Fundamentos y métodos para la dilución y congelación de semen en bovinos

La preservación seminal es uno de los avances más importantes sobre las tecnologías reproductivas en el macho bovino que se han desarrollado en las últimas décadas que ha permitido además el desarrollo de biotecnologías reproductivas esenciales como la inseminación artificial. El objetivo de este tr...

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Autores:
Lombana Portes, Harol Estiben
Molano Villamil, Diego Alejandro
Tipo de recurso:
Trabajo de grado de pregrado
Fecha de publicación:
2021
Institución:
Universidad Cooperativa de Colombia
Repositorio:
Repositorio UCC
Idioma:
OAI Identifier:
oai:repository.ucc.edu.co:20.500.12494/34389
Acceso en línea:
https://hdl.handle.net/20.500.12494/34389
Palabra clave:
Bovinos
Criopreservación
Crioprotectores
Diluyentes
Espermatozoides
Preservación
TG 2021 MVZ 34389
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description La preservación seminal es uno de los avances más importantes sobre las tecnologías reproductivas en el macho bovino que se han desarrollado en las últimas décadas que ha permitido además el desarrollo de biotecnologías reproductivas esenciales como la inseminación artificial. El objetivo de este trabajo fue incluir los principales métodos de dilución y criopreservación seminal en bovinos. La preservación seminal puede darse a temperaturas fisiológicas o temperaturas más bajas como la refrigeración y la congelación. Entre los responsables de la preservación se encuentran los diluyentes quienes además de favorecer la sobrevivencia espermática, favorecen la extensión del eyaculado. Si bien diluyentes tradiciones como la leche descremada y la yema de huevo, actualmente existen a base de TRIS, que han permitido el desarrollo de diluyentes modernos. La congelación o criopreservación espermática, es una de las técnicas más importantes de preservación ya que permite almacenar de manera prolongada los espermatozoides sin efecto alguno sobre su metabolismo, al igual que engloba diferentes procesos que incluye desde la dilución hasta la congelación propiamente dicha. Dentro de este proceso existen sustancias importantes como los crioprotectores, que favorecen que el espermatozoide no sufra efectos secundarios durante el proceso de congelación como es la formación de cristales de hielo intracelular, daños en la membrana y en el ADN (Ácido Desoxirribonucleico), que comprometan su funcionalidad tras la descongelación. El crioprotector más importante en la congelación espermática bovina es el glicerol. La preservación espermática en bovinos evoluciona rápidamente y el desarrollo de nuevos diluyentes y protocolos de criopreservación permiten que la fertilidad en sistemas de producción bovina, así como en razas en riesgo de extinción se mantenga en niveles adecuados.
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dc.relation.references.spa.fl_str_mv Aires, V., Hinsch, K., Mueller-Schloesser, F., Bogner, K., Mueller-Schloesser, S., & Hinsch, E. (2003). In vitro and in vivo comparison of egg yolk-based and soybean lecithin-based extenders for cryopreservation of bovine semen. Theriogenology, 60(2), 269-279. https://doi.org/10.1016/S0093-691X(02)01369-9
Almela, L. (2014). Aportaciones a la crioconservación de gametos masculinos en la raza bovina murciano levantina: recongelación de espermatozoides. TDR (Tesis Doctorales en Red), 192. Recuperado de http://www.tdx.cat/handle/10803/284850
Arango, J., Durán, C., Lizaraazo, J., & Duarte, J. (2017). Development of automation and control system for the freezing of bovine semen . TECCIENCIA, 12(23), 69-74. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=6070558
Bandeira, T., Barboza, D., Furtado, L., Viana, A., Peres de Souza, L., Magloire, J., & Toniolli, R. (2015). The use of skimmed dried milk as an alternative diluent for the cooling step during the boar sêmen freezing procedure. Ciências Agrárias, 36(1), 2023-2030. https://doi.org/10.5433/1679-0359.2015v36n3Supl1p2023
Bhattacharya, S. (2018). Cryopretectants and Their Usage in Cryopreservation Process. En Cryopreservation Biotechnology in Biomedical and Biological Sciences. https://doi.org/10.5772/intechopen.80477
Bwanga, C. (1991). Cryopreservation of boar semen. I: A literature review. Acta Vet Scand, 32(4), 431-453. Recuperado de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1818503/
Canteras, N. (2019). Comparación entre la congelación clásica y la vitrificación cinética de semen de chivos durante la estación reproductiva. Trabajo de pregrado. Universidad de la Republica, Montevídeo, Uruguay.
Carpio, S. (2015). Evaluación de dos diluyentes para la criconservación de semen bovino: Yema de huevo vs Leche descremada (pp. 1-83). pp. 1-83. Recuperado de https://dspace.ups.edu.ec/bitstream/123456789/7955/1/UPS-CT004815.pdf
Condoy, M. C., & Cevallos, J. A. (2017). Diluyentes utilizados en inseminación artificial porcina. REDVET. Revista Electrónica de Veterinaria, Vol. 18, pp. 1-11. Recuperado de http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html
Cosson, J. J. (2013). ATP, The sperm movement energizer. Czech Republic.
