Vigilancia epidemiológica al virus del Oeste del Nilo en municipios del Departamento del Meta

Objetivo. Identificar la presencia del virus del Oeste del Nilo en equinos y mosquitos en ocho municipios del departamento del Meta. Materiales y métodos. La investigación contó con el aval del Comité de bioética de la Universidad de los Llanos. Se analizaron mediante pruebas serológicas y molecular...

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Autores:
Barajas Pardo, Diana Patricia
Ciouderis, Karl Adolf
Cárdenas García, Darío
Góngora Orjuela, Agustín
Osorio Benítez, Jorge
Pacheco Pérez, Camilo Ernesto
Monroy Ochoa, Néstor Ismael
Tovar, Gloria
Tipo de recurso:
Article of investigation
Fecha de publicación:
2020
Institución:
Universidad Cooperativa de Colombia
Repositorio:
Repositorio UCC
Idioma:
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
https://doi.org/10.21897/rmvz.1252
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Palabra clave:
Epidemiología
Reacción en cadena de la polimerasa
Zoonosis
Flavivirus
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description Objetivo. Identificar la presencia del virus del Oeste del Nilo en equinos y mosquitos en ocho municipios del departamento del Meta. Materiales y métodos. La investigación contó con el aval del Comité de bioética de la Universidad de los Llanos. Se analizaron mediante pruebas serológicas y moleculares 613 muestras de equinos criollos y de raza cuarto de milla, destinados a actividades deportivas y de trabajo, con un rango de edad de 2 a 15 años, en los transectos: Villavicencio- Restrepo-Cumaral, San Martín - Castilla la Nueva-Granada y Puerto López-Puerto Gaitán, analizados en 62 pool y 213 mosquitos. Los pool de sueros de equinos y mosquitos fueron analizados por ELISA y PCR. Resultados. No se encontraron animales seropositivos mediante la prueba de ELISA y las pruebas moleculares también fueron negativas. Conclusiones. Aunque en este estudio no se evidenció la presencia de anticuerpos IgM por la técnica de Elisa y las pruebas moleculares (RT-PCR) también fueron negativas para circulación viral, en los municipios objeto de estudio, es importante indicar que la detección molecular en sueros, requiere unos niveles de viremia representativos y que el animal se encuentre en la fase aguda de la enfermedad. Aunque es posible que la población equina se mantenga libre de contacto con el virus, se debe mantener la vigilancia epidemiológica frente a este importante patógeno para la salud humana, especialmente por la presentación de brotes de otros virus zoonóticos como la Encefalitis Equina del Este y Encefalitis Equina Venezolana en los departamentos del Meta y Casanare, contiguo a este.
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dc.relation.references.spa.fl_str_mv Ulbert SW. Nile Virus: The Complex Biology of an Emerging Pathogen. Intervirology 2011; 54(4):171–184. https://doi. org/10.1159/000328320
Diamond MS. Virus and Host Determinants of West Nile Virus Pathogenesis. Plos Pathogens. 2009; 5(6):e1000452. https:// doi.org/10.1371/journal.ppat.1000452
Selisko B, Wang C, Harris E, Canard B. Regulation of Flavivirus RNA synthesis and replication. Curr Opin Virol. 2014; 9:74–83. https://www.sciencedirect.com/science/ article/abs/pii/S1879625714001916
Montgomery RR, Murray KO. Risk factors for West Nile virus Infection and Disease in Populations and Individuals. Expert Rev Anti Infect Ther. 2015; 13(3):317–325. https:// doi.org/10.1586/14787210.2015.1007043
