Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional
Helicobacter pylori es una bacteria asociada con cáncer gástrico. En Colombia, se ha reportado una prevalencia de infección entre el 70% y el 80%, sin embargo, el desarrollo de cáncer gástrico es una enfermedad multifactorial y se ha demostrado que los factores de virulencia bacterianos como babA, c...
- Autores:
-
Stepanian Rozo, Johanna
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2020
- Institución:
- Pontificia Universidad Javeriana
- Repositorio:
- Repositorio Universidad Javeriana
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.javeriana.edu.co:10554/52018
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/10554/52018
- Palabra clave:
- Helicobacter pylori
Factores de virulencia
Resistencia antibiótica
Estructura poblacional
Helicobacter pylori
Virulence factors
Antibiotic resistance
Population structure
Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas
Helicobacter pylori
Virulencia (Microbiología)
Antibióticos
- Rights
- openAccess
- License
- Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
id |
JAVERIANA2_7b42bf067e412cc27eb07ca51a950f53 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/52018 |
network_acronym_str |
JAVERIANA2 |
network_name_str |
Repositorio Universidad Javeriana |
repository_id_str |
|
dc.title.spa.fl_str_mv |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional |
dc.title.english.spa.fl_str_mv |
Comparative genomic analysis in Colombian Helicobacter pylori isolates : approach to virulence, antibiotic resistance and population structure |
title |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional |
spellingShingle |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional Helicobacter pylori Factores de virulencia Resistencia antibiótica Estructura poblacional Helicobacter pylori Virulence factors Antibiotic resistance Population structure Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas Helicobacter pylori Virulencia (Microbiología) Antibióticos |
title_short |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional |
title_full |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional |
title_fullStr |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional |
title_full_unstemmed |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional |
title_sort |
Análisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacional |
dc.creator.fl_str_mv |
Stepanian Rozo, Johanna |
dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv |
Trespalacios Rangel, Alba Alicia Muñoz Delgado, Angela Muñoz |
dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
Stepanian Rozo, Johanna |
dc.contributor.evaluator.none.fl_str_mv |
González Santos, Janneth |
dc.contributor.corporatename.none.fl_str_mv |
Pontificia Universidad Javeriana |
dc.subject.spa.fl_str_mv |
Helicobacter pylori Factores de virulencia Resistencia antibiótica Estructura poblacional |
topic |
Helicobacter pylori Factores de virulencia Resistencia antibiótica Estructura poblacional Helicobacter pylori Virulence factors Antibiotic resistance Population structure Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas Helicobacter pylori Virulencia (Microbiología) Antibióticos |
dc.subject.keyword.spa.fl_str_mv |
Helicobacter pylori Virulence factors Antibiotic resistance Population structure |
dc.subject.armarc.spa.fl_str_mv |
Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas Helicobacter pylori Virulencia (Microbiología) Antibióticos |
description |
Helicobacter pylori es una bacteria asociada con cáncer gástrico. En Colombia, se ha reportado una prevalencia de infección entre el 70% y el 80%, sin embargo, el desarrollo de cáncer gástrico es una enfermedad multifactorial y se ha demostrado que los factores de virulencia bacterianos como babA, cagA, vacA, entre otros, influyen en el desarrollo de las patologías. Por otro lado, se ha demostrado que existe una relación directa entre la eliminación de la infección y la reducción de tumores premalignos, no obstante, las tasas de resistencia antibiótica han imposibilitado la erradicación de este microorganismo. Adicionalmente, los estudios realizados sobre este microorganismo han evidenciado procesos co-evolutivos entre la bacteria y las poblaciones humanas, y en Colombia se ha reportado la presencia de una nueva subpoblación producto de la rápida evolución bacteriana. Este trabajo caracterizó mediante estrategias de genómica comparativa aislamientos colombianos de Helicobacter pylori realizando un enfoque a la estructura poblacional, los factores de virulencia y los genes asociados a la resistencia antibiótica. Para ello se realizó el análisis de 100 genomas