Crespilho, A. M., Sá Filho, M. F., Dell’Aqua, J. A., Nichi, M., Monteiro, G. A., Avanzi, B. R., … Papa, F. O. (2012). Comparison of in vitro and in vivo fertilizing potential of bovine semen frozen in egg yolk or new lecithin based extenders. Livestock Science, 149(1-2), 1-6. https://doi.org/10.1016/j.livsci.2012.05.011
Domingo, D. Q., Acosta, M. L., Restrepo, G. B., Camacho, C., & Pérez, J. O. (2017). Congelación de Semen Equino Bajo Dos Esquemas de Adición de Dimetilformamida FREEZING OF EQUINE SEMEN UNDER TWO SCHEMES OF ADDITION OF DIMETHYLFORMAMIDE. Rev Inv Vet Perú, 28(4), 918-927. https://doi.org/10.15381/rivep.v28i4.13884
El-Sisy, G., El-Nattat, W., El-Sheshtawy, R., & El-Maaty, A. (2016). Substitution of egg yolk with different concentrations of soybean lecithin in tris-based extender during bulls’ semen preservability. Asian Pacific Journal of Reproduction , 5(6), 514-518. Recuperado de https://www.cabdirect.org/cabdirect/abstract/20173019306
Fedegan. (2017). Estadísticas de referencia del sector ganadero para el 2017. Recuperado de Federación Colombiana de Ganaderos website: https://estadisticas.fedegan.org.co/main/login.jsp
Fernández, A, & Larocca, C. (1997). Congelación de embriones bovinos con etilenglicol vs. glicerol . Archivos de zootecnia, 46(176), 295-300. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=1409554
Fernández, Ana, Gonzalvo, M., Clavero, A., Ruiz, R., Zamora, S., Roldán, M., … Castilla, J. (2009). Fundamentos de criobiología espermática para bancos de semen. Revista ASEBIR. Recuperado de https://revista.asebir.com/fundamentos-de-criobiologia-espermatica-para-bancos-de-semen/
Forero, R. A., Celeghini, E. C. C., Raphael, C. F., Andrade, A. F. C., Bressan, F. F., & Arruda, R. P. (2012). Effects of bovine sperm cryopreservation using different freezing techniques and cryoprotective agents on plasma, acrosomal and mitochondrial membranes. Andrologia, 44(SUPPL.1), 154-159. https://doi.org/10.1111/j.1439-0272.2010.01154.x
Gadea, J. (2003). Review: semen extenders used in the artificial inseminarion of swine. Spanish Journal of Agricultural Research, 1(2), 27. https://doi.org/10.5424/sjar/2003012-17
González, A., & Pallares, J. (2014). Eficiencia comparativa entre dos diluyentes para la criopreservación de semen en toros brahmán en el departamento de Antioquia (Trabajo de pregrado. Universidad La Salle). Recuperado de https://ciencia.lasalle.edu.co/medicina_veterinaria/208
González, D. (2018). Técnicas in vitro para la valoración espermática en bovinos (Trabajo de pregrado. Universidad Cooperativa de Colombia). Recuperado de https://repository.ucc.edu.co/bitstream/20.500.12494/6111/1/2018_tecnicas_in_vitro.pdf.pdf
Grauer, A., Grunberg, K., & Zardo, S. (2015). Puesta a punto de un protocolo de liofilización para la creación de bancos bactenianos. Trabajo de pregrado. Universidad ORT Uruguay, Uruguay.
Güngör, Ş., Aksoy, A., Yeni, D., Avdatek, F., Öztürk, C., Ataman, B., … Akalin, P. (2016). Combination of Cysteamine and Lipoic Acid Improves the Post-Thawed Bull Sperm Parameters Sisteamin ve Alfa Lipoik Asit Kombinasyonunun Dondurulmuş-Çözdürülmüş Boğa Sperması Parametreleri Üzerine Etkisi. Kocatepe Veterinary Journal Kocatepe Vet J, 9(2), 88-96. https://doi.org/10.5578/kvj.23105
Gutiérrez, L. (2014). Optimización de las técnicas de acondicionamiento del semen equino para los procesos de conservación seminal (Trabajo de postgrado. Universidad Complutense de Madrid). Recuperado de https://eprints.ucm.es/24898/1/T35236.pdf
Herold, F. C., de Haas, K., Colenbrander, B., & Gerber, D. (2006). Comparison of equilibration times when freezing epididymal sperm from African buffalo (Syncerus caffer) using TriladylTM or AndroMed®. Theriogenology, 66(5), 1123-1130. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2006.03.007
Hezavehei, M., Sharafi, M., Kouchesfahani, H. M., Henkel, R., Agarwal, A., Esmaeili, V., & Shahverdi, A. (2018, septiembre 1). Sperm cryopreservation: A review on current molecular cryobiology and advanced approaches. Reproductive BioMedicine Online, Vol. 37, pp. 327-339. https://doi.org/10.1016/j.rbmo.2018.05.012
Hidalgo, C., Tamargo, C., & Diez, C. (2005). Análisis del semen bovino. Recuperado de http://www.serida.org/pdfs/1495.pdf
Hussain, M., Kumar, M., Uddin, K., Nath, R., & Sultana, S. (2018). Additives used in semen preservation in animals: A short review. International Journal of Chemical Studies, 6(5), 354-361. Recuperado de https://www.chemijournal.com/archives/?year=2018&vol=6&issue=5&ArticleId=3571&si=false