Angenvoort J, Brault AC, Bowen RA, Groschup MH. West Nile viral infection of equids. Vet Microbiol. 2013; 167(1-2):168– 180. https://dx.doi.org/10.1016%2Fj. vetmic.2013.08.013
Ward MP, Scheurmann JA: The relationship between equine and human West Nile virus disease occurrence. Vet Microbiol 2008; 129(3-4):378–383. https://doi. org/10.1016/j.vetmic.2007.11.022
Bielefeldt-Ohmann H, Bosco-Lauth A, Hartwig A-E, Uddin MJ, Barcelon J, Suen WW, et al. Characterization of non-lethal West Nile Virus (WNV) infection in horses: Subclinical pathology and innate immune response. Microb Pathog. 2017; 103:71-79 https:// doi.org/10.1016/j.micpath.2016.12.018
Nash D, Mostashari F, Fine A, Miller J, O’Leary D, Murray K, et al. The Outbreak of West Nile Virus Infection in the New York City Area in 1999. N Engl J Med. 2001; 344:1807-1814. https://doi.org/10.1056/ NEJM200106143442401
Chancey C, Grinev A, Volkova E, Rios M. The Global Ecology and Epidemiology of West Nile Virus. BioMed Research International. 2015; Article ID 376230. http://dx.doi. org/10.1155/2015/376230
Hayes EB, Sejvar JJ, Zaki SR, Lanciotti RS, Bode AV, Campbell GL. Virology, pathology, and clinical manifestations of West Nile virus disease. Emerg Infect Dis. 2005; 11(8):1174–1179. https://dx.doi. org/10.3201/eid1108.050289b
Mattar S, Edwards E, Laguado J, González M, Alvarez J, Komar N. West Nile virus infection in Colombian horses. Emerg Infect Dis. 2005; 11(9):1497-1498. http://dx.doi. org/10.3201/eid1109.050426
Góes-Rivillas Y, Taborda N, Díaz F, Góngora A, Rodas JD, Ruiz-Sáenz J, et al. Antibodies to West Nile virus in equines of Antioquia and Meta, Colombia, 2005–2008. Rev Colomb Cienc Pecu. 2010; 23:462–470. https:// aprendeenlinea.udea.edu.co/revistas/index. php/rccp/article/view/324610
Osorio J, Ciuoderis K, Lopera J, Piedrahita L, Murphy D, Levasseur J. Characterization of West Nile Viruses isolated from captive American flamingoes (Phoenicopterous ruber) in Medellin Colombia. Am J Trop Med Hig. 2012; 87:565–572. https://doi. org/10.4269/ajtmh.2012.11-0655
Hoyos R, Uribe S, Gallego JC. Evolutionary relationships of West Nile virus detected in mosquitoes from a migratory bird zone of Colombian Caribbean. Virol J. 2015; 12(80):1-6. https://doi.org/10.1186/ s12985-015-0310-8
Rey P. Virus del Oeste del Nilo: Un patógeno de importancia para Colombia. Informe Quincenal Epidemiológico Nacional- IQEN 2013; 18(20):206–221. https://www.ins. gov.co/buscador-eventos/IQEN/IQEN%20 vol%2018%202013%20num%2020.pdf
Díaz LA, Komar N, Visintin A, Dantur MJ, Stein M, Aguilar J, et al. West Nile Virus in Birds, Argentina. Emerg Infect Dis. 2008; 14(4): 689-691. https://doi.org/10.3201/ eid1404.071257
Naing L, Winn T, Rusli BN. Practical issues in calculating the sample size for prevalence studies. Arch Orofacial Sci. 2006; 1:9-14. http://aos.usm.my/docs/Vol_1/09_14_ ayub.pdf
Peña J, Berrocal L, González M, Ponce C, Ariza K, Máttar S. Virus del oeste del Nilo. Perspectivas en el mundo vertebrado. Rev MVZ Córdoba. 2005; 10(2):583-601. https://doi.org/10.21897/rmvz.463
ICA. Censo Pecuario Nacional 2016. C o l o m b i a : I n s t i t u t o C o l o m b i a n o Agropecuario – ICA; 2016. http://www.ica. gov.co/getdoc/8232c0e5-be97-42bd-b07b9cdbfb07fcac/Censos-2008.aspx
Chomczynski P, Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Analytical Biochem. 1987; 162 (1):156- 159. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/2440339
