Uso de vectores lentivirales para mediar la transfección del gen de la enzima n-acetil-galactosamina -6-sulfato-sulfatasa en células en cultivo
La enfermedad de Morquio A (MPS IVA) es un desorden autosómico recesivo producido por la alteración en la actividad de la enzima N-acetilgalactosamina-6-sulfato sulfatasa (GALNS), llevando a la acumulación intralisosomal de los glicosaminoglicanos (GAGs) queratán sulfato y condroitín 6 sulfato, prin...
- Autores:
-
Herrera Mejía, María Juliana
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2012
- Institución:
- Pontificia Universidad Javeriana
- Repositorio:
- Repositorio Universidad Javeriana
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.javeriana.edu.co:10554/11812
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/10554/11812
- Palabra clave:
- Mucopolisacaridosis IV
Terapia de gen
Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas
- Rights
- openAccess
- License
- Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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La enfermedad de Morquio A (MPS IVA) es un desorden autosómico recesivo producido por la alteración en la actividad de la enzima N-acetilgalactosamina-6-sulfato sulfatasa (GALNS), llevando a la acumulación intralisosomal de los glicosaminoglicanos (GAGs) queratán sulfato y condroitín 6 sulfato, principalmente en cartílago y córnea. Actualmente no existe un tratamiento específico para los pacientes con MPS IV A, por lo cual es importante evaluar diferentes estrategias para el desarrollo de una terapia segura y efectiva para estos pacientes. En el presente trabajo se evaluó la efectividad en la entrega del material genético por parte de vectores lentivirales y adenoasociados (AAV) en células HEK293. Los resultados mostraron que los vectores lentivirales, produjeron un aumento en la actividad enzimática de hasta 3,1 veces más en los lisados celulares y 5,2 veces en los medios de cultivo con respecto a los valores del control negativo, lo que los hace buenos candidatos para terapia génica en Moquio A. Por otra parte, los vectores AAV mostraron un aumento en la actividad hasta 2,1 veces más tanto en el lisado celular como en el medio. En presencia de SUMF1 la actividad alcanzó fue 1,9 y 44,5 veces más alto en el lisado celular y el medio de cultivo en comparación con el control negativo. Este es el primer ensayo in vitro para MPS IVA en el que se pone en evidencia la posibilidad de hacer uso de vectores lentivirales para el desarrollo de una estrategia de terapia génica para esta enfermedad. |
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Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Alméciga-Díaz, Carlos JavierHerrera Mejía, María Juliana2015-01-17T21:22:17Z2016-03-29T14:24:23Z2020-04-15T20:13:23Z2015-01-17T21:22:17Z2016-03-29T14:24:23Z2020-04-15T20:13:23Z2012http://hdl.handle.net/10554/11812instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coLa enfermedad de Morquio A (MPS IVA) es un desorden autosómico recesivo producido por la alteración en la actividad de la enzima N-acetilgalactosamina-6-sulfato sulfatasa (GALNS), llevando a la acumulación intralisosomal de los glicosaminoglicanos (GAGs) queratán sulfato y condroitín 6 sulfato, principalmente en cartílago y córnea. Actualmente no existe un tratamiento específico para los pacientes con MPS IV A, por lo cual es importante evaluar diferentes estrategias para el desarrollo de una terapia segura y efectiva para estos pacientes. En el presente trabajo se evaluó la efectividad en la entrega del material genético por parte de vectores lentivirales y adenoasociados (AAV) en células HEK293. Los resultados mostraron que los vectores lentivirales, produjeron un aumento en la actividad enzimática de hasta 3,1 veces más en los lisados celulares y 5,2 veces en los medios de cultivo con respecto a los valores del control negativo, lo que los hace buenos candidatos para terapia génica en Moquio A. Por otra parte, los vectores AAV mostraron un aumento en la actividad hasta 2,1 veces más tanto en el lisado celular como en el medio. En presencia de SUMF1 la actividad alcanzó fue 1,9 y 44,5 veces más alto en el lisado celular y el medio de cultivo en comparación con el control negativo. Este es el primer ensayo in vitro para MPS IVA en el que se pone en evidencia la posibilidad de hacer uso de vectores lentivirales para el desarrollo de una estrategia de terapia génica para esta enfermedad.Morquio A disease (MPS IV A) is an autosomal recessive disorder caused by the deficiency of N-acetyl-galactosamine-6-sulfate sulfatase (GALNS) enzyme, leading to accumulation of keratan sulfate and chondroitin-6-sulfate mainly in bone and cornea. Currently no effective therapies exist for MPS IVA, for which is important to evaluate different strategies for the development of a safe and effective therapy for MPS IV A patients. In the present study we evaluated the effectiveness of lentiviral vector to mediate the delivery of GALNS gene to cultured cells, in comparison with an adenoassociated virus (AAV) derived-vector. The results showed that the lentivirals vectors produced a 3.1- and 5.2-fold increase in enzyme activity cell lysate and culture medium, respectively, than that observed in nontransfected cells. On the other hand, the AAV vectors showed an increase in the activity up to of 2.1 times in both cell and culture medium. Furthermore in presence of SUMF1 gene the activity reached up to 1,9 in cell lysate and 44,5 times more in culture medium than that observed in nontransfected cells. This is the first in vitro assay for MPS IVA, which demonstrates the feasibility of using lentiviral vectors to develop a gene therapy strategy for MPS IV A.Microbiólogo (a) IndustrialPregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaMicrobiología IndustrialFacultad de CienciasUso de vectores lentivirales para mediar la transfección del gen de la enzima n-acetil-galactosamina -6-sulfato-sulfatasa en células en cultivoTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisMucopolisacaridosis IVTerapia de genMicrobiología industrial - Tesis y disertaciones académicasORIGINALHerreraMejiaMariaJuliana2012.pdfapplication/pdf1479945http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/11812/1/HerreraMejiaMariaJuliana2012.pdf0886c624f815b855a07d4ad8bf084093MD51open accessTHUMBNAILHerreraMejiaMariaJuliana2012.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3106http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/11812/2/HerreraMejiaMariaJuliana2012.pdf.jpg1478606554ecd7fc12453de56e8c2589MD52open access10554/11812oai:repository.javeriana.edu.co:10554/118122022-05-03 13:33:05.931Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.co |