Ibañez, F., Lisarrague, C., Callejas, S., & Cabodevilla, J. (2016). Inseminación artificial a tiempo fijo: ¿Conviene utilizar semen «fresco» en lugar de congelado? (Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires). Recuperado de https://www.ridaa.unicen.edu.ar/xmlui/bitstream/handle/123456789/1191/Ibañez Federico.PDF?sequence=1&isAllowed=y
Jiménez, P., Soler, A. J., Ramón, M., García-Álvarez, O., Maroto-Morales, A., Iniesta-Cuerda, M., … Garde, J. J. (2016). Influence of semen collection method on sperm cryoresistance in small ruminants. Animal Reproduction Science, 167, 103-108. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2016.02.013
Kandelousi, M., Arshami, J., Naserian, A. A., & Abavisani, A. (2013). The effects of addition of omega-3, 6, 9 fatty acids on the quality of bovine chilled and frozen-thawed sperm. Open Veterinary Journal, 3(1), 2226-4485. Recuperado de http://www.openveterinaryjournal.com
Khan, M., Sinha, P., Perumal, P., & Hazarika, S. (2017). Cryopresevation of mithun semen: Comparative study of conventional vs controlled freezing. Indian Journal of Animal Sciences, 87(6), 728-730. Recuperado de https://krishi.icar.gov.in/jspui/bitstream/123456789/24709/1/Khan-4.pdf
Mesa, A. M., & Henao, G. (2012). Efecto del colesterol y la dimetilformamida sobre parámetros posdescongelación en espermatozoides de caballos criollos colombianos. Revista MVZ Cordoba, 17(1), 2908-2915. https://doi.org/10.21897/rmvz.260
Muiño, R., & Peña, A. (2009). Estudio comparativo de tres diluyentes: Andromed®, Biociphos Plus® y Biladyl®. Evaluación de la supervivencia y longevidad espermáticas post-descongelación de espermatozoides bovinos . XXXIX Jornadas de Estudio. XIII Jornadas sobre producción Animal, 1, 714-716. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=3209305
Ptáček, M., Stádníková, M., Savvulidi, F., & Stádník, L. (2019). Ram Semen Cryopreservation Using Egg Yolk or Egg Yolk-free Extenders: Preliminary Results. Scientia Agriculturae Bohemica, 50(2), 96-103. https://doi.org/10.2478/sab-2019-0014
Ramónez, J. (2013). Evaluación de dos agentes crioprotectores no permeables y un diluyente comercial (triladyl) en la congelación de semen bovino. En Repositorio Institucional Universidad de Cuenca. Recuperado de http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/4535
Raseona, A. M., Ajao, O. A., Nethengwe, L. D., Madzhie, L. R., Nedambale, T. L., & Barry, D. M. (2017). Viability of bull semen extended with commercial semen extender and two culture media stored at 24 °C. South African Journal of Animal Sciences, 47(1), 49-55. https://doi.org/10.4314/sajas.v47i1.8
Restrepo, G., Duque, J., & Montoya, J. (2012). Efect of two protocols of cryopreservation on fertilizing capacity of stallion (Equus caballus) semen. Revista Facultad Nacional de Agronomía Medellín, 65(2). Recuperado de http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0304-28472012000200015
Ribeiro, A., Munita, L., Yumi, M., Mello, M. I., & Ferreira De Souza, F. (2014). Criopreservación de espermatozoides bovinos extraídos de la cola del epidídimo utilizando los métodos convencional y automatizado. Archivos de Medicina Veterinaria, 46(1), 31-38. https://doi.org/10.4067/S0301-732X2014000100005
Robayo, J., & Tovío, N. (2015). Efecto de metilxanrinas sobre la criopreservación de semen de toros de la raza criolla argentina. Revista Ciencias Agropecuarias, 1(1). Recuperado de http://revistas.ucundinamarca.edu.co/index.php/Ciencias_agropecuarias/article/view/187/56
Rubio, J., Quintero, A., & González, D. (2009). Efecto de la criopreservación sobre la integridad de la membrana plasmática y acrosomal de espermatozoides de toros. Revista Científica Facultad de Ciencias Veterinarias, 19(4), 382. Recuperado de http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-22592009000400010
Salim, N., Salim, A., & Abdallah, S. (2019). Fertility of friesian bull’s semen diluted with low fat cow milk. Journal of Agriculture and Veterinary Science (IOSR-JAVS), 12(3), 62-66. https://doi.org/10.1006/cryo.1993.1042
Schenk, J. L., Suh, T. K., Cran, D. G., & Seidel, G. E. (1999). Cryopreservation of flow-sorted bovine spermatozoa. Theriogenology, 52(8), 1375-1391. https://doi.org/10.1016/S0093-691X(99)00224-1
Smith, A., & Polge, C. (1950). Storage of bull spermatozoa at low temperatures. Veterinary Record, 62, 115-116. Recuperado de https://www.cabdirect.org/cabdirect/abstract/19502203397
