Evaluación del efecto del tratamiento directo con el extracto P2Et de Caesalpinia Spinosa y el tratamiento con medios condicionados de células tumorales de melanoma murino (B16) tratadas con el extracto P2Et sobre la inducción de estrés de retículo en células mieloides supresoras y el impacto en su actividad supresora
Para llevar a cabo el estudio, se generaron las MDSC a partir de médula ósea fresca de ratones C57/BL6 mediante la estimulación por 5 días con Interleucina IL-6 y factor estimulante de colonia de granulocitos y monocitos (GM-CSF, del inglés granulocyte-macrophage colony stimulating factor). Al cuart...
- Autores:
-
Calderón Pérez, Jhon Jairo
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2021
- Institución:
- Pontificia Universidad Javeriana
- Repositorio:
- Repositorio Universidad Javeriana
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repository.javeriana.edu.co:10554/54577
- Acceso en línea:
- http://hdl.handle.net/10554/54577
- Palabra clave:
- Células mieloides supresora (MDSC)
Estrés de Retículo Endoplasmático
Inmunosupresión
Microambiente tumoral
Myeloid-derived suppressor cells (MDSC)
Endoplasmic Reticulum Stress
Immunosuppression
Tumor microenvironment
Bacteriología - Tesis y disertaciones académicas
Neoplasias - Tratamiento - Investigaciones
Inmunosupresion
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- openAccess
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- Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional
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Evaluation of the effect of direct treatment with Caesalpinia Spinosa P2Et extract and treatment with conditioned medium of murino melanoma (B16) tumor cells treated with P2Et extract on the induction of reticulum stress in meloid suppressor cells and the impact on their suppressor activity |
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Evaluación del efecto del tratamiento directo con el extracto P2Et de Caesalpinia Spinosa y el tratamiento con medios condicionados de células tumorales de melanoma murino (B16) tratadas con el extracto P2Et sobre la inducción de estrés de retículo en células mieloides supresoras y el impacto en su actividad supresora |
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Evaluación del efecto del tratamiento directo con el extracto P2Et de Caesalpinia Spinosa y el tratamiento con medios condicionados de células tumorales de melanoma murino (B16) tratadas con el extracto P2Et sobre la inducción de estrés de retículo en células mieloides supresoras y el impacto en su actividad supresora Células mieloides supresora (MDSC) Estrés de Retículo Endoplasmático Inmunosupresión Microambiente tumoral Myeloid-derived suppressor cells (MDSC) Endoplasmic Reticulum Stress Immunosuppression Tumor microenvironment Bacteriología - Tesis y disertaciones académicas Neoplasias - Tratamiento - Investigaciones Inmunosupresion |
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Evaluación del efecto del tratamiento directo con el extracto P2Et de Caesalpinia Spinosa y el tratamiento con medios condicionados de células tumorales de melanoma murino (B16) tratadas con el extracto P2Et sobre la inducción de estrés de retículo en células mieloides supresoras y el impacto en su actividad supresora |
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Para llevar a cabo el estudio, se generaron las MDSC a partir de médula ósea fresca de ratones C57/BL6 mediante la estimulación por 5 días con Interleucina IL-6 y factor estimulante de colonia de granulocitos y monocitos (GM-CSF, del inglés granulocyte-macrophage colony stimulating factor). Al cuarto día las MDSC se trataron con medios condicionados (sobrenadantes) de células tumorales B16 que previamente habían sido tratadas con P2Et. Para confirmar una correcta diferenciación hacia MDSC se realizó una citometría de flujo para el fenotipo PMN-MDSC y M-MDSC. La transmisión de estrés de retículo se observó por western blot y RT-PCR dirigida a la cascada de UPR y la actividad supresora se evaluó mediante la expresión de arginasa 1, óxido nítrico sintasa inducible y moléculas como PDL-1. En este estudio se comparó el impacto que