colombianos, 30 previamente obtenidos y secuenciados por el grupo de investigación y 70 obtenidos de bases de datos públicas. El análisis de estructura poblacional se llevó a cabo mediante SNPs y MLST, los resultados permitieron evidenciar la presencia de dos grupos clonales formados exclusivamente por aislamientos colombianos, los cuales mostraron tener raíces principalmente en la población hpEurope. Este hallazgo, comprueba la microevolución de este microorganismo en Colombia. Al analizar la virulencia bacteriana se encontró una gran diversidad de combinaciones alélicas de los factores estudiados (cagA, vacA y babA), siendo la más frecuente vacAs1bi1m1 / babA2 / iceA 2 / cagA positivo (EPIYA-ABC) encontrado en un 9% de los aislamientos analizados. Para entender mejor los genotipos de resistencia bacteriana circulantes en el país, se analizaron las mutaciones, inserciones, secuencias de parada y cambios en el marco de lectura de genes asociados con resistencia a claritromicina (CLA), tetraciclina (TRC), levofloxacina (LVX), amoxicilina (AMX) y metronidazol (MTZ). Se encontró una frecuencia de las mutaciones asociads a resistencia de CLA del 4% (mutaciones 23s A2142G y 23s A2143G), de TRC del 4% (mutación 16s A926G), de LVX del 10% (mutaciones encontradas en gyrA y gyrB), de AMX del 7% (mutaciones asociadas a pbp3) y de MTZ del 73,25%. Adicionalmente, se destaca la presencia de un aislamiento multirresistente con mutaciones asociadas a resistencia de todos los antibióticos evaluados. Se analizaron posibles relaciones entre los 3 parámetros analizados para las cepas estudiadas, sin embargo, no se encontró ninguna relación evidente entre la presencia de algún genotipo de virulencia asociado a las poblaciones y se encontraron aislamientos resistentes en todos los grupos poblacionales. Este es el primer reporte sobre aislamientos colombianos en analizar los tres parámetros mencionados y se presenta un aporte en el conocimiento de esta bacteria en el país. |
publishDate |
2020 |
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2020-12-14T04:21:33Z |
dc.date.available.none.fl_str_mv |
2020-12-14T04:21:33Z |
dc.date.created.none.fl_str_mv |
2020-12-09 |
dc.type.local.spa.fl_str_mv |
Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado |
dc.type.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
dc.type.driver.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
http://hdl.handle.net/10554/52018 |
dc.identifier.instname.spa.fl_str_mv |
instname:Pontificia Universidad Javeriana |
dc.identifier.reponame.spa.fl_str_mv |
reponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana |
dc.identifier.repourl.spa.fl_str_mv |
repourl:https://repository.javeriana.edu.co |
url |
http://hdl.handle.net/10554/52018 |
identifier_str_mv |
instname:Pontificia Universidad Javeriana reponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana repourl:https://repository.javeriana.edu.co |
dc.language.iso.spa.fl_str_mv |
spa |
language |
spa |
dc.rights.licence.*.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional |
dc.rights.uri.*.fl_str_mv |
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
dc.rights.accessrights.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
dc.rights.coar.spa.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
rights_invalid_str_mv |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.spa.fl_str_mv |
PDF |
dc.format.mimetype.spa.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.coverage.spatial.spa.fl_str_mv |
Colombia |
dc.coverage.temporal.none.fl_str_mv |
2000-2020 |
dc.publisher.spa.fl_str_mv |
Pontificia Universidad Javeriana |
dc.publisher.program.spa.fl_str_mv |
Microbiología Industrial |
dc.publisher.faculty.spa.fl_str_mv |
Facultad de Ciencias |
institution |
Pontificia Universidad Javeriana |
bitstream.url.fl_str_mv |
http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/5/license.txt http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/1/Johanna%20Stepanian%20TG.pdf http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/4/Anexo%204.xlsx http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/2/Cartadeautorizacion.pdf http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/3/Carta%20Directores%20JSR.pdf http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/6/Johanna%20Stepanian%20TG.pdf.jpg http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/7/Cartadeautorizacion.pdf.jpg http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/8/Carta%20Directores%20JSR.pdf.jpg |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