Strzezek, J., Fraser, L., Lecewicz, A., Dziekonska, A., & Sáiz, F. (2004). Aplicaciones bioquímicas y prácticas de un diluyente para la conservación líquida de semen de verraco a 5o y a 16 oC - Dialnet. Avances en tecnología porcina, 1(11), 51-66. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=4340087
Tun Moo, M. (2019). Efecto de los ácidos grasos poliinsaturados en la dieta sobre la congelación del semen ovino (Trabajo de pregrado. Tecnológico Nacional de México). Recuperado de http://www.itconkal.edu.mx/images/POSGRADO_NEW/REPOSITORIO INSTITUCIONAL DE TESIS Y TRABAJO TERMINAL/2016-2018_Maximiliano Tun Moo.pdf
Ugur, M., Saber Abdelrahman, A., Evans, H., Gilmore, A., Hitit, M., Arifiantini, R., … Memili, E. (2019). Advances in Cryopreservation of Bull Sperm. Frontiers in Veterinary Science, 6, 268. https://doi.org/10.3389/fvets.2019.00268
Underwood, L., Solocinski, J., Rosiek, E., Osgood, Q., & Chakraborty, N. (2019). Active modulation of Hydrogen bonding by sericin enhances cryopreservation outcomes. bioRxiv, 1-43. https://doi.org/10.1101/773721
Villamizar, G. (2014). Manual de procedimientos para la colecta y criopreservación de semen bovino para la empresa santa clara genética estado Paraná. Recuperado de https://repository.ucc.edu.co/bitstream/20.500.12494/63/1/35-%28499-14%29manual de procedimientos para la colecta y criopreservacion de semen bovino para la empresa santa clara genetica estado parana -brasil..pdf
Viñan, H. (2017). Adición de Metil B-Ciclodextrina cargada de colesterol sobre la criopreservación de semen de toros Holsteins Friesian. Trabajo de postgrado. Universidad Nacional Agraria La Molina, Perú.
Viotti, G. (2011). Procesamiento de semen bovino para la inseminación artificial (Trabajo de pregrado. Universidad de la República). Recuperado de https://www.colibri.udelar.edu.uy/jspui/bitstream/20.500.12008/19819/1/FV-29377.pdf
Wall, R. J., & Foote, R. H. (1999). Fertility of bull sperm frozen and stored in clarified egg yolk-tris-glycerol extender. Journal of Dairy Science, 82(4), 817-821. https://doi.org/10.3168/jds.S0022-0302(99)75301-4
Weitze, K. (2014). Benefits of Androhep® Plus and Androstar® Plus Long-term extenders for boar semen (Technical Report. Minitüb GmbH). Recuperado de https://www.minitube.com.br/storage/web/source/en/media-library/technical-reports/benefits-of-androhep-plus-and-androstar-plus-long-term-extenders-for-boar-semen/pdf_Technical report_Androhep&Androstar_en_140528.pdf
Yeste, M. (2016). Sperm cryopreservation update: Cryodamage, markers, and factors affecting the sperm freezability in pigs. Theriogenology, 85(1), 47-64. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.09.047
Yoon, S.-J., Rahman, M. S., Kwon, W.-S., Park, Y.-J., & Pang, M.-G. (2016). Addition of Cryoprotectant Significantly Alters the Epididymal Sperm Proteome. PLOS ONE, 11(3), e0152690. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0152690
Yotov, S., Karadaev, M., Atanasov, A., Fasulkov, I., Antonov, A., & Kistanova, E. (2019). Effect of Extenders Containing Glycerol and Egg Yolk on Motility and Viability of Chilled Ram Semen collected during Non-Breeding Season. Int.J.Curr.Microbiol.App.Sci, 8(5), 588-596. https://doi.org/10.20546/ijcmas.2019.805.068
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spelling Lopera Vásquez, RicaurteLombana Portes, Harol EstibenMolano Villamil, Diego Alejandro2021-05-27T21:04:24Z2021-05-27T21:04:24Z2021-05-27https://hdl.handle.net/20.500.12494/34389Lombana Portes, H. E. y Molano Villamil, D. A. (2021). Fundamentos y métodos para la dilución y congelación de semen en Bovinos [Tesis de pregrado, Universidad Cooperativa de Colombia]. Repositorio Institucional UCC. http://hdl.handle.net/20.500.12494/34389La preservación seminal es uno de los avances más importantes sobre las tecnologías reproductivas en el macho bovino que se han desarrollado en las últimas décadas que ha permitido además el desarrollo de biotecnologías reproductivas esenciales como la inseminación artificial. El objetivo de este trabajo fue incluir los principales métodos de dilución y criopreservación seminal en bovinos. La preservación seminal puede darse a temperaturas fisiológicas o temperaturas más bajas como la refrigeración y la congelación. Entre los responsables de la preservación se encuentran los diluyentes quienes además de favorecer la sobrevivencia espermática, favorecen la extensión del eyaculado. Si bien diluyentes tradiciones como la leche descremada y la yema de huevo, actualmente existen a base de TRIS, que han permitido el desarrollo de diluyentes modernos. La congelación o criopreservación espermática, es una de las técnicas más