tenía el P2Et al actuar de forma directa sobre las MDSC con el mediado por factores solubles derivados de las células tumorales tratadas con el extracto. Se encontró que el P2Et al actuar de forma directa tiene la capacidad de inducir un fenotipo de PMN-MDSC y una reducción de M-MDSC, además se encontró que las M-MDSC presentaban un fenotipo más inmunosupresor con un aumento de PDL-1, sin embargo, esto no se observó en las PMN-MDSC. Adicionalmente, se observó que el P2Et presenta una menor transferencia de estrés de retículo desde las células tumorales B16 hacia las MDSC acompañado con una reducción en iNOS y Arg1, a diferencia del efecto de inductores de estrés convencionales como la Tapsigargina. En conjunto, estos resultados sugieren que el P2Et podría inducir un microambiente meno |
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Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, "Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores", los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.http://purl.org/coar/access_right/c_abf2Barreto Prieto, AlfonsoPrieto Sarmiento, Karol MildredCalderón Pérez, Jhon JairoRodriguez Camacho, Luz Stella2021-07-08T04:48:43Z2021-07-08T04:48:43Z2021-06-25http://hdl.handle.net/10554/54577instname:Pontificia Universidad Javerianareponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianarepourl:https://repository.javeriana.edu.coPara llevar a cabo el estudio, se generaron las MDSC a partir de médula ósea fresca de ratones C57/BL6 mediante la estimulación por 5 días con Interleucina IL-6 y factor estimulante de colonia de granulocitos y monocitos (GM-CSF, del inglés granulocyte-macrophage colony stimulating factor). Al cuarto día las MDSC se trataron con medios condicionados (sobrenadantes) de células tumorales B16 que previamente habían sido tratadas con P2Et. Para confirmar una correcta diferenciación hacia MDSC se realizó una citometría de flujo para el fenotipo PMN-MDSC y M-MDSC. La transmisión de estrés de retículo se observó por western blot y RT-PCR dirigida a la cascada de UPR y la actividad supresora se evaluó mediante la expresión de arginasa 1, óxido nítrico sintasa inducible y moléculas como PDL-1. En este estudio se comparó el impacto que tenía el P2Et al actuar de forma directa sobre las MDSC con el mediado por factores solubles derivados de las células tumorales tratadas con el extracto. Se encontró que el P2Et al actuar de forma directa tiene la capacidad de inducir un fenotipo de PMN-MDSC y una reducción de M-MDSC, además se encontró que las M-MDSC presentaban un fenotipo más inmunosupresor con un aumento de PDL-1, sin embargo, esto no se observó en las PMN-MDSC. Adicionalmente, se observó que el P2Et presenta una menor transferencia de estrés de retículo desde las células tumorales B16 hacia las MDSC acompañado con una reducción en iNOS y Arg1, a diferencia del efecto de inductores de estrés convencionales como la Tapsigargina. En conjunto, estos resultados sugieren que el P2Et podría inducir un microambiente menoProyecto de Generación de alternativas terapéuticas en cáncer a partir de plantas a través de procesos de investigación y desarrollo traslacional, articulados en sistemas de valor sostenibles ambiental y económicamenteDuring the last few years has been described that the tumor microenvironment plays an important role in cancer progression. Immunosuppression is a characteristic that allows tumor cells to establish, progress and metastasis. Among the various cell types responsible for maintaining immunosuppression is a particular type of cell, the myeloid-derived suppressor cell (MDSC), which is produced in chronic inflammatory processes and has characteristics that make it highly suppressive. MDSCs have been a novel target for cancer treatment because, being highly immunosuppressive, they generate problems at the time of performing some treatments that seek to activate an antitumor response. Among the treatments directed at MDSCs, the aim has been to reprogram them, inhibit their immunosuppressive activity, and to modify these cells to convert them into immunostimulatory cells. It has been described in the literature that part of