Utilidad de la citometría de flujo y del panel SST de EuroFlow para la evaluación de infiltración tumoral extra ganglionar en pacientes con linfomas B en el Hospital Universitario San Ignacio

En las últimas décadas, una de las herramientas más utilizadas para el diagnóstico, clasificación y seguimiento de enfermedades hematológicas es la Citometría de flujo multiparamétrica (CMF). Esta herramienta, tiene múltiples ventajas que incluyen su elevada sensibilidad, especificidad, rapidez, apl...

Full description

Autores:
Ladino Novoa, Lina Paola
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2019
Institución:
Pontificia Universidad Javeriana
Repositorio:
Repositorio Universidad Javeriana
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/43186
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/10554/43186
Palabra clave:
Citometría de flujo
Organización Mundial de la Salud (OMS)
Linfomas B
Flow cytometry
B lymphomas
World Health Organization (WHO)
Bacteriología - Tesis y disertaciones académicas
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Citometría de flujo
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description En las últimas décadas, una de las herramientas más utilizadas para el diagnóstico, clasificación y seguimiento de enfermedades hematológicas es la Citometría de flujo multiparamétrica (CMF). Esta herramienta, tiene múltiples ventajas que incluyen su elevada sensibilidad, especificidad, rapidez, aplicabilidad y reproducibilidad para la detección, clasificación y caracterización de linfomas de células B. Además, la CMF también se realiza con el fin de evaluar la efectividad del tratamiento y la evaluación de pacientes pre y post-trasplante de células madre hematopoyéticas. De forma particular la CMF ha permitido evaluar con gran precisión y sensibilidad la infiltración tumoral a distancia de distintas neoplasias incluyendo los linfomas de células B. Los linfomas son tumores de origen hematopoyético que se originan por la transformación neoplásica de linfocitos B maduros. Estos se originan principalmente en los ganglios linfáticos y dependiendo de sus características biológicas, algunos son más agresivos como los linfomas de célula grande y tienen mayor capacidad de invasión e infiltración tumoral extra-ganglionar a tejidos como la médula ósea, la sangre periférica, el bazo y el sistema nervioso central, entre otros. Otros linfomas menos agresivos también pueden adquirir esta ventaja de crecimiento y de invasión, dependiendo de sus perfiles genéticos y moleculares. Recientemente el Consorcio Europeo EuroFlow, desarrolló y estandarizó la detección de células tumorales de linfoma con aplicación a otros tumores hematopoyéticos y muestras reactivas, a través de un marcaje combinado en 8 fluorescencias distintas en un tubo denominado SST (Small Sample Tube), el cual, permite detectar con alta sensibilidad, la presencia de pequeñas o grandes clonas de células tumorales de linfomas B en muestras de LCR y humor vítreo, para el estudio de extensión de estas enfermedades. A partir del año 2008 en el área de Citometría de flujo de la Facultad de Ciencias de la Pontificia Universidad Javeriana se empezó a implementar el estudio de muestras especiales mediante CMF, posteriormente el servicio se trasladó al Hospital Universitario San Ignacio (HUSI) y en la actualidad se evalúan muestras variadas de líquidos corporales de pacientes con linfomas B. Desde el año 2017, se dio inicio a la implementación del panel SST de EuroFlow, lo cual ha representado un avance importante para el diagnóstico y seguimiento de los pacientes con linfoma. En el servicio de citometría de HUSI, el tubo SST ha sido utilizado no solo en muestras de LCR sino también en otras muestras de líquidos corporales. En el presente trabajo se documentan los resultados de CMF de la evaluación de infiltración tumoral en muestras especiales en pacientes con sospecha de linfoma o con diagnóstico confirmado de linfoma B. Esta información incluye tipos de muestras evaluadas, resultados de infiltración tumoral detectada por CMF y en algunos casos en comparación con los resultados de los estudios morfológicos, celularidad de las muestras y se documenta la capacidad de detección de pequeñas cantidades de células tumorales por CMF. Los hallazgos muestran claramente que esta herramienta diagnóstica es de gran utilidad, que de manera muy sensible permite detectar infiltración a distancia de estos tumores y por lo tanto estadificar la enfermedad. La implementación de SST para el estudio de linfomas ha permitido en el servicio de citometría de HUSI, avanzar mucho más en la realización de una citometría de mayor calidad, aplicando protocolos estandarizados desde la fase pre-analítica que aportan a la comunidad médica en la toma de decisiones terapéuticas y de seguimiento de estas patologías.