importantes de preservación ya que permite almacenar de manera prolongada los espermatozoides sin efecto alguno sobre su metabolismo, al igual que engloba diferentes procesos que incluye desde la dilución hasta la congelación propiamente dicha. Dentro de este proceso existen sustancias importantes como los crioprotectores, que favorecen que el espermatozoide no sufra efectos secundarios durante el proceso de congelación como es la formación de cristales de hielo intracelular, daños en la membrana y en el ADN (Ácido Desoxirribonucleico), que comprometan su funcionalidad tras la descongelación. El crioprotector más importante en la congelación espermática bovina es el glicerol. La preservación espermática en bovinos evoluciona rápidamente y el desarrollo de nuevos diluyentes y protocolos de criopreservación permiten que la fertilidad en sistemas de producción bovina, así como en razas en riesgo de extinción se mantenga en niveles adecuados.Sperm preservation is one of the most important advances in reproductive technologies for bovine males developed on last time, that allow the development of reproductive biotechnologies as artificial insemination. The objective of this work is to include the main methods of Sperm dilution and cryopreservation in cattle. Seminal preservation can occur at physiological temperatures, or lower temperatures such as refrigeration and freezing. A responsible for semen preservation are diluents that promote sperm survival and the ejaculate extension. Traditional diluents are skimmed milk and egg yolk, however currently exist TRIS based that allow the development of modern diluents. Sperm freezing or cryopreservation is one of the most important preservation techniques since it allows storing prolonged sperm without any effect on sperm metabolism, and include processes that include from sperm dilution to sperm freezing. During sperm freezing there are important substances as cryoprotectants, that favor the sperm not suffer negative effects during the freezing process, as intracellular ice crystals formation, damage to DNA (Deoxyribonucleic Acid) and sperm membrane, which compromise its functionality after thawing. The most important cryoprotector in bovine sperm freezing is glycerol. Sperm preservation in cattle evolves rapidly and the development of new diluents and new cryopreservation protocols allow fertility in bovine production systems, as well as in breeds at risk of extinction be maintained at adequate levels.harol.lombanap@campusucc.edu.co24 p.Universidad Cooperativa de Colombia, Facultad de Ciencias de la Salud, Medicina Veterinaría y Zootecnia, VillavicencioMedicina veterinaria y zootecniaVillavicencioBovinosCriopreservaciónCrioprotectoresDiluyentesEspermatozoidesPreservaciónTG 2021 MVZ 34389Fundamentos y métodos para la dilución y congelación de semen en bovinosTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionAtribucióninfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Aires, V., Hinsch, K., Mueller-Schloesser, F., Bogner, K., Mueller-Schloesser, S., & Hinsch, E. (2003). In vitro and in vivo comparison of egg yolk-based and soybean lecithin-based extenders for cryopreservation of bovine semen. Theriogenology, 60(2), 269-279. https://doi.org/10.1016/S0093-691X(02)01369-9Almela, L. (2014). Aportaciones a la crioconservación de gametos masculinos en la raza bovina murciano levantina: recongelación de espermatozoides. TDR (Tesis Doctorales en Red), 192. Recuperado de http://www.tdx.cat/handle/10803/284850Arango, J., Durán, C., Lizaraazo, J., & Duarte, J. (2017). Development of automation and control system for the freezing of bovine semen . TECCIENCIA, 12(23), 69-74. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=6070558Bandeira, T., Barboza, D., Furtado, L., Viana, A., Peres de Souza, L., Magloire, J., & Toniolli, R. (2015). The use of skimmed dried milk as an alternative diluent for the cooling step during the boar sêmen freezing procedure. Ciências Agrárias, 36(1), 2023-2030. https://doi.org/10.5433/1679-0359.2015v36n3Supl1p2023Bhattacharya, S. (2018). Cryopretectants and Their Usage in Cryopreservation Process. En Cryopreservation Biotechnology in Biomedical and Biological Sciences. https://doi.org/10.5772/intechopen.80477Bwanga, C. (1991). Cryopreservation of boar semen. I: A literature review. Acta Vet Scand, 32(4), 431-453. Recuperado de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1818503/Canteras, N. (2019). Comparación entre la congelación clásica y la vitrificación cinética de semen de chivos durante