Estandarización de una PCR para la identificación molecular de Listeria innocua

En este trabajo de grado se estandarizó la técnica de PCR para la identificación de L. innocua sin interferencia con L. monocytogenes. Para la extracción de ADN de los microorganismos utilizados en este trabajo y de los 110 aislamientos diferentes provenientes del proyecto Diseño de un plan integral...

Full description

Autores:
Díaz Hernández, Elizabeth
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2013
Institución:
Pontificia Universidad Javeriana
Repositorio:
Repositorio Universidad Javeriana
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:repository.javeriana.edu.co:10554/11823
Acceso en línea:
http://hdl.handle.net/10554/11823
Palabra clave:
Reacción en cadena por polimerasa
Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas
Rights
openAccess
License
Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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description En este trabajo de grado se estandarizó la técnica de PCR para la identificación de L. innocua sin interferencia con L. monocytogenes. Para la extracción de ADN de los microorganismos utilizados en este trabajo y de los 110 aislamientos diferentes provenientes del proyecto Diseño de un plan integral para reducir la prevalencia de Salmonella spp., y |L. monocytogenes en plantas de beneficio, desposte y puntos de venta en la cadena cárnica porcina se utilizó el kit de extracción de ADN PROMEGA (A1125). La PCR para la identificación de L. monocytogenes se basó en la especificidad de los primers LI1/U1 que amplificaron una banda de 938pb para la identificación de género y los primers LF/LR que amplificaron una banda de 750pb para la identificación de la especie. La PCR para la identificación de L. innocua se basó en los primers lin0464F/lin0464R que amplificaron una banda de 749pb. Los resultados de la estandarización de la PCR para identificación de L. innocua mostraron una alta especificidad de los primers (100%) valorando las cepas interferentes que fueron empleadas en este estudio, y un límite de detección de la PCR de (70fg/?L), los aislamientos pertenecientes al proyecto de investigación, permitieron calcular la proporción de L. innocua de 56.4%. Este trabajo de grado muestra que la técnica de PCR estandarizada, sirve para detectar la presencia de L. innocua y discriminar esta especie de L. monocytogenes.
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spelling Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Poutou Piñales, Raúl AlbertoCarrascal Camacho, Ana KarinaDíaz Hernández, Elizabeth2015-01-17T21:22:20Z2016-03-29T14:24:25Z2020-04-15T20:12:29Z2015-01-17T21:22:20Z2016-03-29T14:24:25Z2020-04-15T20:12:29Z2013http://hdl.handle.net/10554/11823instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coEn este trabajo de grado se estandarizó la técnica de PCR para la identificación de L. innocua sin interferencia con L. monocytogenes. Para la extracción de ADN de los microorganismos utilizados en este trabajo y de los 110 aislamientos diferentes provenientes del proyecto Diseño de un plan integral para reducir la prevalencia de Salmonella spp., y |L. monocytogenes en plantas de beneficio, desposte y puntos de venta en la cadena cárnica porcina se utilizó el kit de extracción de ADN PROMEGA (A1125). La PCR para la identificación de L. monocytogenes se basó en la especificidad de los primers LI1/U1 que amplificaron una banda de 938pb para la identificación de género y los primers LF/LR que amplificaron una banda de 750pb para la identificación de la especie. La PCR para la identificación de L. innocua se basó en los primers lin0464F/lin0464R que amplificaron una banda de 749pb. Los resultados de la estandarización de la PCR para identificación de L. innocua mostraron una alta especificidad de los primers (100%) valorando las cepas interferentes que fueron empleadas en este estudio, y un límite de detección de la PCR de (70fg/?L), los aislamientos pertenecientes al proyecto de investigación, permitieron calcular la proporción de L. innocua de 56.4%. Este trabajo de grado muestra que la técnica de PCR estandarizada, sirve para detectar la presencia de L. innocua y discriminar esta especie de L. monocytogenes.Microbiólogo (a) IndustrialPregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaMicrobiología IndustrialFacultad de CienciasEstandarización de una PCR para la identificación molecular de Listeria innocuaTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisReacción en cadena por polimerasaMicrobiología industrial - Tesis y disertaciones académicasORIGINALDiazHernandezElizabeth2013.pdfapplication/pdf910217http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/11823/1/DiazHernandezElizabeth2013.pdfc14e2dfe4a0d147d5347ee1f75ca9c5bMD51open accessTHUMBNAILDiazHernandezElizabeth2013.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg2135http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/11823/2/DiazHernandezElizabeth2013.pdf.jpg97479d6352582e8df49f276b81781df2MD52open access10554/11823oai:repository.javeriana.edu.co:10554/118232022-05-03 12:15:10.657Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepositorio@javeriana.edu.co