Kuno G. Universal diagnostic RT-PCR protocol for arboviruses. J Virol Methods. 1998; 72(1):27-41. https://doi.org/10.1016/ s0166-0934(98)00003-2
Olano V, Tinker M. Fauna de mosquitos asociada con aedes aegypti en Guaduas, Colombia. Biomédica. 1993; 1(2):71- 74. https://doi.org/10.7705/biomedica. v13i2.2048
Pecor J, Mallanpalli V, Harbach R, Peyton E. Catalog and illustrated review of the subgenus Melanoconion of Culex (Diptera: Culicidae). Contrib Am Entomol Inst. 1992; 27(2):1-228. http://mosquito-taxonomicinventory.info/sites/mosquito-taxonomicinventory.info/files/Pecor%20et%20al%20 1992.pdf
Hall TA. BioEdit: a user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucleic Acids Symp Ser 1999; 41:95–98. http://brownlab. mbio.ncsu.edu/JWB/papers/1999Hall1.pdf
Chenna R, Sugawara H, Koike T, Lopez R, Gibson TJ, Higgins DG, et al. Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs. Nucleic Acids Res; 2003; 31(13):3497-500. https://doi.org/10.1093/ nar/gkg500
Peet RK. The Measurement of Species Diversity. Ann Rev Ecol Syst. 1974; 5:285- 307. https://doi.org/10.1146/annurev. es.05.110174.001441
Moreno CE . Métodos para medir la biodiversidad. M&T Manuales y Tesis SEA: España; 2001. http://entomologia.rediris. es/sea/manytes/metodos.pdf
ICA. Boletín epidemiológico. Resultados de vigilancia II semestre. ICA: Boyacá, Colombia; 2016. https://www.ica.gov.co/ areas/agricola/servicios/epidemiologiaagricola/boletines_pnmf/2016/boyaca_ semestre2.aspx
Roehrig JT, Nash D, Maldin B, Labowitz A, Martin DA, Lanciotti RS, Campbell GL: Persistence of virus-reactive serum immunoglobulin M antibody in confirmed west nile virus encephalitis cases. Emerg Infect Dis. 2003; 9(3):376-379. https:// doi.org/10.3201/eid0903.020531
Tardei G, Ruta S, Chitu V, Rossi C, Tsai TF, Cernescu C: Evaluation of immunoglobulin M (IgM) and IgG enzyme immunoassays in serologic diagnosis of West Nile Virus infection. J Clin Microbiol. 2000; 38(6):2232- 2239. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/10834982
Pérez-Ramírez E. Llorente F, MA. Experimental Infections of Wild Birds with West Nile Virus. Viruses. 2014; 6(2):752–781. https://doi. org/10.3390/v6020752
Hubalek Z, Halouzka J. West Nile fever – a reemerging mosquito-borne viral disease in Europe. Emer Infect Dis. 1999; 5(5):643–650. https://doi.org/10.3201/ eid0505.990505
Berrocal L, Peña J, González M, Mattar S. Virus del Oeste del Nilo: Ecología y epidemiología de un patógeno emergente en Colombia. Rev Salud Pública. 2006; 8(2):218-228. https://www.scielosp.org/ article/rsap/2006.v8n2/218-228/
Mattar S, Komar N, Young G, Alvarez J, Gonzalez M. Seroconversion for West Nile and St. Louis encephalitis viruses among sentinel horses in Colombia. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2011; 106(8):976- 979. http://dx.doi.org/10.1590/S0074- 02762011000800012
Beck C, Jimenez-Clavero MA, Leblond A, Durand B, Nowotny N, Leparc-Goffart I, et al. Flaviviruses in Europe: Complex Circulation Patterns and Their Consequences for the Diagnosis and Control of West Nile Disease. Int J Environ Res Public Health. 2013; 10(11):6049-83. http://dx.doi. org/10.3390/ijerph10116049
Kramer LD, Bernard KA. West Nile virus in the Western Hemisphere. Curr Opin Infect Dis. 2001; 14(5):519–525. https://doi. org/10.1097/00001432-200110000-00004