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spelling Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Quijano Gómez, Sandra MilenaPeñaloza Castañeda, NiyirethLadino Novoa, Lina PaolaDiez Ortega, HugoOrduz Rodriguez, Rocio2019-06-13T16:31:53Z2020-04-15T15:50:18Z2019-06-13T16:31:53Z2020-04-15T15:50:18Z2019-05-30http://hdl.handle.net/10554/43186instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coEn las últimas décadas, una de las herramientas más utilizadas para el diagnóstico, clasificación y seguimiento de enfermedades hematológicas es la Citometría de flujo multiparamétrica (CMF). Esta herramienta, tiene múltiples ventajas que incluyen su elevada sensibilidad, especificidad, rapidez, aplicabilidad y reproducibilidad para la detección, clasificación y caracterización de linfomas de células B. Además, la CMF también se realiza con el fin de evaluar la efectividad del tratamiento y la evaluación de pacientes pre y post-trasplante de células madre hematopoyéticas. De forma particular la CMF ha permitido evaluar con gran precisión y sensibilidad la infiltración tumoral a distancia de distintas neoplasias incluyendo los linfomas de células B. Los linfomas son tumores de origen hematopoyético que se originan por la transformación neoplásica de linfocitos B maduros. Estos se originan principalmente en los ganglios linfáticos y dependiendo de sus características biológicas, algunos son más agresivos como los linfomas de célula grande y tienen mayor capacidad de invasión e infiltración tumoral extra-ganglionar a tejidos como la médula ósea, la sangre periférica, el bazo y el sistema nervioso central, entre otros. Otros linfomas menos agresivos también pueden adquirir esta ventaja de crecimiento y de invasión, dependiendo de sus perfiles genéticos y moleculares. Recientemente el Consorcio Europeo EuroFlow, desarrolló y estandarizó la detección de células tumorales de linfoma con aplicación a otros tumores hematopoyéticos y muestras reactivas, a través de un marcaje combinado en 8 fluorescencias distintas en un tubo denominado SST (Small Sample Tube), el cual, permite detectar con alta sensibilidad, la presencia de pequeñas o grandes clonas de células tumorales de linfomas B en muestras de LCR y humor vítreo, para el estudio de extensión de estas enfermedades. A partir del año 2008 en el área de Citometría de flujo de la Facultad de Ciencias de la Pontificia Universidad Javeriana se empezó a implementar el estudio de muestras especiales mediante CMF, posteriormente el servicio se trasladó al Hospital Universitario San Ignacio (HUSI) y en la actualidad se evalúan muestras variadas de líquidos corporales de pacientes con linfomas B. Desde el año 2017, se dio inicio a la implementación del panel SST de EuroFlow, lo cual ha representado un avance importante para el diagnóstico y seguimiento de los pacientes con linfoma. En el servicio de citometría de HUSI, el tubo SST ha sido utilizado no solo en muestras de LCR sino también en otras muestras de líquidos corporales. En el presente trabajo se documentan los resultados de CMF de la evaluación de infiltración tumoral en muestras especiales en pacientes con sospecha de linfoma o con diagnóstico confirmado de linfoma B. Esta información incluye tipos de muestras evaluadas, resultados de infiltración tumoral detectada por CMF y en algunos casos en comparación con los resultados de los estudios morfológicos, celularidad de las muestras y se documenta la capacidad de detección de pequeñas cantidades de células tumorales por CMF. Los hallazgos muestran claramente que esta herramienta diagnóstica es de gran utilidad, que de manera muy sensible permite detectar infiltración a distancia de estos tumores y por lo tanto estadificar la enfermedad. La implementación de SST para el estudio de linfomas ha permitido en el servicio de citometría de HUSI, avanzar mucho más en la realización de una citometría de mayor calidad, aplicando protocolos estandarizados desde la fase pre-analítica que aportan a la comunidad médica en la toma de decisiones terapéuticas y de seguimiento de estas patologías.In recent decades, one of the most widely used tools for the diagnosis, classification and monitoring of hematological diseases is multiparametric flow cytometry (CMF). This tool has multiple advantages that include its high sensitivity, specificity, speed, applicability and reproducibility for the detection, classification and characterization of B-cell lymphomas. In addition, the CMF is also performed in order to evaluate the effectiveness of the treatment and the evaluation of patients pre- and post-transplant of hematopoietic stem cells. In particular, the CMF has made it possible to evaluate, with great precision and sensitivity, the remote tumor infiltration of different neoplasms, including B-cell lymphomas. Lymphomas are tumors of hematopoietic origin that originate from the neoplastic transformation of mature B lymphocytes. These originate mainly in lymph nodes and depending on their biological characteristics, some