Cuantificación de citoquinas de mono Aotus por RT-PCR cuantitativa en tiempo real

Aotus spp. Los monos se consideran el modelo ideal para estudiar el progreso de la infección de malaria y la respuesta inmune que provoca. Describimos el uso de una técnica desarrollada recientemente, RT-PCR cuantitativa en tiempo real , para cuantificar varios ARNm de citocinas de monoAotus implicados en las respuestas Th1 / Th2 (IL-4, IL-10, TNF-? e IFN-?). Se diseñaron cebadores específicos para cada citocina y se construyeron curvas estándar usando diluciones en serie de pDNA que contenía cada secuencia diana. Los resultados se normalizaron a los niveles de expresión génica de mantenimiento de GAPDH . Las curvas estándar mostraron altos coeficientes de correlación y fueron lineales en un amplio rango de números de copias. Cuantificación de AotusLas muestras mostraron poca variación intra e inter-experimento, por lo tanto, la técnica ha demostrado ser altamente reproducible y sensible, lo que nos permite detectar tan solo 25 copias / ?l de ADN objetivo. Esta técnica permitirá estudiar los patrones de citocinas Th1 y Th2 provocados en respuesta a la infección para evaluar prospectivamente la eficacia de las vacunas contra la malaria.

• Fecha de publicación: 2004
• Institución: Universidad del Rosario
• Repositorio: Repositorio EdocUR - U. Rosario
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:repository.urosario.edu.co:10336/26313
• Acceso en línea: https://doi.org/10.1016/j.cyto.2004.04.004; https://repository.urosario.edu.co/handle/10336/26313
• Palabra clave: Aotus; Citoquinas; Malaria; ARNm; RT-PCR cuantitativa en tiempo real
• License: Restringido (Acceso a grupos específicos)