Hernández R, Bravo L, Morón R, Armas A, Girón B, Aponte T. El Virus del Nilo Occidental. Revista del Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel. 2009; 40(1):44-56. http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_ arttext&pid=S0798-04772009000100007
OPS/OMS. Encefalitis Equinas transmitidas por artrópodos. Boletín Salud Pública Veterinaria. Organización Panamericana de la Salud. Centro Panamericano de Fiebre Aftosa. 2013. https://www.paho. org/panaftosa/index.php?option=com_ docman&view=download&category_ slug=zoonosis-779&alias=57-encefalitisequinas-transmitidas-por-artropodos7&Itemid=518
Ciota AT, Kramer LD. Vector-Virus Interactions and Transmission Dynamics of West Nile Virus. Viruses. 2013, 5(12):3021-3047. https://doi.org/10.3390/v5123021
Rappole JH, Hubálek Z. Migratory birds and West Nile virus. J Applied Microbiol. 2003, 94:47S–58S. https://doi. org/10.1046/j.1365-2672.94.s1.6.x
Hayes EB, Komar N, Roger S. Nasci RS, Montgomery SP, O’Leary DR, et al. Epidemiology and Transmission Dynamics of West Nile Virus Disease. Emerg Infect Dis. 2005; 11(8):1167–1173. https://doi. org/10.3201/eid1108.050289a
Ciuderis-Aponte KA. Virus del oeste del nilo (VON): Enfermedad zoonótica emergente de posible importancia en Colombia. Orinoquia. 2009; 13(1):46-58. https://orinoquia. unillanos.edu.co/index.php/orinoquia/ article/view/235
Jaramillo M, Peña J, Berrocal L, Mattar S, Gónzalez M, Komar N, et al. Vigilancia centinela para el virus del Oeste del Nilo en culícidos y aves domésticas en el Departamento de Córdoba. Rev MVZ Córdoba. 2005; 10(2):633-638. https:// doi.org/10.21897/rmvz.467
Fros JJ, Geertsema C, Vogel’s CB, Roosjen PP, Failloux AB, Vlak JM, et al. NorthWestern European Mosquitoes Indicates Its Epidemic Potential and Warrants Increased Surveillance. PLoS Negl Trop Dis. 2010; 9(7):e0003956. https://doi.org/10.1371/ journal.pntd.0003956
Campbell GL, Marfin AA, Lanciotti RS, Gubler DJ. West Nile virus. Lancet Infect Dis. 2002; 2(9):519–529. https://www.ncbi.nlm.nih. gov/pubmed/12206968
Joó K, Bakonyi T, Szenci O, Sárdi S, Ferenczi E, Barna M. et al. Comparison of assays for the detection of West Nile virus antibodies in equine serum after natural infection or vaccination. Vet Immunol Immunopathol. 2017; 183:1–6. https://doi.org/10.1016/j. vetimm.2016.10.015
Alarcón-Elbal PM, Sánchez JM, Delacour S, Ruiz I, Pinal R, Lucientes J. Asociación de vector del VNO e hidrófito invasor: Culex pipiens Linnaeus, 1758 y Ludwigia grandiflora (Michaux) Greuter & Burdet en el marjal de Xeraco-Xeresa, Valencia. Anales de Biología. 2013; 35:17-27. http://dx.doi. org/10.6018/analesbio.0.35.4
OPS/OMS. La mitad de la población de las Américas, en riesgo de contraer enfermedades transmitidas por pequeños insectos. La Paz, Bolivia: Organización Panamericana de la Salud; 2014. https:// www.paho.org/bol/index.php?option=com_ content&view=article&id=1621:la-mitadpoblacion-americas-riesgo-contraerenfermedades-transmitidas-pequenosinsectos&Itemid=481
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Se analizaron mediante pruebas serológicas y moleculares 613 muestras de equinos criollos y de raza cuarto de milla, destinados a actividades deportivas y de trabajo, con un rango de edad de 2 a 15 años, en los transectos: Villavicencio- Restrepo-Cumaral, San Martín - Castilla la Nueva-Granada y Puerto López-Puerto Gaitán, analizados en 62 pool y 213 mosquitos. Los pool de sueros de equinos y mosquitos fueron analizados por ELISA y PCR. Resultados. No se encontraron