are more aggressive as large cell lymphomas and have greater capacity for invasion and extra-ganglionar tumor infiltration to tissues such as bone marrow, peripheral blood, spleen and the central nervous system, among others. Other less aggressive lymphomas can also acquire this advantage of growth and invasion, depending on their genetic and molecular profiles. Recently the EuroFlow European Consortium developed and standardized the detection of lymphoma tumor cells with application to other hematopoietic tumors and reactive samples, through a combined labeling in 8 different fluorescents in a tube called SST (Small Sample Tube), which, It allows to detect with high sensitivity, the presence of small or large clones of tumor cells of B lymphomas in CSF and vitreous samples, for the study of extension of these diseases. Since 2008, in the area of ​​flow cytometry of the Faculty of Sciences of the Pontificia Universidad Javeriana, the study of special samples was started using CMF, later the service was transferred to the University Hospital San Ignacio (HUSI) and in the Currently, several samples of body fluids are evaluated in patients with B-lymphomas. Since 2017, the implementation of the SFT panel of EuroFlow was initiated, which has represented an important advance in the diagnosis and monitoring of patients with lymphoma. In the HUSI cytometry service, the SST tube has been used not only in CSF samples but also in other body fluid samples. In this work we document the results of CMF of the evaluation of tumor infiltration in special samples in patients with suspected lymphoma or with a confirmed diagnosis of lymphoma B. This information includes types of samples evaluated, results of tumor infiltration detected by CMF and in some cases in comparison with the results of the morphological studies, cellularity of the samples and the ability to detect small amounts of tumor cells by CMF is documented. The findings clearly show that this diagnostic tool is very useful, which in a very sensitive way allows detecting distant infiltration of these tumors and therefore staging the disease. The implementation of SST for the study of lymphomas has allowed the HUSI cytometry service to advance much more in the realization of a higher quality cytometry, applying standardized protocols from the pre-analytical phase that they contribute to the medical community in the taking of therapeutic decisions and monitoring of these pathologies.Bacteriólogo (a)PregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaBacteriologíaFacultad de CienciasCitometría de flujoOrganización Mundial de la Salud (OMS)Linfomas BFlow cytometryB lymphomasWorld Health Organization (WHO)Bacteriología - Tesis y disertaciones académicasOrganización Mundial de la Salud (OMS)Citometría de flujoUtilidad de la citometría de flujo y del panel SST de EuroFlow para la evaluación de infiltración tumoral extra ganglionar en pacientes con linfomas B en el Hospital Universitario San IgnacioTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisTHUMBNAILTESIS Utilidad de la citometría de flujo y del panel SST de EuroFlow en HUSI.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg2975http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/43186/1/TESIS%20Utilidad%20de%20la%20citometr%c3%ada%20de%20flujo%20y%20del%20panel%20SST%20de%20EuroFlow%20en%20HUSI.pdf.jpg0acbab6d1bcb55d0cee766d49332b1c0MD51open accessCarta de Aprobación.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg4124http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/43186/2/Carta%20de%20Aprobaci%c3%b3n.pdf.jpg1b825e1ab8c59c89de4c40a584d9b6b9MD52open accessCarta de autorización de los autores.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg6360http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/43186/3/Carta%20de%20autorizaci%c3%b3n%20de%20los%20autores.pdf.jpg76571ef6cd54e66ac7a3b51a84b68cceMD53open accessLICENSElicense.txttext/plain2603http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/43186/4/license.txt2070d280cc89439d983d9eee1b17df53MD54open accessORIGINALTESIS Utilidad de la citometría de flujo y del panel SST de EuroFlow en HUSI.pdfapplication/pdf2818437http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/43186/5/TESIS%20Utilidad%20de%20la%20citometr%c3%ada%20de%20flujo%20y%20del%20panel%20SST%20de%20EuroFlow%20en%20HUSI.pdffcf5f92a39c7c2e902565a8064b83c37MD55open accessCarta de Aprobación.pdfapplication/pdf209087http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/43186/6/Carta%20de%20Aprobaci%c3%b3n.pdfbcb9248a326009fa7497d57e6a38c18aMD56metadata only accessCarta de autorización de los autores.pdfapplication/pdf806586http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/43186/7/Carta%20de%20autorizaci%c3%b3n%20de%20los%20autores.pdfb812c96f8fcd6c432b4ad9530a4231e6MD57metadata only access10554/43186oai:repository.javeriana.edu.co:10554/431862022-05-02 15:51:14.774Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.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