Síntesis y evaluación histológica de constructos tridimensionales que promueven la interacción de células mesenquimales con ectodermo oral embrionario de ratas Lewis para la obtención de tejidos semejantes a dientes

Con el propósito de lograr la formación de una estructura similar a un diente, se estratificaron células de ectodermo oral embrionario con células troncales de medula ósea (CTMO) dentro de una matriz de hidrogel sintético (PEGDA) que se implantó en mesenterio de machos adultos de ratas Lewis. Median...

Full description

Autores:
Jaramillo Gómez, Lorenza María
Tipo de recurso:
Doctoral thesis
Fecha de publicación:
2012
Institución:
Pontificia Universidad Javeriana
Repositorio:
Repositorio Universidad Javeriana
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/15429
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/10554/15429
https://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.15429
Palabra clave:
Odontogénesis
Diente
Formación dental
Doctorado en ciencias biológicas - Tesis y disertaciones académicas
Rights
openAccess
License
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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description Con el propósito de lograr la formación de una estructura similar a un diente, se estratificaron células de ectodermo oral embrionario con células troncales de medula ósea (CTMO) dentro de una matriz de hidrogel sintético (PEGDA) que se implantó en mesenterio de machos adultos de ratas Lewis. Mediante hibridización in situ de bloque completo, se evaluó la expresión de tres genes iniciadores putativos de la formación dental (Pitx2, Shh y Wnt10a), con lo cual se estableció que en ratas las señales iniciadoras de odontogénesis aparecen entre E12.5 y E13. El tejido ectodérmico embrionario se obtuvo por medio de cruces controlados de hembras a las que se les detectó el estro mediante impedanciometría. En E12.5 las hembras se sacrificaron y se extrajeron los embriones. Se disecó la porción mandibular del primer arco branquial bajo estereomicroscopio y el ectodermo se separó del mesénquima mediante disociación enzimática con una solución de tripsina y pancreatina. Las CTMO se extrajeron de los huesos largos de las extremidades posteriores de ratas mediante lavado con ?-MEM y se cultivaron en cajas de 25 cm2 hasta un segundo pasaje. Las CTMO fueron recombinadas con ectodermo embrionario competente (E12.5-E13) estratificándolas en un soporte tridimensional de PEGDA polimerizado con luz ultravioleta (365 nm) dentro de un molde piramidal de polipropileno (PP). Los constructos se cultivaron entre 48 y 72 horas en DMEM y posteriormente fueron implantados en el mesenterio de machos adultos (3 a 6 meses de edad) por un período de cuatro a seis semanas.
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spelling Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Briceño Balcazar, IgnacioJaramillo Gómez, Lorenza María2015-03-26T03:04:14Z2016-01-13T19:29:32Z2020-04-16T14:52:40Z2015-03-26T03:04:14Z2016-01-13T19:29:32Z2020-04-16T14:52:40Z2012http://hdl.handle.net/10554/15429https://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.15429instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coCon el propósito de lograr la formación de una estructura similar a un diente, se estratificaron células de ectodermo oral embrionario con células troncales de medula ósea (CTMO) dentro de una matriz de hidrogel sintético (PEGDA) que se implantó en mesenterio de machos adultos de ratas Lewis. Mediante hibridización in situ de bloque completo, se evaluó la expresión de tres genes iniciadores putativos de la formación dental (Pitx2, Shh y Wnt10a), con lo cual se estableció que en ratas las señales iniciadoras de odontogénesis aparecen entre E12.5 y E13. El tejido ectodérmico embrionario se obtuvo por medio de cruces controlados de hembras a las que se les detectó el estro mediante impedanciometría. En E12.5 las hembras se sacrificaron y se extrajeron los embriones. Se disecó la porción mandibular del primer arco branquial bajo estereomicroscopio y el ectodermo se separó del mesénquima mediante disociación enzimática con una solución de tripsina y pancreatina. Las CTMO se extrajeron de los huesos largos de las extremidades posteriores de ratas mediante lavado con ?-MEM y se cultivaron en cajas de 25 cm2 hasta un segundo pasaje. Las CTMO fueron recombinadas con ectodermo embrionario competente (E12.5-E13) estratificándolas en un soporte tridimensional de PEGDA polimerizado con luz ultravioleta (365 nm) dentro de un molde piramidal de polipropileno (PP). Los constructos se cultivaron entre 48 y 72 horas en DMEM y posteriormente fueron implantados en el mesenterio de machos adultos (3 a 6 meses de edad) por un período de cuatro a seis semanas.In order to obtain a tooth-like structure, embryonic oral ectoderm cells and bone marrow derived stem cells (BMSC) were stratified within a synthetic hydrogel matrix (PEGDA) and implanted in the mesentery of adult male Lewis rats. Whole mount in situ hybridization was used to evaluate the expression of Pitx2, Shh and Wnt10a signals indicative of tooth initiation. In rats, the three markers expressed were present in the oral ectoderm starting at E12.5 and E13, thus this embryonic stage was selected for cell harvesting. Embryos were obtained by controlled service of young female Lewis rats in which estrous was detected by impedance readings. E12.5 pregnant rats were sacrificed to collect embryos, of which mandibular primordia of embryos were dissected and mesenquime was separated from the ectoderm by enzymatic digestion with a pancreatine trypsine solution. BMSC s were collected by flushing the medulla of tibia and femora of adult Lewis rats with ?-MEM and cultured in ?-MEM in 25 cm2 flasks.Doctor en Ciencias BiológicasDoctoradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaDoctorado en Ciencias BiológicasFacultad de CienciasOdontogénesisDienteFormación dentalDoctorado en ciencias biológicas - Tesis y disertaciones académicasSíntesis y evaluación histológica de constructos tridimensionales que promueven la interacción de células mesenquimales con ectodermo oral embrionario de ratas Lewis para la obtención de tejidos semejantes a dientesTesis/Trabajo de grado - Monografía - Doctoradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_db06info:eu-repo/semantics/doctoralThesisORIGINALJaramilloGomezLorenzaMaria2012.pdfDocumentoapplication/pdf3925224http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/15429/1/JaramilloGomezLorenzaMaria2012.pdf34f2cd99461cfd58c0ba10726f2fe636MD51open accessTHUMBNAILJaramilloGomezLorenzaMaria2012.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3569http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/15429/2/JaramilloGomezLorenzaMaria2012.pdf.jpg46089b3ce318f64886509e9d2988d9f5MD52open access10554/15429oai:repository.javeriana.edu.co:10554/154292022-04-29 11:53:44.558Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.co