animales seropositivos mediante la prueba de ELISA y las pruebas moleculares también fueron negativas. Conclusiones. Aunque en este estudio no se evidenció la presencia de anticuerpos IgM por la técnica de Elisa y las pruebas moleculares (RT-PCR) también fueron negativas para circulación viral, en los municipios objeto de estudio, es importante indicar que la detección molecular en sueros, requiere unos niveles de viremia representativos y que el animal se encuentre en la fase aguda de la enfermedad. Aunque es posible que la población equina se mantenga libre de contacto con el virus, se debe mantener la vigilancia epidemiológica frente a este importante patógeno para la salud humana, especialmente por la presentación de brotes de otros virus zoonóticos como la Encefalitis Equina del Este y Encefalitis Equina Venezolana en los departamentos del Meta y Casanare, contiguo a este.Objective. Identify the presence of West Nile virus in horses and mosquitoes in eight municipalities of the department of Meta. Materials and methods. The research was supported by the Bioethics Committee of the University of Los Llanos. 613 samples of Creole and quarter-mile equine horses, intended for sports and work activities, with an age range of 2 to 15 years, were analyzed using serological and molecular tests in the transects: Villavicencio-Restrepo-Cumaral, San Martín- Castilla la Nueva-Granada and Puerto López-Puerto Gaitán, analyzed in 62 pools and 213 mosquitoes. The pool of sera of horses and mosquitoes were analyzed by ELISA and PCR. Results. No seropositive animals were found by the ELISA test and molecular tests were also negative. Conclusions. Although in this study the presence of IgM antibodies was not evidenced by the Elisa technique, and molecularhttps://scienti.minciencias.gov.co/cvlac/visualizador/generarCurriculoCv.do?cod_rh=0001098756https://orcid.org/0000-0002-7604-4734https://scienti.minciencias.gov.co/gruplac/jsp/visualiza/visualizagr.jsp?nro=00000000009387dianap.barajas@campusucc.edu.cohttps://scholar.google.com/citations?hl=es&user=l4wtVfUAAAAJ10 p.MVZ CórdobaUniversidad Cooperativa de Colombia, Facultad de Ciencias de la Salud, Medicina Veterinaría y Zootecnia, VillavicencioMedicina veterinaria y zootecniaVillavicenciohttps://revistas.unicordoba.edu.co/index.php/revistamvz/article/view/e1252MVZ CórdobaUlbert SW. Nile Virus: The Complex Biology of an Emerging Pathogen. Intervirology 2011; 54(4):171–184. https://doi. org/10.1159/000328320Diamond MS. Virus and Host Determinants of West Nile Virus Pathogenesis. Plos Pathogens. 2009; 5(6):e1000452. https:// doi.org/10.1371/journal.ppat.1000452Selisko B, Wang C, Harris E, Canard B. Regulation of Flavivirus RNA synthesis and replication. Curr Opin Virol. 2014; 9:74–83. https://www.sciencedirect.com/science/ article/abs/pii/S1879625714001916Montgomery RR, Murray KO. Risk factors for West Nile virus Infection and Disease in Populations and Individuals. Expert Rev Anti Infect Ther. 2015; 13(3):317–325. https:// doi.org/10.1586/14787210.2015.1007043Angenvoort J, Brault AC, Bowen RA, Groschup MH. West Nile viral infection of equids. Vet Microbiol. 2013; 167(1-2):168– 180. https://dx.doi.org/10.1016%2Fj. vetmic.2013.08.013Ward MP, Scheurmann JA: The relationship between equine and human West Nile virus disease occurrence. Vet Microbiol 2008; 129(3-4):378–383. https://doi. org/10.1016/j.vetmic.2007.11.022Bielefeldt-Ohmann H, Bosco-Lauth A, Hartwig A-E, Uddin MJ, Barcelon J, Suen WW, et al. Characterization of non-lethal West Nile Virus (WNV) infection in horses: Subclinical pathology and innate immune response. Microb Pathog. 