la estación reproductiva. Trabajo de pregrado. Universidad de la Republica, Montevídeo, Uruguay.Carpio, S. (2015). Evaluación de dos diluyentes para la criconservación de semen bovino: Yema de huevo vs Leche descremada (pp. 1-83). pp. 1-83. Recuperado de https://dspace.ups.edu.ec/bitstream/123456789/7955/1/UPS-CT004815.pdfCondoy, M. C., & Cevallos, J. A. (2017). Diluyentes utilizados en inseminación artificial porcina. REDVET. Revista Electrónica de Veterinaria, Vol. 18, pp. 1-11. Recuperado de http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.htmlCosson, J. J. (2013). ATP, The sperm movement energizer. Czech Republic.Crespilho, A. M., Sá Filho, M. F., Dell’Aqua, J. A., Nichi, M., Monteiro, G. A., Avanzi, B. R., … Papa, F. O. (2012). Comparison of in vitro and in vivo fertilizing potential of bovine semen frozen in egg yolk or new lecithin based extenders. Livestock Science, 149(1-2), 1-6. https://doi.org/10.1016/j.livsci.2012.05.011Domingo, D. Q., Acosta, M. L., Restrepo, G. B., Camacho, C., & Pérez, J. O. (2017). Congelación de Semen Equino Bajo Dos Esquemas de Adición de Dimetilformamida FREEZING OF EQUINE SEMEN UNDER TWO SCHEMES OF ADDITION OF DIMETHYLFORMAMIDE. Rev Inv Vet Perú, 28(4), 918-927. https://doi.org/10.15381/rivep.v28i4.13884El-Sisy, G., El-Nattat, W., El-Sheshtawy, R., & El-Maaty, A. (2016). Substitution of egg yolk with different concentrations of soybean lecithin in tris-based extender during bulls’ semen preservability. Asian Pacific Journal of Reproduction , 5(6), 514-518. Recuperado de https://www.cabdirect.org/cabdirect/abstract/20173019306Fedegan. (2017). Estadísticas de referencia del sector ganadero para el 2017. Recuperado de Federación Colombiana de Ganaderos website: https://estadisticas.fedegan.org.co/main/login.jspFernández, A, & Larocca, C. (1997). Congelación de embriones bovinos con etilenglicol vs. glicerol . Archivos de zootecnia, 46(176), 295-300. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=1409554Fernández, Ana, Gonzalvo, M., Clavero, A., Ruiz, R., Zamora, S., Roldán, M., … Castilla, J. (2009). Fundamentos de criobiología espermática para bancos de semen. Revista ASEBIR. Recuperado de https://revista.asebir.com/fundamentos-de-criobiologia-espermatica-para-bancos-de-semen/Forero, R. A., Celeghini, E. C. C., Raphael, C. F., Andrade, A. F. C., Bressan, F. F., & Arruda, R. P. (2012). Effects of bovine sperm cryopreservation using different freezing techniques and cryoprotective agents on plasma, acrosomal and mitochondrial membranes. Andrologia, 44(SUPPL.1), 154-159. https://doi.org/10.1111/j.1439-0272.2010.01154.xGadea, J. (2003). Review: semen extenders used in the artificial inseminarion of swine. Spanish Journal of Agricultural Research, 1(2), 27. https://doi.org/10.5424/sjar/2003012-17González, A., & Pallares, J. (2014). Eficiencia comparativa entre dos diluyentes para la criopreservación de semen en toros brahmán en el departamento de Antioquia (Trabajo de pregrado. Universidad La Salle). Recuperado de https://ciencia.lasalle.edu.co/medicina_veterinaria/208González, D. (2018). Técnicas in vitro para la valoración espermática en bovinos (Trabajo de pregrado. Universidad Cooperativa de Colombia). Recuperado de https://repository.ucc.edu.co/bitstream/20.500.12494/6111/1/2018_tecnicas_in_vitro.pdf.pdfGrauer, A., Grunberg, K., & Zardo, S. (2015). Puesta a punto de un protocolo de liofilización para la creación de bancos bactenianos. Trabajo de pregrado. Universidad ORT Uruguay, Uruguay.Güngör, Ş., Aksoy, A., Yeni, D., Avdatek, F., Öztürk, C., Ataman, B., … Akalin, P. (2016). Combination of Cysteamine and Lipoic Acid Improves the Post-Thawed Bull Sperm Parameters Sisteamin ve Alfa Lipoik Asit Kombinasyonunun Dondurulmuş-Çözdürülmüş Boğa Sperması Parametreleri Üzerine Etkisi. Kocatepe Veterinary Journal Kocatepe Vet J, 9(2), 88-96. https://doi.org/10.5578/kvj.23105Gutiérrez, L. (2014). Optimización de las técnicas de acondicionamiento del semen equino para los procesos de conservación seminal (Trabajo de postgrado. Universidad Complutense de Madrid). Recuperado de https://eprints.ucm.es/24898/1/T35236.pdfHerold, F. C., de Haas, K., Colenbrander, B., & Gerber, D. (2006). Comparison of equilibration times when freezing epididymal sperm from African buffalo (Syncerus caffer) using TriladylTM or AndroMed®. Theriogenology, 66(5), 1123-1130. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2006.03.007Hezavehei, M., Sharafi, M., Kouchesfahani, H. M., Henkel, R., Agarwal, A., Esmaeili, V., & Shahverdi, A. (2018, septiembre 1). Sperm cryopreservation: A review on current molecular cryobiology and advanced approaches. Reproductive BioMedicine Online, Vol. 37, pp. 327-339. https://doi.org/10.1016/j.rbmo.2018.05.012Hidalgo, C., Tamargo, C., & Diez, C. (2005). Análisis del semen bovino. Recuperado de http://www.serida.org/pdfs/1495.pdfHussain, M., Kumar, M., Uddin, K., Nath, R., & Sultana, S. (2018). Additives used in semen preservation in animals: A short review. International Journal of Chemical Studies, 6(5), 354-361. Recuperado de https://www.chemijournal.com/archives/?year=2018&vol=6&issue=5&ArticleId=3571&si=falseIbañez, F., Lisarrague, C., Callejas, S., & Cabodevilla, J. (2016). Inseminación artificial a tiempo fijo: ¿Conviene utilizar semen «fresco» en lugar de congelado? (Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires). Recuperado de https://www.ridaa.unicen.edu.ar/xmlui/bitstream/handle/123456789/1191/Ibañez Federico.PDF?sequence=1&isAllowed=yJiménez, P., Soler, A. J., Ramón, M., García-Álvarez, O., Maroto-Morales, A., Iniesta-Cuerda, M., … Garde, J. J. (2016). Influence of semen collection method on sperm cryoresistance in small ruminants. Animal Reproduction Science, 167, 103-108. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2016.02.013Kandelousi, M., Arshami, J., Naserian, A. A., & Abavisani, A. (2013). The effects of addition of omega-3, 6, 9 fatty acids on the quality of bovine chilled and frozen-thawed sperm. Open Veterinary Journal, 3(1), 2226-4485. Recuperado de http://www.openveterinaryjournal.comKhan, M., Sinha, P., Perumal, P., & Hazarika, S. (2017). Cryopresevation of mithun semen: Comparative study of conventional vs controlled freezing. Indian Journal of Animal Sciences, 87(6), 728-730. Recuperado de https://krishi.icar.gov.in/jspui/bitstream/123456789/24709/1/Khan-4.pdfMesa, A. M., & Henao, G. (2012). Efecto del colesterol y la dimetilformamida sobre parámetros posdescongelación en espermatozoides de caballos criollos colombianos. Revista MVZ Cordoba, 17(1), 2908-2915. https://doi.org/10.21897/rmvz.260Muiño, R., & Peña, A. (2009). Estudio comparativo de tres diluyentes: Andromed®, Biociphos Plus® y Biladyl®. Evaluación de la supervivencia y longevidad espermáticas post-descongelación de espermatozoides bovinos . XXXIX Jornadas de Estudio. XIII Jornadas sobre producción Animal, 1, 714-716. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=3209305Ptáček, M., Stádníková, M., Savvulidi, F., & Stádník, L. (2019). Ram Semen Cryopreservation Using Egg Yolk or Egg Yolk-free Extenders: Preliminary Results. Scientia Agriculturae Bohemica, 50(2), 96-103. https://doi.org/10.2478/sab-2019-0014Ramónez, J. (2013). Evaluación de dos agentes crioprotectores no permeables y un diluyente comercial (triladyl) en la congelación de semen bovino. En Repositorio Institucional Universidad de Cuenca. Recuperado de http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/4535Raseona, A. M., Ajao, O. A., Nethengwe, L. D., Madzhie, L. R., Nedambale, T. L., & Barry, D. M. (2017). Viability of bull semen extended with commercial semen extender and two culture media stored at 24 °C. South African Journal of Animal Sciences, 47(1), 49-55. https://doi.org/10.4314/sajas.v47i1.8Restrepo, G., Duque, J., & Montoya, J. (2012). Efect of two protocols of cryopreservation on fertilizing capacity of stallion (Equus caballus) semen. Revista Facultad Nacional de Agronomía Medellín, 65(2). Recuperado de http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0304-28472012000200015Ribeiro, A., Munita, L., Yumi, M., Mello, M. I., & Ferreira De Souza, F. (2014). Criopreservación de espermatozoides bovinos extraídos de la cola del epidídimo utilizando los métodos convencional y automatizado. Archivos de Medicina Veterinaria, 46(1), 31-38. https://doi.org/10.4067/S0301-732X2014000100005Robayo, J., & Tovío, N. (2015). Efecto de metilxanrinas sobre la criopreservación de semen de toros de la raza criolla argentina. Revista Ciencias Agropecuarias, 1(1). Recuperado de http://revistas.ucundinamarca.edu.co/index.php/Ciencias_agropecuarias/article/view/187/56Rubio, J., Quintero, A., & González, D. (2009). Efecto de la criopreservación sobre la integridad de la membrana plasmática y acrosomal de espermatozoides de toros. Revista Científica Facultad de Ciencias Veterinarias, 19(4), 382. Recuperado de http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-22592009000400010Salim, N., Salim, A., & Abdallah, S. (2019). Fertility of friesian bull’s semen diluted with low fat cow milk. Journal