Generación de tres modelos celulares deficientes de la enzima NAGLU para la mucopolisacaridosis IIIB a través del sistema CRISPR/Cas9

La mucopolisacaridosis IIIB (MPS IIIB) es un error innato del metabolismo causado por mutaciones en el gen NAGLU. Estas mutaciones producen una acumulación de heparán sulfato (HS) en el lisosoma y en la membrana celular, lo que genera apoptosis, daños en tejidos y disfunción orgánica. La MPS IIIB es principalmente neurodegenerativa por lo que el estudio de los defectos fisiológicos a nivel celular se centra en el sistema nervioso central (SNC). Sin embargo, se desconocen los efectos de esta en los astrocitos y el cómo estos afectan la dinámica con las demás células asociadas. Por lo que se generaron modelos en células HEK 293FT, SH-SY5Y y U-87MG, haciendo uso de CRISPR/Cas9 para generar un knockout dirigido al gen NAGLU. Se obtuvo un vector con un gRNA dirigido al exón 1 del gen, el cual generó una reducción en la actividad enzimática de más del 40% de NAGLU como una confirmación inicial de los modelos, lo que posteriormente permitirá el estudio de los efectos fisiológicos de la enfermedad.

• Autores: Niño Traslaviña, Katherin Dayana
• Tipo de recurso: Trabajo de grado de pregrado
• Fecha de publicación: 2023
• Institución: Pontificia Universidad Javeriana
• Repositorio: Repositorio Universidad Javeriana
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repository.javeriana.edu.co:10554/64734
• Acceso en línea: http://hdl.handle.net/10554/64734
• Palabra clave: MPS IIIB; NAGLU; CRISPR/Cas9; knockout; U-87MG; SH-SY5Y; MPS IIIB; NAGLU; CRISPR/Cas9; knockout; U-87MG; SH-SY5Y; Biología - Tesis y disertaciones académicas; Mucopolisacaridosis; Enzimas; Astrocitos
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