2017; 103:71-79 https:// doi.org/10.1016/j.micpath.2016.12.018Nash D, Mostashari F, Fine A, Miller J, O’Leary D, Murray K, et al. The Outbreak of West Nile Virus Infection in the New York City Area in 1999. N Engl J Med. 2001; 344:1807-1814. https://doi.org/10.1056/ NEJM200106143442401Chancey C, Grinev A, Volkova E, Rios M. The Global Ecology and Epidemiology of West Nile Virus. BioMed Research International. 2015; Article ID 376230. http://dx.doi. org/10.1155/2015/376230Hayes EB, Sejvar JJ, Zaki SR, Lanciotti RS, Bode AV, Campbell GL. Virology, pathology, and clinical manifestations of West Nile virus disease. Emerg Infect Dis. 2005; 11(8):1174–1179. https://dx.doi. org/10.3201/eid1108.050289bMattar S, Edwards E, Laguado J, González M, Alvarez J, Komar N. West Nile virus infection in Colombian horses. Emerg Infect Dis. 2005; 11(9):1497-1498. http://dx.doi. org/10.3201/eid1109.050426Góes-Rivillas Y, Taborda N, Díaz F, Góngora A, Rodas JD, Ruiz-Sáenz J, et al. Antibodies to West Nile virus in equines of Antioquia and Meta, Colombia, 2005–2008. Rev Colomb Cienc Pecu. 2010; 23:462–470. https:// aprendeenlinea.udea.edu.co/revistas/index. php/rccp/article/view/324610Osorio J, Ciuoderis K, Lopera J, Piedrahita L, Murphy D, Levasseur J. Characterization of West Nile Viruses isolated from captive American flamingoes (Phoenicopterous ruber) in Medellin Colombia. Am J Trop Med Hig. 2012; 87:565–572. https://doi. org/10.4269/ajtmh.2012.11-0655Hoyos R, Uribe S, Gallego JC. Evolutionary relationships of West Nile virus detected in mosquitoes from a migratory bird zone of Colombian Caribbean. Virol J. 2015; 12(80):1-6. https://doi.org/10.1186/ s12985-015-0310-8Rey P. Virus del Oeste del Nilo: Un patógeno de importancia para Colombia. Informe Quincenal Epidemiológico Nacional- IQEN 2013; 18(20):206–221. https://www.ins. gov.co/buscador-eventos/IQEN/IQEN%20 vol%2018%202013%20num%2020.pdfDíaz LA, Komar N, Visintin A, Dantur MJ, Stein M, Aguilar J, et al. West Nile Virus in Birds, Argentina. Emerg Infect Dis. 2008; 14(4): 689-691. https://doi.org/10.3201/ eid1404.071257Naing L, Winn T, Rusli BN. Practical issues in calculating the sample size for prevalence studies. Arch Orofacial Sci. 2006; 1:9-14. http://aos.usm.my/docs/Vol_1/09_14_ ayub.pdfPeña J, Berrocal L, González M, Ponce C, Ariza K, Máttar S. Virus del oeste del Nilo. Perspectivas en el mundo vertebrado. Rev MVZ Córdoba. 2005; 10(2):583-601. https://doi.org/10.21897/rmvz.463ICA. Censo Pecuario Nacional 2016. C o l o m b i a : I n s t i t u t o C o l o m b i a n o Agropecuario – ICA; 2016. http://www.ica. gov.co/getdoc/8232c0e5-be97-42bd-b07b9cdbfb07fcac/Censos-2008.aspxChomczynski P, Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Analytical Biochem. 1987; 162 (1):156- 159. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/2440339Kuno G. Universal diagnostic RT-PCR protocol for arboviruses. J Virol Methods. 1998; 72(1):27-41. https://doi.org/10.1016/ s0166-0934(98)00003-2Olano V, Tinker M. Fauna de mosquitos asociada con aedes aegypti en Guaduas, Colombia. Biomédica. 