Efecto de la ciclicidad ovárica en la migración nuclear, mediante sustancias desestabilizadoras del citoesqueleto en ovocitos bovinos sometidos a maduración in vitro

El objetivo de este estudio fue Determinar el efecto de la presencia o ausencia del cuerpo lúteo en la tasa de migración nuclear sobre ovocitos sometidos a maduración in vitro inducidos con Demecolcina (DM). Ovarios de hembras bovinas fueron obtenidos de una planta de beneficio local. Inicialmente f...

Full description

Autores:
Mantilla Delgado, Brayan Sneider
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2021
Institución:
Universidad Cooperativa de Colombia
Repositorio:
Repositorio UCC
Idioma:
OAI Identifier:
oai:repository.ucc.edu.co:20.500.12494/43522
Acceso en línea:
https://hdl.handle.net/20.500.12494/43522
Palabra clave:
Maduración in vitro
Enucleación celular
Demecolcina
Ciclicidad ovárica
TG 2022 MVZ 43522
Rights
openAccess
License
Atribución – No comercial – Sin Derivar
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description El objetivo de este estudio fue Determinar el efecto de la presencia o ausencia del cuerpo lúteo en la tasa de migración nuclear sobre ovocitos sometidos a maduración in vitro inducidos con Demecolcina (DM). Ovarios de hembras bovinas fueron obtenidos de una planta de beneficio local. Inicialmente fueron clasificados de acuerdo a la presencia o ausencia del cuerpo lúteo (CL) para la extracción de los complejos cumulus ovocitos (CCOs). En las dos clasificaciones propuestas se realizaron dos experimentos. El primero consistió en determinar el efecto ejercido del CL sobre ovocitos bovinos sometidos al proceso de migración nuclear químicamente inducida por medio del uso de DM con previa maduración de 24 horas. Durante este experimento se realizaron un conjunto de 8 baterías con un total de 1339 ovocitos colectados, los cuales se indujeron químicamente con DM durante un periodo de 2 horas posterior a la maduración in vitro (MIV), 26 horas en total duro el tratamiento. En el segundo experimento se evalúo el efecto del CL sobre el proceso cinético de la maduración nuclear en ovocitos bovinos sometidos a MIV. Durante este experimento se efectuaron un total de 5 baterías con una colecta de 540 ovocitos de los cuales 474 fueron teñidos y evaluados después de alcanzar 24 horas de maduración in vitro. Se evalúo la tasa de protrusión nuclear de ovocitos tratados con DM y la tasa de maduración nuclear de ovocitos madurados in vitro. El primer experimento revelo que no hay una gran variabilidad en el total de CCOs protruidos entre el grupo de ovocitos extraídos de ovarios con presencia de cuerpo lúteo (CL0) y grupo de ovocitos extraídos de ovarios con ausencia del cuerpo lúteo (CL1) obteniendo un porcentaje del 57,0 ± 7,4 y 54,6 ± 5,6 respectivamente. En el segundo experimento al evaluar la tasa de maduración nuclear de los ovocitos a las 24 horas de maduración in vitro, no se encontró significancia estadística de la presencia o ausencia del cuerpo lúteo, ya que todos los ovocitos evaluados llegaron al estadio de metafase II al momento de esta evaluación. Se concluye con base a los resultados obtenidos en este proyecto, que no existe una influencia del estatus cíclico de ovarios bovinos sobre la tasa de protrusión nuclear de ovocitos bovinos sometidos a maduración in vitro, sin embargo, el número de variables evaluadas y el número de replicas por tratamiento, se consideran insuficientes, presumiendo una posible variabilidad en los datos bajo un estudio con un mayor análisis de variables.
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spelling Moreno Jerez, Edgar RicardoMantilla Delgado, Brayan Sneider2022-01-28T17:25:45Z2022-01-28T17:25:45Z2021-11-08https://hdl.handle.net/20.500.12494/43522Mantilla Delgado, B. S. (2022). Efecto de la ciclicidad ovárica en la migración nuclear, mediante sustancias desestabilizadoras del citoesqueleto en ovocitos bovinos sometidos a maduración in vitro. [Tesis de pregrado, Universidad Cooperativa de Colombia]. Repositorio Institucional UCC. http://hdl.handle.net/20.500.12494/43522El objetivo de este estudio fue Determinar el efecto de la presencia o ausencia del cuerpo lúteo en la tasa de migración nuclear sobre ovocitos sometidos a maduración in vitro inducidos con Demecolcina (DM). Ovarios de hembras bovinas fueron obtenidos de una planta de beneficio local. Inicialmente fueron clasificados de acuerdo a la presencia o ausencia del cuerpo lúteo (CL) para la extracción de los complejos cumulus ovocitos (CCOs). En las dos clasificaciones propuestas se