7/Carta%20aprobaci%c3%b3n%20directores.pdf.jpg |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
0227a46a1c636999136b14595b7294a1 487f6ba40ae851d6cb5c271eb0cb3f5c f25b822b2ce00815080a6f37b3338196 2070d280cc89439d983d9eee1b17df53 2e92e021b22691b6616b7d06118695ae 671e0ce222cc98fef24b6b557d7ae01e f32047e0d5c71107afa05f2872d6567c |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana |
repository.mail.fl_str_mv |
repositorio@javeriana.edu.co |
_version_ |
1811670686659248128 |
spelling |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, "Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores", los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Quijano Gómez, Sandra QuijanoRodríguez Pardo, Viviana MarcelaArévalo Olaya, Cindy MayerliGarcía Ortiz, Jimmy AlejandroAristizábal Pachón, Andrés FelipePatiño Escobar, Orlando Bonell2022-06-22T19:26:36Z2022-06-22T19:26:36Z2022-06-03http://hdl.handle.net/10554/60390instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coEstudios previos han demostrado que los extractos P2Et (proveniente de Caesalpinia spinosa) y supercrítico SC (proveniente de Petiveria alliacea) presentan actividad anti-tumoral a través de distintos mecanismos biológicos, que pueden incluir la modulación de los niveles intracelulares de especies reactivas de oxígeno en modelos de cáncer de mama, melanoma y leucemia. Se desconoce el impacto de esta modulación en la viabilidad celular en leucemias agudas. En el presente trabajo se evaluó el efecto de estos extractos, solos y en combinación con agentes quimioterapéuticos convencionales, en los niveles de expresión de especies reactivas de oxígeno (ROS) y en la proliferación celular, en dos líneas celulares derivadas de leucemia mieloide aguda (K562) y leucemia linfoide aguda (Reh). Las líneas celulares leucémicas K562 y Reh fueron cultivadas y posteriormente se expusieron a los extractos solos y en combinación con agentes quimioterapéuticos convencionales durante 12h. Se marcaron las células con la sonda fluorescente H2DCFDA y se adquirieron en el citómetro FACS ARIA II BDB. Se determinó paralelamente la viabilidad celular mediante tinción con azul tripán. En la línea celular K562 los extractos P2Et y SC ejercieron un efecto antioxidante con disminución significativa de ROS en comparación con los niveles basales. Adicionalmente, cuando se emplean en combinación con los agentes quimioterapéuticos idarrubicina y citarabina revierten la capacidad pro-oxidante de estos fármacos encontrándose una modulación negativa de los niveles de ROS. Esta disminución en los niveles de ROS se vio acompañada de una disminución en los conteos celulares (número de células/mL). De manera similar, en la línea celular Reh los extractos P2Et y SC también ejercieron un efecto antioxidante pero únicamente en comparación con los niveles basales de ROS, sin modular estos niveles en combinación con los quimioterapéuticos metrotexato, vincristina y doxorrubicina. Así se concluyó que los extractos P2Et y SC modulan negativamente los niveles de ROS en las dos líneas celulares de leucemia mieloide y leucemia linfoide aguda evaluadas, con un efecto en la disminución del número de células leucémicas en el caso del extracto P2Et. Esto puede indicar que el uso de este extracto solo o en combinación con la quimioterapia convencional favorece una menor carga tumoral asociada a una cantidad significativamente menor de ROS intracelulares.Previous studies have shown that P2Et (from Caesalpinia spinosa) and supercrítico (SC) (from Petiveria alliacea) extracts exhibit anti-tumor activity through different biological mechanisms, which may include modulation of intracellular levels of reactive oxygen species in models of breast cancer, melanoma and leukemia. The impact of this modulation on cell viability in acute leukemia is unknown. In the present work, the effect of these extracts, alone and in combination with conventional chemotherapeutic agents, on the expression levels of reactive oxygen species (ROS) and on cell proliferation, in two cell lines derived from acute myeloid leukemia (K562) and acute lymphoid leukemia (Reh). The K562 and Reh leukemic cell lines were cultured and subsequently exposed to the extracts alone and in combination with conventional chemotherapeutic agents for 12h. Cells were labeled with the fluorescent indicator H2DCFDA and acquired on the FACS ARIA II BDB cytometer. Cell viability was determined in parallel by trypan blue staining. In the K562 cell line, the P2Et and SC extracts exerted an antioxidant effect with a significant decrease in ROS compared to basal levels. Additionally, when used in combination with the chemotherapeutic agents idarubicin and cytarabine, they reverse the pro-oxidant capacity of these drugs, finding a negative modulation of ROS levels. This decrease in ROS levels was accompanied by a decrease in cell counts (number of cells/mL). Similarly, in the Reh cell line, the P2Et and SC extracts also exerted an antioxidant effect but only in comparison with the basal levels of ROS, without modulating these levels in combination with the chemotherapeutic drugs methotrexate, vincristine and doxorubicin. In this way, it was concluded that the P2Et and SC extracts negatively modulate ROS levels in the two cell lines of myeloid leukemia and acute lymphoid leukemia evaluated, with an effect on the decrease in the number of leukemic cells in the case of the P2Et extract. This may indicate that the use of this extract alone or in combination with conventional chemotherapy favors a lower tumor burden associated with a significantly lower amount of intracellular ROS.Bacteriólogo (a)PregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaBacteriologíaFacultad de CienciasCáncerLeucemiaROSViabilidad celularProliferaciónK562RehCancerLeukemiaROSCell viabilityProliferationK562RehBacteriología - Tesis y disertaciones académicasCáncer - TratamientoCélulas tumoralesRadicales libresLeucemia agudaEvaluación del efecto de los extractos SC (Petiveria alliacea) y P2Et (Caesalpinia spinosa) sobre los niveles de especies reactivas de oxígeno en las líneas celulares leucémicas K562 y RehEvaluation of the effect of SC (Petiveria alliacea) and P2Et (Caesalpinia spinosa) extracts on the levels of reactive oxygen species in the leukemic cell lines K562 and RehTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisORIGINALTrabajo de grado.pdfTrabajo de grado.pdfDocumentoapplication/pdf956328http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/1/Trabajo%20de%20grado.pdf0227a46a1c636999136b14595b7294a1MD51open accessCarta de autorización autores.pdfCarta de autorización autores.pdfLicencia de usoapplication/pdf153771http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/2/Carta%20de%20autorizaci%c3%b3n%20autores.pdf487f6ba40ae851d6cb5c271eb0cb3f5cMD52metadata only accessCarta aprobación directores.pdfCarta aprobación directores.pdfCarta probación directoresapplication/pdf741234http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/3/Carta%20aprobaci%c3%b3n%20directores.pdff25b822b2ce00815080a6f37b3338196MD53metadata only accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82603http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/4/license.txt2070d280cc89439d983d9eee1b17df53MD54open accessTHUMBNAILTrabajo de grado.pdf.jpgTrabajo de grado.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg6019http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/5/Trabajo%20de%20grado.pdf.jpg2e92e021b22691b6616b7d06118695aeMD55open accessCarta de autorización autores.pdf.jpgCarta de autorización autores.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg6799http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/6/Carta%20de%20autorizaci%c3%b3n%20autores.pdf.jpg671e0ce222cc98fef24b6b557d7ae01eMD56open accessCarta aprobación directores.pdf.jpgCarta aprobación directores.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg6919http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/60390/7/Carta%20aprobaci%c3%b3n%20directores.pdf.jpgf32047e0d5c71107afa05f2872d6567cMD57open access10554/60390oai:repository.javeriana.edu.co:10554/603902022-06-23 03:05:40.044Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.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 |