1993; 1(2):71- 74. https://doi.org/10.7705/biomedica. v13i2.2048Pecor J, Mallanpalli V, Harbach R, Peyton E. Catalog and illustrated review of the subgenus Melanoconion of Culex (Diptera: Culicidae). Contrib Am Entomol Inst. 1992; 27(2):1-228. http://mosquito-taxonomicinventory.info/sites/mosquito-taxonomicinventory.info/files/Pecor%20et%20al%20 1992.pdfHall TA. BioEdit: a user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucleic Acids Symp Ser 1999; 41:95–98. http://brownlab. mbio.ncsu.edu/JWB/papers/1999Hall1.pdfChenna R, Sugawara H, Koike T, Lopez R, Gibson TJ, Higgins DG, et al. Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs. Nucleic Acids Res; 2003; 31(13):3497-500. https://doi.org/10.1093/ nar/gkg500Peet RK. The Measurement of Species Diversity. Ann Rev Ecol Syst. 1974; 5:285- 307. https://doi.org/10.1146/annurev. es.05.110174.001441Moreno CE . Métodos para medir la biodiversidad. M&T Manuales y Tesis SEA: España; 2001. http://entomologia.rediris. es/sea/manytes/metodos.pdfICA. Boletín epidemiológico. Resultados de vigilancia II semestre. ICA: Boyacá, Colombia; 2016. https://www.ica.gov.co/ areas/agricola/servicios/epidemiologiaagricola/boletines_pnmf/2016/boyaca_ semestre2.aspxRoehrig JT, Nash D, Maldin B, Labowitz A, Martin DA, Lanciotti RS, Campbell GL: Persistence of virus-reactive serum immunoglobulin M antibody in confirmed west nile virus encephalitis cases. Emerg Infect Dis. 2003; 9(3):376-379. https:// doi.org/10.3201/eid0903.020531Tardei G, Ruta S, Chitu V, Rossi C, Tsai TF, Cernescu C: Evaluation of immunoglobulin M (IgM) and IgG enzyme immunoassays in serologic diagnosis of West Nile Virus infection. J Clin Microbiol. 2000; 38(6):2232- 2239. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/10834982Pérez-Ramírez E. Llorente F, MA. Experimental Infections of Wild Birds with West Nile Virus. Viruses. 2014; 6(2):752–781. https://doi. org/10.3390/v6020752Hubalek Z, Halouzka J. West Nile fever – a reemerging mosquito-borne viral disease in Europe. Emer Infect Dis. 1999; 5(5):643–650. https://doi.org/10.3201/ eid0505.990505Berrocal L, Peña J, González M, Mattar S. Virus del Oeste del Nilo: Ecología y epidemiología de un patógeno emergente en Colombia. Rev Salud Pública. 2006; 8(2):218-228. https://www.scielosp.org/ article/rsap/2006.v8n2/218-228/Mattar S, Komar N, Young G, Alvarez J, Gonzalez M. Seroconversion for West Nile and St. Louis encephalitis viruses among sentinel horses in Colombia. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2011; 106(8):976- 979. http://dx.doi.org/10.1590/S0074- 02762011000800012Beck C, Jimenez-Clavero MA, Leblond A, Durand B, Nowotny N, Leparc-Goffart I, et al. Flaviviruses in Europe: Complex Circulation Patterns and Their Consequences for the Diagnosis and Control of West Nile Disease. Int J Environ Res Public Health. 2013; 10(11):6049-83. http://dx.doi. org/10.3390/ijerph10116049Kramer LD, Bernard KA. West Nile virus in the Western Hemisphere. Curr Opin Infect Dis. 2001; 14(5):519–525. https://doi. org/10.1097/00001432-200110000-00004Hernández R, Bravo L, Morón R, Armas A, Girón B, Aponte T. El Virus del Nilo Occidental. Revista del Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel. 2009; 40(1):44-56. http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_ arttext&pid=S0798-04772009000100007OPS/OMS. Encefalitis Equinas transmitidas por artrópodos. Boletín Salud Pública Veterinaria. Organización Panamericana de la Salud. Centro Panamericano de Fiebre Aftosa. 