realizaron dos experimentos. El primero consistió en determinar el efecto ejercido del CL sobre ovocitos bovinos sometidos al proceso de migración nuclear químicamente inducida por medio del uso de DM con previa maduración de 24 horas. Durante este experimento se realizaron un conjunto de 8 baterías con un total de 1339 ovocitos colectados, los cuales se indujeron químicamente con DM durante un periodo de 2 horas posterior a la maduración in vitro (MIV), 26 horas en total duro el tratamiento. En el segundo experimento se evalúo el efecto del CL sobre el proceso cinético de la maduración nuclear en ovocitos bovinos sometidos a MIV. Durante este experimento se efectuaron un total de 5 baterías con una colecta de 540 ovocitos de los cuales 474 fueron teñidos y evaluados después de alcanzar 24 horas de maduración in vitro. Se evalúo la tasa de protrusión nuclear de ovocitos tratados con DM y la tasa de maduración nuclear de ovocitos madurados in vitro. El primer experimento revelo que no hay una gran variabilidad en el total de CCOs protruidos entre el grupo de ovocitos extraídos de ovarios con presencia de cuerpo lúteo (CL0) y grupo de ovocitos extraídos de ovarios con ausencia del cuerpo lúteo (CL1) obteniendo un porcentaje del 57,0 ± 7,4 y 54,6 ± 5,6 respectivamente. En el segundo experimento al evaluar la tasa de maduración nuclear de los ovocitos a las 24 horas de maduración in vitro, no se encontró significancia estadística de la presencia o ausencia del cuerpo lúteo, ya que todos los ovocitos evaluados llegaron al estadio de metafase II al momento de esta evaluación. Se concluye con base a los resultados obtenidos en este proyecto, que no existe una influencia del estatus cíclico de ovarios bovinos sobre la tasa de protrusión nuclear de ovocitos bovinos sometidos a maduración in vitro, sin embargo, el número de variables evaluadas y el número de replicas por tratamiento, se consideran insuficientes, presumiendo una posible variabilidad en los datos bajo un estudio con un mayor análisis de variables.Introducción. -- Objetivos. -- Objetivo general. -- Objetivos específicos. -- Revisión de literatura. -- Enucleación ovocitária. -- Enucleación convencional (micro manipulador). -- Enucleación por micro bisturí (Handmade Enucleation). -- Enucleación químicamente inducida. -- Ciclo de división celular. -- Dinámica de los microtúbulos y citoesqueleto celular. -- Demecolcina. -- Maduración Ovocitária. -- Materiales y Métodos. -- Colecta y transporte de ovarios. -- Recuperación y clasificación de los complejos cúmulos-ovocitos (CCOs). -- Maduración in vitro de ovocitos. -- Protrusión nuclear químicamente inducida. -- Identificación de la protrusión nuclear. -- Evaluación de la maduración nuclear. -- Diseño Experimental. -- Análisis Estadístico. -- Resultados y Discusión. -- Conclusiones. -- Recomendaciones. -- Bibliografía.brayan.mantillad@campusucc.edu.co54 p.Universidad Cooperativa de Colombia, Facultad de Ciencias de la Salud, Medicina Veterinaría y Zootecnia, BucaramangaMedicina veterinaria y zootecniaBucaramangaMaduración in vitroEnucleación celularDemecolcinaCiclicidad ováricaTG 2022 MVZ 43522Efecto de la ciclicidad ovárica en la migración nuclear, mediante sustancias desestabilizadoras del citoesqueleto en ovocitos bovinos sometidos a maduración in vitroTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionAtribución – No comercial – Sin Derivarinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2AKSHEY, Y., MALAKAR, D., DE, A., JENA, M., & DUTTA, S. S. (2011). Study of the Efficiency of Chemically Assisted Enucleation Method for Handmade Cloning in Goat (Capra hircus). Reproduction Domestic Animal, 699–704.ALBERTS, B., BRAY, D., LEWIS, J., RAFF, M., ROBERTS, K., & WATSON, J. D. (2002). Molecular biology of the cell. New York: Garland Science.BORGES COSTA, N., SANTALO, J., & IBAÑEZ, E. (2006). Preparation of recipient cytoplasts for nuclear transfer by chemical oocyte enucleation. Revista Iberoamericana de Fertilidad, 163-172.C.L. WANG, H. X. (2016). Stability of the cytoskeleton of matured buffalo oocytes pretreated with cytochalasin B prior to vitrification. Cryobiology 72, 274-282.CAMPBELL, K., ALBERIO, R., CHOI, I., FISHER, P., KELLY, R., LEE, J., & e MAALOUF, W. (2005). Cloning: eight years after Dolly. Reproduction in Domestic Animal, 256-268.CHEN LI, X. Y. (2007). The use of demecolcine for enucleation of bovine oocytes. Belgian Journal of Zoology, 209-214.COGNIÉ, Y., POULIN, N., LOCATELLI, Y., & MERMILLOD, P. (2004). 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