of Agriculture and Veterinary Science (IOSR-JAVS), 12(3), 62-66. https://doi.org/10.1006/cryo.1993.1042Schenk, J. L., Suh, T. K., Cran, D. G., & Seidel, G. E. (1999). Cryopreservation of flow-sorted bovine spermatozoa. Theriogenology, 52(8), 1375-1391. https://doi.org/10.1016/S0093-691X(99)00224-1Smith, A., & Polge, C. (1950). Storage of bull spermatozoa at low temperatures. Veterinary Record, 62, 115-116. Recuperado de https://www.cabdirect.org/cabdirect/abstract/19502203397Strzezek, J., Fraser, L., Lecewicz, A., Dziekonska, A., & Sáiz, F. (2004). Aplicaciones bioquímicas y prácticas de un diluyente para la conservación líquida de semen de verraco a 5o y a 16 oC - Dialnet. Avances en tecnología porcina, 1(11), 51-66. Recuperado de https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=4340087Tun Moo, M. (2019). Efecto de los ácidos grasos poliinsaturados en la dieta sobre la congelación del semen ovino (Trabajo de pregrado. Tecnológico Nacional de México). Recuperado de http://www.itconkal.edu.mx/images/POSGRADO_NEW/REPOSITORIO INSTITUCIONAL DE TESIS Y TRABAJO TERMINAL/2016-2018_Maximiliano Tun Moo.pdfUgur, M., Saber Abdelrahman, A., Evans, H., Gilmore, A., Hitit, M., Arifiantini, R., … Memili, E. (2019). Advances in Cryopreservation of Bull Sperm. Frontiers in Veterinary Science, 6, 268. https://doi.org/10.3389/fvets.2019.00268Underwood, L., Solocinski, J., Rosiek, E., Osgood, Q., & Chakraborty, N. (2019). Active modulation of Hydrogen bonding by sericin enhances cryopreservation outcomes. bioRxiv, 1-43. https://doi.org/10.1101/773721Villamizar, G. (2014). Manual de procedimientos para la colecta y criopreservación de semen bovino para la empresa santa clara genética estado Paraná. Recuperado de https://repository.ucc.edu.co/bitstream/20.500.12494/63/1/35-%28499-14%29manual de procedimientos para la colecta y criopreservacion de semen bovino para la empresa santa clara genetica estado parana -brasil..pdfViñan, H. (2017). Adición de Metil B-Ciclodextrina cargada de colesterol sobre la criopreservación de semen de toros Holsteins Friesian. Trabajo de postgrado. Universidad Nacional Agraria La Molina, Perú.Viotti, G. (2011). Procesamiento de semen bovino para la inseminación artificial (Trabajo de pregrado. Universidad de la República). Recuperado de https://www.colibri.udelar.edu.uy/jspui/bitstream/20.500.12008/19819/1/FV-29377.pdfWall, R. J., & Foote, R. H. (1999). Fertility of bull sperm frozen and stored in clarified egg yolk-tris-glycerol extender. Journal of Dairy Science, 82(4), 817-821. https://doi.org/10.3168/jds.S0022-0302(99)75301-4Weitze, K. (2014). Benefits of Androhep® Plus and Androstar® Plus Long-term extenders for boar semen (Technical Report. Minitüb GmbH). Recuperado de https://www.minitube.com.br/storage/web/source/en/media-library/technical-reports/benefits-of-androhep-plus-and-androstar-plus-long-term-extenders-for-boar-semen/pdf_Technical report_Androhep&Androstar_en_140528.pdfYeste, M. (2016). Sperm cryopreservation update: Cryodamage, markers, and factors affecting the sperm freezability in pigs. Theriogenology, 85(1), 47-64. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.09.047Yoon, S.-J., Rahman, M. S., Kwon, W.-S., Park, Y.-J., & Pang, M.-G. (2016). Addition of Cryoprotectant Significantly Alters the Epididymal Sperm Proteome. PLOS ONE, 11(3), e0152690. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0152690Yotov, S., Karadaev, M., Atanasov, A., Fasulkov, I., Antonov, A., & Kistanova, E. (2019). Effect of Extenders Containing Glycerol and Egg Yolk on Motility and Viability of Chilled Ram Semen collected during Non-Breeding Season. Int.J.Curr.Microbiol.App.Sci, 8(5), 588-596. https://doi.org/10.20546/ijcmas.2019.805.068PublicationLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-84334https://repository.ucc.edu.co/bitstreams/d5965f83-8bc4-4e1e-95ee-a5a681b5f18b/download3bce4f7ab09dfc588f126e1e36e98a45MD56ORIGINAL2021_fundamentos_métodos_dilución.pdf2021_fundamentos_métodos_dilución.pdfTrabajo de gradoapplication/pdf201339https://repository.ucc.edu.co/bitstreams/440e3e16-6ba8-42d8-9915-efdc8391ec93/download3c8b69f8a6040c6ee7aaa0f98081a755MD572021_fundamentos_métodos_dilución.pdf2021_fundamentos_métodos_dilución.pdfLicencia de usoapplication/pdf2386249https://repository.ucc.edu.co/bitstreams/51dc0fbc-e27f-4ed5-8ced-4594fb10d8a3/download6e1c9409392b588ed80dcb39fb55ffefMD58THUMBNAIL2021_fundamentos_métodos_dilución.pdf.jpg2021_fundamentos_métodos_dilución.pdf.jpgGenerated 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