2013. https://www.paho. org/panaftosa/index.php?option=com_ docman&view=download&category_ slug=zoonosis-779&alias=57-encefalitisequinas-transmitidas-por-artropodos7&Itemid=518Ciota AT, Kramer LD. Vector-Virus Interactions and Transmission Dynamics of West Nile Virus. Viruses. 2013, 5(12):3021-3047. https://doi.org/10.3390/v5123021Rappole JH, Hubálek Z. Migratory birds and West Nile virus. J Applied Microbiol. 2003, 94:47S–58S. https://doi. org/10.1046/j.1365-2672.94.s1.6.xHayes EB, Komar N, Roger S. Nasci RS, Montgomery SP, O’Leary DR, et al. Epidemiology and Transmission Dynamics of West Nile Virus Disease. Emerg Infect Dis. 2005; 11(8):1167–1173. https://doi. org/10.3201/eid1108.050289aCiuderis-Aponte KA. Virus del oeste del nilo (VON): Enfermedad zoonótica emergente de posible importancia en Colombia. Orinoquia. 2009; 13(1):46-58. https://orinoquia. unillanos.edu.co/index.php/orinoquia/ article/view/235Jaramillo M, Peña J, Berrocal L, Mattar S, Gónzalez M, Komar N, et al. Vigilancia centinela para el virus del Oeste del Nilo en culícidos y aves domésticas en el Departamento de Córdoba. Rev MVZ Córdoba. 2005; 10(2):633-638. https:// doi.org/10.21897/rmvz.467Fros JJ, Geertsema C, Vogel’s CB, Roosjen PP, Failloux AB, Vlak JM, et al. NorthWestern European Mosquitoes Indicates Its Epidemic Potential and Warrants Increased Surveillance. PLoS Negl Trop Dis. 2010; 9(7):e0003956. https://doi.org/10.1371/ journal.pntd.0003956Campbell GL, Marfin AA, Lanciotti RS, Gubler DJ. West Nile virus. Lancet Infect Dis. 2002; 2(9):519–529. https://www.ncbi.nlm.nih. gov/pubmed/12206968Joó K, Bakonyi T, Szenci O, Sárdi S, Ferenczi E, Barna M. et al. Comparison of assays for the detection of West Nile virus antibodies in equine serum after natural infection or vaccination. Vet Immunol Immunopathol. 2017; 183:1–6. https://doi.org/10.1016/j. vetimm.2016.10.015Alarcón-Elbal PM, Sánchez JM, Delacour S, Ruiz I, Pinal R, Lucientes J. Asociación de vector del VNO e hidrófito invasor: Culex pipiens Linnaeus, 1758 y Ludwigia grandiflora (Michaux) Greuter & Burdet en el marjal de Xeraco-Xeresa, Valencia. Anales de Biología. 2013; 35:17-27. http://dx.doi. org/10.6018/analesbio.0.35.4OPS/OMS. La mitad de la población de las Américas, en riesgo de contraer enfermedades transmitidas por pequeños insectos. La Paz, Bolivia: Organización Panamericana de la Salud; 2014. https:// www.paho.org/bol/index.php?option=com_ content&view=article&id=1621:la-mitadpoblacion-americas-riesgo-contraerenfermedades-transmitidas-pequenosinsectos&Itemid=481EpidemiologíaReacción en cadena de la polimerasaZoonosisFlavivirusEpidemiologyPolymerase chain reactionZoonosesFlavivirusVigilancia epidemiológica al virus del Oeste del Nilo en municipios del Departamento del MetaArtículos Científicoshttp://purl.org/coar/resource_type/c_2df8fbb1http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionAtribucióninfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2PublicationORIGINAL2021_vigilancia_epidemiologica_virus.pdf2021_vigilancia_epidemiologica_virus.pdfapplication/pdf396084https://repository.ucc.edu.co/bitstreams/fd465d11-e739-45c6-b509-6a5f7e43d76c/downloadf3409c7316411bb323fca287742db30eMD512021_vigilancia_epidemiologica_virus-FormatoLicenciaUso.pdf2021_vigilancia_epidemiologica_virus-FormatoLicenciaUso.pdfapplication/pdf722981https://repository.ucc.edu.co/bitstreams/b7dabf76-0969-4bc0-85a5-90056e4c533f/downloaddc3dfd7b9a2c5a9b73566168039f7b75MD55LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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