2070d280cc89439d983d9eee1b17df53 40f8eaed8e2c61671a75e13d05e0b66f dde3b6193f80082264753bf4da91d957 443f54732baeba7a2c6c244af12f0d94 743238383b3c7e370d20c0a8850a7f06 a1309d7e24f4367d9a16eee9c08967b6 4eefb6b3ca86ab52a6e4c579dcd5e8cb 4bd620f7084adab0139d5bc3318406cb |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana |
repository.mail.fl_str_mv |
repositorio@javeriana.edu.co |
_version_ |
1814337602325577728 |
spelling |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, "Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores", los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Trespalacios Rangel, Alba AliciaMuñoz Delgado, Angela MuñozStepanian Rozo, JohannaGonzález Santos, JannethPontificia Universidad JaverianaColombia2000-20202020-12-14T04:21:33Z2020-12-14T04:21:33Z2020-12-09http://hdl.handle.net/10554/52018instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coHelicobacter pylori es una bacteria asociada con cáncer gástrico. En Colombia, se ha reportado una prevalencia de infección entre el 70% y el 80%, sin embargo, el desarrollo de cáncer gástrico es una enfermedad multifactorial y se ha demostrado que los factores de virulencia bacterianos como babA, cagA, vacA, entre otros, influyen en el desarrollo de las patologías. Por otro lado, se ha demostrado que existe una relación directa entre la eliminación de la infección y la reducción de tumores premalignos, no obstante, las tasas de resistencia antibiótica han imposibilitado la erradicación de este microorganismo. Adicionalmente, los estudios realizados sobre este microorganismo han evidenciado procesos co-evolutivos entre la bacteria y las poblaciones humanas, y en Colombia se ha reportado la presencia de una nueva subpoblación producto de la rápida evolución bacteriana. Este trabajo caracterizó mediante estrategias de genómica comparativa aislamientos colombianos de Helicobacter pylori realizando un enfoque a la estructura poblacional, los factores de virulencia y los genes asociados a la resistencia antibiótica. Para ello se realizó el análisis de 100 genomas colombianos, 30 previamente obtenidos y secuenciados por el grupo de investigación y 70 obtenidos de bases de datos públicas. El análisis de estructura poblacional se llevó a cabo mediante SNPs y MLST, los resultados permitieron evidenciar la presencia de dos grupos clonales formados exclusivamente por aislamientos colombianos, los cuales mostraron tener raíces principalmente en la población hpEurope. Este hallazgo, comprueba la microevolución de este microorganismo en Colombia. Al analizar la virulencia bacteriana se encontró una gran diversidad de combinaciones alélicas de los factores estudiados (cagA, vacA y babA), siendo la más frecuente vacAs1bi1m1 / babA2 / iceA 2 / cagA positivo (EPIYA-ABC) encontrado en un 9% de los aislamientos analizados. Para entender mejor los genotipos de resistencia bacteriana circulantes en el país, se analizaron las mutaciones, inserciones, secuencias de parada y cambios en el marco de lectura de genes asociados con resistencia a claritromicina (CLA), tetraciclina (TRC), levofloxacina (LVX), amoxicilina (AMX) y metronidazol (MTZ). Se encontró una frecuencia de las mutaciones asociads a resistencia de CLA del 4% (mutaciones 23s A2142G y 23s A2143G), de TRC del 4% (mutación 16s A926G), de LVX del 10% (mutaciones encontradas en gyrA y gyrB), de AMX del 7% (mutaciones asociadas a pbp3) y de MTZ del 73,25%. Adicionalmente, se destaca la presencia de un aislamiento multirresistente con mutaciones asociadas a resistencia de todos los antibióticos evaluados. Se analizaron posibles relaciones entre los 3 parámetros analizados para las cepas estudiadas, sin embargo, no se encontró ninguna relación evidente entre la presencia de algún genotipo de virulencia asociado a las poblaciones y se encontraron aislamientos resistentes en todos los grupos poblacionales. Este es el primer reporte sobre aislamientos colombianos en analizar los tres parámetros mencionados y se presenta un aporte en el conocimiento de esta bacteria en el país.Helicobacter pylori is a bacterium associated with gastric cancer. The prevalence in Colombia has been reported between 70% and 80%, nevertheless, the development of this disease is multifactorial and it has been shown that virulence factors such as babA, cagA, vacA, among others have influence on the development of the gastric diseases. Furthermore, there is a direct association between the infection eradication and the premalignant tumors shrinkage, however, antibiotic resistance rates have made impossible the bacteria eradication. Additionally, previous studies with this bacterium showed a co-evolution between the human population and the bacterium that caused novel subpopulations as a result of the bacteria evolution. This