the immunosuppressive activity of MDSCs is produced by an increase in oxidative stress and reticulum stress in the tumor. It has been found that tumor cells can increase the suppression of MDSCs through the transfer of reticulum stress by activating the Unfolded Protein Response (UPR) signaling pathway. In several studies it has been observed that when UPR components are removed, MDSCs lose their immunosuppressive phenotype and even become antigen-presenting cells, so attacking this stress transfer is a fundamental target for the reprogramming of these cells. Additionally, it has been shown that endoplasmic reticulum stress transfer to MDSCs is also decreased by treatment with antioxidants and this would result in a reduced ability to suppress the antitumor response. This shows that the reduction of oxygen free radicals plays a fundamental role in the reduction of reticulum stress and in the reprogramming of MDSCs. On the other hand, the Immunobiology and Cell Biology group has been working with an ethanolic extract of the Caesalpinia spinosa plant called P2Et, which has been shown to have activity on tumor cells. Among the multiple characteristics of P2Et, its antioxidant capacity has been demonstrated in vitro. Taking this into account, it is possible that P2Et, having a potent antioxidant effect, has the capacity to reduce the oxygen free radicals present in the tumor microenvironment, which would generate a reduction in the transmission of reticulum stress to MDSCs, and which would be reflected by a reduced suppressive capacity, with a decrease in the expression of arginase 1, inducible nitric oxide synthase and molecules such as programmed death-ligand 1 (PDL-1). Therefore, the aim of this work was to determine the effect of treatment of tumor cells with P2Et extract on the transfer of reticulum stress to MDSC and the impact on their suppressive activity.Bacteriólogo (a)PregradoPDFapplication/pdfspaPontificia Universidad JaverianaBacteriologíaFacultad de CienciasCélulas mieloides supresora (MDSC)Estrés de Retículo EndoplasmáticoInmunosupresiónMicroambiente tumoralMyeloid-derived suppressor cells (MDSC)Endoplasmic Reticulum StressImmunosuppressionTumor microenvironmentBacteriología - Tesis y disertaciones académicasNeoplasias - Tratamiento - InvestigacionesInmunosupresionEvaluación del efecto del tratamiento directo con el extracto P2Et de Caesalpinia Spinosa y el tratamiento con medios condicionados de células tumorales de melanoma murino (B16) tratadas con el extracto P2Et sobre la inducción de estrés de retículo en células mieloides supresoras y el impacto en su actividad supresoraEvaluation of the effect of direct treatment with Caesalpinia Spinosa P2Et extract and treatment with conditioned medium of murino melanoma (B16) tumor cells treated with P2Et extract on the induction of reticulum stress in meloid suppressor cells and the impact on their suppressor activityTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisORIGINALTrabajo de grado.pdfTrabajo de grado.pdfTrabajo de gradoapplication/pdf2078234http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/54577/1/Trabajo%20de%20grado.pdf4876f7be6f2521715903e8c938d7dcebMD51open accessANEXO 1.pdfANEXO 1.pdfAnexo 1application/pdf559200http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/54577/3/ANEXO%201.pdffc24b4978245a8791f9cfe981b1bd285MD53open accessANEXO 2.pdfANEXO 2.pdfAnexo 2application/pdf473235http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/54577/4/ANEXO%202.pdfabfc59acb7b69610454d60ef752195d4MD54open accessCarta de autorización.pdfCarta de autorización.pdfCarta aprobación directoresapplication/pdf777333http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/54577/2/Carta%20de%20autorizaci%c3%b3n.pdf72e9310f8b6d34b9502ed2b70963f9d5MD52metadata only accessCarta de autorizacion de autores.pdfCarta de autorizacion de autores.pdfLicencia de usoapplication/pdf90545http://repository.javeriana.edu.co/bitstream/10554/54577/6/Carta%20de%20autorizacion%20de%20autores.pdfe8f4df7a000dc4ecd7f0f5b35f2cd0b0MD56metadata only accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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