work characterized through comparative genomic strategies Colombian Helicobacter pylori isolates with an approach on the structural population, virulence factors and genes associated with antibiotic resistance. The analysis was performed on 100 Colombian genomes, 30 of them were previously obtained and sequenced by the research group and the 70 remaining were obtained from public data bases. The population structure analysis was carried out by SNPs and MLST, the results showed the presence of two new clonal formed exclusively by Colombian isolates with European origin. This find proves the bacteria microevolution in Colombia. The bacteria virulence analysis displays a considerable diversity on the allelic combinations in the studied genes (cagA, vacA y babA), being the most frequent vacAs1bi1m1 / babA2 / iceA 2 / cagA positive (EPIYA-ABC) found in a 9% of the analyzed isolates. For the resistance genotypes analysis we analyzed mutations, insertions, stop sequences, changes in the open reading frame for the genes associated with resistance to clarithromycin (CLA), tetracycline (TRC), levofloxacin (LVX), amoxicillin (AMX) y metronidazole (MTZ). It was found a frequency on the mutations associated with CLA of 4% (mutations 23s A2142G y 23s A2143G), TRC of 4% (mutation 16s A926G), LVX of 10% (mutations in gyrA y gyrB), AMX of 7% (mutations associated to pbp3 protein) and MTZ of 73, 25%. Additionally, this study highlights the presence of a multiresistant isolate with mutations associated with resistance for all the evaluated antibiotics. We analyzed a possible association between the 3 parameters for the isolates studied, however, it was no any evident relation between the presence of any virulence genotype associated with population, founding resistant isolates in all population groups. This is the first report over Colombian isolates that analyses the 3 mention parameters giving a knowledge for this bacteria in the county.Microbiólogo (a) IndustrialPregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaMicrobiología IndustrialFacultad de CienciasHelicobacter pyloriFactores de virulenciaResistencia antibióticaEstructura poblacionalHelicobacter pyloriVirulence factorsAntibiotic resistancePopulation structureMicrobiología industrial - Tesis y disertaciones académicasHelicobacter pyloriVirulencia (Microbiología)AntibióticosAnálisis de genómica comparativa en aislamientos colombianos de Helicobacter pylori : enfoque asociado a virulencia, resistencia antibiótica y estructura poblacionalComparative genomic analysis in Colombian Helicobacter pylori isolates : approach to virulence, antibiotic resistance and population structureTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82603http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/5/license.txt2070d280cc89439d983d9eee1b17df53MD55open accessORIGINALJohanna Stepanian TG.pdfJohanna Stepanian TG.pdfDocumentoapplication/pdf3167996http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/1/Johanna%20Stepanian%20TG.pdf40f8eaed8e2c61671a75e13d05e0b66fMD51open accessAnexo 4.xlsxAnexo 4.xlsxAnexo 4application/vnd.openxmlformats-officedocument.spreadsheetml.sheet21161http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/4/Anexo%204.xlsxdde3b6193f80082264753bf4da91d957MD54open accessCartadeautorizacion.pdfCartadeautorizacion.pdfLicencia de usoapplication/pdf552928http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/2/Cartadeautorizacion.pdf443f54732baeba7a2c6c244af12f0d94MD52metadata only accessCarta Directores JSR.pdfCarta Directores JSR.pdfCarta aprobación directoresapplication/pdf219818http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/3/Carta%20Directores%20JSR.pdf743238383b3c7e370d20c0a8850a7f06MD53metadata only accessTHUMBNAILJohanna Stepanian TG.pdf.jpgJohanna Stepanian TG.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5880http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/6/Johanna%20Stepanian%20TG.pdf.jpga1309d7e24f4367d9a16eee9c08967b6MD56open accessCartadeautorizacion.pdf.jpgCartadeautorizacion.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg7687http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/7/Cartadeautorizacion.pdf.jpg4eefb6b3ca86ab52a6e4c579dcd5e8cbMD57open accessCarta Directores JSR.pdf.jpgCarta Directores JSR.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg6747http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/52018/8/Carta%20Directores%20JSR.pdf.jpg4bd620f7084adab0139d5bc3318406cbMD58open access10554/52018oai:repository.javeriana.edu.co:10554/520182022-05-03 15:51:29.854Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.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 |